哥伦比亚CNA血琼脂基础：用于溶血性链球菌选择性分离的血琼脂培养基

产品信息与用途

配方组成及作用

培养基原理

哥伦比亚CNA血琼脂基础的核心设计思路是“高营养基础+血液鉴别+抗生素选择”。胰酪蛋白胨、动物组织蛋白酶消化物、酵母提取粉和牛肉提取粉共同提供氮源、维生素和生长因子，使营养要求较高的链球菌能够形成较典型菌落。玉米淀粉可吸附培养过程中产生的脂肪酸、过氧化物等潜在抑制性物质，有助于提高链球菌等敏感菌的恢复能力。

加入无菌脱纤维绵羊血后，培养基可用于观察溶血类型。β溶血表现为菌落周围红细胞完全溶解，形成透明溶血环；α溶血多表现为菌落周围出现草绿色或半透明溶血区；γ溶血则通常无明显溶血环。对于乙型溶血性链球菌，典型表现为灰白色、圆形、光滑、半透明小菌落，周围有明显β溶血环。

多黏菌素类选择剂和萘啶酸共同提高培养基选择性。多黏菌素类抗生素主要作用于革兰氏阴性菌外膜，萘啶酸可抑制部分革兰氏阴性杆菌DNA复制，两者配合可减少大肠埃希氏菌等背景菌生长，从而更利于链球菌类目标菌分离。

使用方法

称取本品42.5 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于121℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却至约50℃时，每100 mL基础培养基加入5 mL无菌脱纤维绵羊血，轻轻摇匀后倾注无菌平皿。

加入羊血时温度控制非常关键。温度过高可能破坏红细胞及不耐热生长因子，导致培养基颜色发暗或溶血背景异常；温度过低则容易提前凝固，影响混匀和倒板。通常建议在45～50℃范围内加入羊血，并轻柔混匀，避免剧烈震荡产生气泡或造成红细胞机械性破坏。

质量控制

按标签方法制备培养基并加入5%无菌脱纤维羊血后，接种质控菌株，按规定条件培养后观察生长、溶血和选择性表现。

若乙型溶血性链球菌生长率偏低，应重点检查羊血质量、血液添加温度、平板新鲜度、培养气氛、培养时间、培养温度及菌种活性。若溶血环不明显，应关注血液来源、血液保存状态、平板厚度和培养时间。若大肠埃希氏菌生长明显，则需检查选择性成分是否有效、称量是否准确、灭菌过程是否异常或培养基是否超过适宜使用期限。

操作与储存注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后保质时间会受环境湿度、密封状态和取用频次影响，应根据实际保存状态评估。

血琼脂平板制备后应注意避光、低温、密封保存，并尽量在有效期内使用。若平板出现干裂、明显脱水、污染、颜色异常、血液分层或溶血背景异常，不宜继续使用。检测结束后的带菌平板、接种工具及其他污染物，应按实验室生物安全要求处理，建议置于121℃高压灭菌30 min后再废弃。