乳平板计数琼脂(MPC):乳与乳制品中嗜冷菌和需氧芽孢计数常用培养基
- 2026-06-22 18:06:53
- 逗点生物
乳平板计数琼脂(MPC):乳与乳制品中嗜冷菌和需氧芽孢计数常用培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 乳平板计数琼脂(MPC) |
| 英文名称 | Milk Plate Count Agar |
| 货号 | GF1112 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封三年 |
| 产品用途 | 用于乳与乳制品中嗜冷菌菌落总数和需氧芽孢总数的测定 |
| 参考标准 | NY/T 1331-2007《乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定》及相关ISO方法 |
| 培养基类型 | 非选择性营养计数培养基 |
| 质控培养条件 | 35~37℃培养24 h |
| 典型用途特点 | 适合乳品样品中可培养需氧菌、嗜冷菌及经前处理后芽孢菌的平板计数 |
配方组成及作用
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨 | 5.0 g/L | 提供氮源、氨基酸和多肽 | 支持乳品中多种细菌恢复和生长 |
| 酵母浸膏 | 2.5 g/L | 提供B族维生素、核苷酸和生长因子 | 改善培养基营养水平,促进受损菌形成菌落 |
| 葡萄糖 | 1.0 g/L | 可利用碳源和能源 | 为细菌生长提供基础能量来源 |
| 脱脂奶粉 | 1.0 g/L | 提供乳蛋白、乳糖和乳源营养成分 | 更接近乳与乳制品样品环境,有助于乳源微生物恢复生长 |
| 琼脂 | 15.0 g/L | 凝固剂 | 形成固体平板,便于菌落计数和观察 |
| 最终pH | 7.0±0.2,25℃ | 维持接近中性的培养环境 | 适合多数乳品相关需氧菌生长 |
| 干粉称量 | 24.5 g/L | 商品化配制量 | 按标签称取本品24.5 g配制1 L培养基 |
培养基原理
乳平板计数琼脂的设计重点是提供稳定、温和、适合乳品相关微生物恢复生长的营养环境。胰蛋白胨和酵母浸膏提供氮源、氨基酸、维生素和生长因子,葡萄糖为微生物提供可利用能源,脱脂奶粉补充乳源蛋白和乳糖等成分,使培养基更适合乳及乳制品样品中的微生物生长。
在嗜冷菌菌落总数测定中,培养基提供营养支持,低温培养条件用于筛选能够在低温下生长的微生物。嗜冷菌或耐冷菌的存在,常与原料乳储存、冷链控制、设备清洗和生产环境卫生有关。若嗜冷菌数量偏高,可能导致乳品冷藏期间出现蛋白质分解、脂肪分解、异味或货架期缩短。
在需氧芽孢总数测定中,关键通常在于样品前处理。样品经适当热处理后,营养细胞被杀灭或显著减少,而芽孢可存活并在培养基上萌发形成菌落。因此,MPC用于提供芽孢萌发和营养细胞生长所需的基础条件,真正区分需氧芽孢菌的步骤主要依赖前处理和培养条件。
使用方法
称取本品24.5 g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,于121℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却至适宜温度,按检测方法要求用于倾注平板或制备平板。
配制时应充分加热,使琼脂完全溶解,并保证脱脂奶粉成分分散均匀。由于培养基含乳源成分,灭菌后可能略带乳白色或轻微浑浊感,一般属于正常现象。若出现明显絮状沉淀、焦化颜色、污染、凝固不良或pH明显偏离,应停止使用。
质量控制
按标签方法制备培养基后,接种质控菌株,于35~37℃培养24 h,观察菌落生长情况。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生长率 | 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | PR≥0.7,形成淡黄色菌落 |
| 生长率 | 金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 | PR≥0.7,形成黄色菌落 |
| 生长率 | 枯草芽孢杆菌 ATCC 6633 | PR≥0.7,形成淡黄色菌落 |
PR≥0.7表示培养基应能较好支持质控菌株生长。大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌用于评价培养基对常见需氧菌的营养支持能力;枯草芽孢杆菌用于评价培养基对芽孢杆菌类菌株的生长支持能力。需要注意的是,质控培养条件用于验证培养基性能,不等同于嗜冷菌或需氧芽孢实际检测时的全部培养条件。
若质控菌株生长率偏低,应重点检查培养基称量、灭菌条件、pH、平板厚度、平板含水量、培养温度、培养时间和菌株活性。若平板菌落扩散、边缘模糊或不易计数,应关注平板表面水分、倾注温度和培养箱湿度。
结果观察与判读要点
用于乳与乳制品检测时,MPC平板培养后应选择菌落分布均匀、数量适宜的平板进行计数,并按标准方法换算为样品中的菌落数。若用于嗜冷菌测定,应按方法要求采用相应低温培养条件;若用于需氧芽孢总数测定,应确认样品是否经过规定热处理步骤;若用于嗜热需氧芽孢数测定,则还需配合相应高温培养条件。
由于该培养基为非选择性培养基,平板上形成的菌落并不代表单一菌群。不同检测项目的结果解释,应结合样品处理方式、培养温度、培养时间和标准规定进行。对于乳品生产企业而言,嗜冷菌数偏高常提示冷链或清洗消毒控制不足;需氧芽孢数偏高则可能提示原料污染、土壤来源污染、热处理前微生物负荷偏高或设备卫生控制不足。
操作与储存注意事项
本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护,建议佩戴口罩,避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年;开封后受环境湿度、密封状态和取用频次影响,保质时间可能缩短,应根据实际保存状态评估。
制备后的平板应避免长时间暴露,以免污染、干裂或水分蒸发影响菌落计数。检测结束后的带菌平板、吸头、稀释液、接种工具及其他污染物,应按实验室生物安全要求处理,建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。




