D/E中和肉汤：用于消毒剂、防腐剂残留样品微生物检测的中和培养基
- 2026-06-22 17:41:13
- 逗点生物
D/E中和肉汤：用于消毒剂、防腐剂残留样品微生物检测的中和培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | D/E中和肉汤 |
| 英文名称 | D/E Neutralizing Broth / Dey-Engley Neutralizing Broth |
| 货号 | GF1095 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封三年 |
| 产品用途 | 用于消毒剂和防腐剂测试，以及有消毒剂残留的环境微生物检测 |
| 参考标准 | 可用于化妆品、环境或消毒剂相关微生物检测中需要中和残留抑菌物质的场景 |
| 培养条件 | 35～37℃培养48 h，具体按检测方法执行 |
| 外观特点 | 因含吐温-80和卵磷脂，灭菌后可呈浑浊状，并可能有少量沉淀 |
配方组成及作用
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨 | 5.0 g/L | 提供氮源、氨基酸和多肽 | 支持受损或低水平污染微生物恢复生长 |
| 酵母浸粉 | 2.5 g/L | 提供维生素、核苷酸和生长因子 | 改善微生物复苏和增殖能力 |
| 葡萄糖 | 10.0 g/L | 可发酵糖类，提供碳源和能源 | 支持细菌生长；部分菌发酵产酸可使指示剂变黄 |
| 硫代乙醇酸钠 | 1.0 g/L | 还原剂和中和剂 | 有助于降低氧化还原电位，并参与中和部分消毒剂残留 |
| 硫代硫酸钠 | 6.0 g/L | 还原性中和剂 | 常用于中和碘类、含氯氧化性消毒剂等残留 |
| 亚硫酸氢钠 | 2.5 g/L | 还原性中和剂 | 可参与中和醛类及部分氧化性抑菌物质 |
| 溴甲酚紫 | 0.02 g/L | pH指示剂 | 酸性条件下变黄，帮助观察糖发酵产酸反应 |
| 卵磷脂 | 7.0 g/L | 中和剂和保护性成分 | 常用于中和季铵盐类表面活性消毒剂，并有助于保护细胞 |
| 吐温-80 | 5.0 g/L，另加 | 非离子表面活性剂和中和剂 | 常用于中和酚类、防腐剂和部分表面活性剂类抑菌物质 |
| 最终pH | 7.6±0.2，25℃ | 维持弱碱性初始环境 | 保证中和体系和微生物复苏环境相对稳定 |
培养基原理
D/E中和肉汤的设计重点是“先中和，再培养”。样品中若残留季铵盐、酚类、碘类、含氯消毒剂、醛类防腐剂或其他抑菌成分，可能在接种后继续作用于微生物，使实际存活菌无法生长，最终造成假阴性或计数偏低。D/E中和肉汤通过多种中和剂复配，扩大对不同消毒剂和防腐剂的中和范围，提高微生物检测的可靠性。
其中，卵磷脂和吐温-80主要用于中和表面活性剂类、季铵盐类、酚类及部分防腐剂残留；硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫代乙醇酸钠具有还原作用，可中和部分氧化性或反应性消毒剂。胰蛋白胨、酵母浸粉和葡萄糖为微生物提供营养，使受消毒剂轻度损伤的细胞有机会恢复生长。
溴甲酚紫用于指示pH变化。大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌等可利用葡萄糖产酸，使培养基转为黄色；铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌等在该条件下可能不表现明显产酸反应，培养基仍保持紫色。因此，颜色变化可以作为生长代谢的辅助观察指标，但不应单独作为菌种鉴定依据。
使用方法
称取本品34.0 g，另取吐温-80 5.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热至完全溶解，分装后于121℃高压灭菌15 min，冷却后备用。
由于培养基中含有较多吐温-80和卵磷脂，灭菌后出现浑浊或少量沉淀通常属于正常现象，不宜简单判定为污染或配制失败。使用前可轻轻混匀，但应避免剧烈震荡导致泡沫过多。若出现异常颜色、明显絮状污染、异味或pH明显偏离，则不建议继续使用。
质量控制
按标签方法制备培养基后，接种质控菌株，于35～37℃培养48 h，观察生长情况和培养基颜色变化。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | 生长良好，培养基变黄色 |
| 生长率 | 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 | 生长良好，培养基变黄色 |
| 生长率 | 金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 | 生长良好，培养基变黄色 |
| 生长率 | 铜绿假单胞菌 ATCC 27853 | 生长良好，培养基紫色 |
| 生长率 | 枯草芽孢杆菌 ATCC 6633 | 生长良好，培养基紫色 |
若大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌或金黄色葡萄球菌生长良好但不变黄，应检查葡萄糖、溴甲酚紫、培养时间和菌株活性。若铜绿假单胞菌或枯草芽孢杆菌生长不良，应关注培养基营养支持能力、灭菌条件、pH及菌株状态。若整体生长偏弱，还需排查中和剂是否称量错误、培养基是否过度加热、干粉是否吸潮变质或培养条件是否不符合要求。
使用中的关键注意点
D/E中和肉汤能降低残留消毒剂对检测结果的干扰，但不同消毒剂体系的化学性质差异较大，并非所有残留物都能被完全中和。进行消毒剂效力评价、环境微生物检测或防腐剂残留样品检测时，建议根据方法要求进行中和剂有效性和无毒性验证：一方面确认中和剂能够终止消毒剂作用，另一方面确认中和剂本身不会抑制目标微生物生长。
本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受环境湿度、密封状态和取用频次影响，保质时间可能缩短，应结合实际保存状态评估。
检测结束后的带菌培养物、试管、吸头和其他污染物，应按实验室生物安全要求处理，建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。
