十六烷基三甲基溴化铵琼脂：铜绿假单胞菌选择性分离培养基

产品信息与用途

配方组成及作用

培养基原理

十六烷基三甲基溴化铵属于季铵盐类阳离子表面活性剂，对许多细菌具有抑制作用。其可影响细胞膜通透性，使敏感菌细胞内含氮、含磷物质外漏，进而抑制非目标菌生长。铜绿假单胞菌对该成分具有相对较强耐受性，因此可在该培养基上形成可见菌落。

牛肉膏粉和蛋白胨提供基础营养，支持铜绿假单胞菌恢复和增殖；氯化钠维持渗透压；琼脂形成固体平板，便于分离单个菌落。铜绿假单胞菌在适宜条件下可产生绿脓菌素、荧光素等色素，使菌落或周围培养基呈绿色、蓝绿色或黄绿色。色素表现有助于初步识别，但不能替代确证试验。

与部分CN琼脂或改良Cetrimide培养基相比，本配方未列入甘油、硫酸镁、硫酸钾等促进色素形成的组分，因此色素强弱可能更依赖菌株自身特性和培养条件。若质控菌株色素不明显，应结合生长情况、培养时间、平板新鲜度和菌株活性综合分析。

使用方法

称取本品38.3 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，于115℃高压灭菌20 min。灭菌后冷却至适宜温度，混匀后倾注无菌平板，凝固后备用。

配制时应确保琼脂完全溶解，避免凝固不均。由于十六烷基三甲基溴化铵为选择性抑菌成分，称量和灭菌条件应按标签执行，不宜随意提高浓度或延长灭菌时间，以免影响目标菌生长。灭菌后若出现明显沉淀、颜色异常、污染、凝固不良或pH明显偏离，应停止使用。

质量控制

按标签方法制备培养基后，接种质控菌株，于36℃培养24 h，观察目标菌生长和非目标菌抑制情况。

PR≥0.7表示培养基应能有效支持铜绿假单胞菌生长；G≤1表示大肠埃希氏菌应受到明显抑制。若铜绿假单胞菌生长率偏低，应重点检查培养基称量、pH、灭菌条件、平板干燥程度、培养温度、培养时间和菌株活性。若大肠埃希氏菌生长明显，则需关注十六烷基三甲基溴化铵含量、培养基保存状态、灭菌条件或配制误差。

结果观察与判读要点

培养后应观察菌落数量、菌落形态、颜色和培养基周围色素变化。疑似铜绿假单胞菌可表现为圆形、边缘较整齐或略不规则的菌落，并可产生绿色或蓝绿色色素。部分菌株也可能色素较弱，或在培养初期色素不明显，因此不能仅以是否产绿色色素作为唯一判断依据。

若平板上出现疑似菌落，应进一步进行氧化酶试验、革兰氏染色、生化鉴定、商品化鉴定系统或分子方法确认。若样品背景菌较复杂，可结合其他选择性培养基或确认培养基提高检出可靠性。

操作与储存注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受环境湿度、密封状态和取用频次影响，保质时间可能缩短，应根据实际保存状态评估。

十六烷基三甲基溴化铵为表面活性抑菌成分，操作时应避免粉尘吸入和皮肤、眼部接触。制备后的平板应密封保存，避免长时间暴露导致干裂或选择性变化。检测结束后的带菌平板、吸头、接种工具及其他污染物，应按实验室生物安全要求处理，建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。