氯化镁孔雀绿肉汤（MM/RV/R10）：沙门氏菌选择性增菌培养基
- 2026-06-22 17:58:18
- 逗点生物
氯化镁孔雀绿肉汤（MM/RV/R10）：沙门氏菌选择性增菌培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 氯化镁孔雀绿肉汤（MM/RV/R10） |
| 常用名称 | 氯化镁孔雀绿增菌液、RV培养基、Rappaport-Vassiliadis Medium |
| 英文名称 | Rappaport-Vassiliadis Medium |
| 货号 | GF1104 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封三年 |
| 产品用途 | 用于沙门氏菌的选择性增菌培养 |
| 参考方法 | FDA BAM及ISO 6579系列沙门氏菌检测方法相关选择性增菌思路 |
| 培养条件 | 42±1℃培养24 h，具体按检测方法执行 |
| 外观说明 | 产品可有微量沉淀，轻微沉淀不一定表示培养基失效 |
配方组成及作用
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨 | 4.5 g/L | 提供氮源、氨基酸和多肽 | 支持沙门氏菌在选择性条件下恢复和增殖 |
| 氯化钠 | 7.2 g/L | 维持渗透压 | 保持培养体系离子强度和细菌基本生理环境 |
| 磷酸二氢钾 | 1.44 g/L | 缓冲剂 | 帮助维持培养基pH稳定 |
| 无水氯化镁 | 16.8 g/L | 提高渗透压，形成选择压力 | 抑制部分非目标菌，同时沙门氏菌相对耐受 |
| 孔雀绿 | 0.036 g/L | 选择性抑菌剂 | 抑制部分革兰氏阳性菌、肠球菌及其他背景菌 |
| 最终pH | 5.5±0.2，25℃ | 形成偏酸性选择环境 | 与高镁盐、孔雀绿共同提高对沙门氏菌的选择性 |
| 干粉称量 | 30.0 g/L | 商品化配制量 | 按标签称取本品30.0 g配制1 L培养基 |
培养基原理
氯化镁孔雀绿肉汤的核心原理是利用沙门氏菌对特定选择压力的耐受性，使其在混合菌群中获得增殖优势。培养基初始pH较低，约为5.5；同时含有较高浓度氯化镁，使环境渗透压升高；孔雀绿则进一步抑制非目标菌。低pH、高渗透压和染料抑菌三者共同作用，使大肠埃希氏菌、肠球菌等背景菌受到限制，而沙门氏菌仍可增殖。
胰蛋白胨为目标菌提供基础营养，氯化钠维持离子平衡，磷酸二氢钾参与缓冲体系。由于该培养基选择性较强，通常不适合作为唯一增菌步骤。实际检测中，沙门氏菌常先经非选择性预增菌修复受损菌体，再转入RV类选择性增菌液，随后划线接种至选择性分离平板，最后结合生化、血清学或分子方法确认。
需要注意的是，RV培养基中肉汤浑浊只能说明有微生物生长，不能直接判定为沙门氏菌阳性。沙门氏菌的确证必须依赖后续选择性分离和鉴定结果。
使用方法
称取本品30.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热至完全溶解，分装试管后于115℃高压灭菌15 min，冷却后备用。
本培养基含孔雀绿和高浓度镁盐，配制后可能出现微量沉淀，若沉淀轻微且无污染、无明显颜色异常，一般不影响使用。灭菌条件建议按标签执行，不宜随意提高灭菌温度或延长灭菌时间，以免影响孔雀绿稳定性、pH和选择性表现。使用前应检查培养基颜色、pH、澄清度及是否污染。
质量控制
按标签方法制备培养基后，接种质控菌株，于42±1℃培养24 h，观察增菌液生长情况，并按要求转种至相应分离培养基或非选择性培养基进行评价。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 鼠伤寒沙门氏菌 ATCC 14028 | 肉汤浑浊，转种XLD琼脂后＞20 CFU，菌落红色，有黑心 |
| 生长率 | 乙型副伤寒沙门氏菌 CMCC(B) 50094 | 肉汤浑浊，转种XLD琼脂后＞20 CFU，菌落红色，有黑心 |
| 选择性 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | 转种TSA后＜100 CFU |
| 选择性 | 粪肠球菌 ATCC 29212 | 转种TSA后＜100 CFU |
其中，“粪球肠菌”建议规范写作“粪肠球菌”。沙门氏菌质控株应能在RV培养基中增殖，并在XLD琼脂上形成典型红色、带黑心菌落。大肠埃希氏菌和粪肠球菌应受到明显抑制，用于评价培养基选择性是否正常。
若沙门氏菌生长不良，应重点检查培养温度是否达到42±1℃、培养时间是否足够、培养基pH是否偏离、灭菌条件是否过强、菌株活性是否正常。若大肠埃希氏菌或粪肠球菌抑制不足，则需关注孔雀绿含量、氯化镁浓度、培养基保存状态、配制量和pH控制是否准确。
结果观察与判读要点
RV培养基培养后，可先观察肉汤是否浑浊，但浑浊并不等于沙门氏菌阳性。正确判读应结合后续分离培养结果。例如，转种至XLD琼脂后，疑似沙门氏菌常形成红色菌落，部分菌株因产硫化氢出现黑心。若分离平板出现疑似菌落，应继续进行生化鉴定、血清学凝集或其他确认试验。
若增菌液不浑浊，也不能在所有情况下直接排除沙门氏菌，特别是样品中目标菌极低、受损严重或前处理不当时，可能影响增菌效果。实际检测应严格按照对应标准方法的样品量、预增菌、选择性增菌、分离培养和确认流程执行。
操作与储存注意事项
本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。孔雀绿为染料类选择性成分，操作时应避免粉尘吸入和皮肤、眼部接触。干粉使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。
未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受环境湿度、密封状态和取用频次影响，保质时间可能缩短，应根据实际保存状态评估。配制后的培养基应避光保存，避免长时间放置导致选择性成分变化。检测结束后的带菌培养液、试管、吸头和其他污染物，应按实验室生物安全要求处理，建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。
