42℃生长培养基：副溶血性弧菌耐温生长试验用培养基

产品信息与用途

成分	用量	主要作用	用途说明
胰蛋白胨	17.0 g/L	提供氮源、氨基酸和多肽	支持弧菌恢复、生长和增殖
大豆胨	3.0 g/L	提供植物源氮源、维生素和生长因子	与胰蛋白胨配合，提高培养基营养水平
氯化钠	30.0 g/L	调节渗透压，形成3%盐浓度环境	满足副溶血性弧菌等嗜盐菌生长需求，并抑制部分非耐盐菌
磷酸氢二钾	2.5 g/L	缓冲剂	维持培养基pH相对稳定，减轻代谢产物造成的pH波动
葡萄糖	2.5 g/L	可利用碳源和能源	支持细菌生长和能量代谢
最终pH	7.3±0.2，25℃	维持适宜弱碱性环境	有利于弧菌类细菌生长和试验结果稳定
干粉称量	55.0 g/L	商品化配制量	按标签称取本品55.0 g配制1 L培养基

42℃生长培养基的检验原理较为直接：将待检菌接种于含3%氯化钠的营养肉汤中，在42±1℃条件下培养，观察菌株是否能够生长。副溶血性弧菌来源于海洋或海产品环境，通常对氯化钠有一定需求或耐受性，并可在较高温度下生长。因此，42℃生长试验可用于其生理特征观察。

培养基中胰蛋白胨和大豆胨提供丰富营养，葡萄糖提供能量来源，磷酸氢二钾维持pH稳定。30.0 g/L氯化钠形成3%盐浓度环境，既有利于副溶血性弧菌生长，又能对部分不耐盐菌产生压力。42℃培养温度进一步提高鉴别性，可抑制某些低温或中温环境菌，如恶臭假单胞菌等非目标菌。

该培养基不含显色剂，也不依靠产酸、产气或颜色变化判读。其核心观察指标是肉汤浑浊度。培养后肉汤变浑浊，说明接种菌可在该条件下增殖；若肉汤保持澄清，说明该菌在此条件下不生长或生长受到明显抑制。

称取本品55.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装小试管后，于121℃高压灭菌15 min，冷却后备用。

配制时应确保干粉完全溶解，特别是氯化钠含量较高，应充分搅拌避免局部浓度不均。分装量应保持一致，以便培养后比较浑浊度。灭菌后若出现明显沉淀、颜色异常、污染、pH明显偏离或试管液量异常，应停止使用。

按标签方法制备培养基后，接种质控菌株，于42±1℃需氧培养18～24 h，观察肉汤生长情况。

副溶血性弧菌ATCC 17802应表现为浑浊，说明培养基对目标弧菌具有良好支持能力；恶臭假单胞菌应被抑制，用于评价42℃和高盐条件下的鉴别性；霍乱弧菌也可生长浑浊，提示该培养基并非副溶血性弧菌专属性培养基，而是用于耐温生长特征观察。

若副溶血性弧菌生长不良，应重点检查培养温度、培养时间、氯化钠浓度、培养基pH、灭菌条件和菌株活性。若恶臭假单胞菌明显生长，则需检查培养温度是否偏低、培养时间是否过长、接种量是否过大或培养基配制是否异常。

结果判读时，应与未接种空白对照管比较。若接种管明显浑浊，而空白对照保持澄清，可判定该菌株在42℃条件下生长阳性；若接种管与空白对照无明显差异，则判为阴性或生长受抑制。若培养基本身浑浊、污染或有异常沉淀，应重新制备并复测。

需要注意的是，浑浊只能说明菌株在该条件下生长，不能直接判定为副溶血性弧菌。副溶血性弧菌的完整鉴定通常还需要结合3%NaCl生长、0%NaCl不生长或生长弱、氧化酶阳性、TCBS平板菌落特征、生化反应及必要的分子确认等结果。

本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受环境湿度、密封状态和取用频次影响，保质时间可能缩短，应根据实际保存状态评估。

配制后的培养基应按实验室要求保存，使用前检查颜色、澄清度、液量和是否污染。检测结束后的带菌试管、吸头、接种环及其他污染物，应按实验室生物安全要求处理，建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。