溶菌酶营养肉汤：蜡样芽孢杆菌溶菌酶试验用培养基
- 2026-06-22 18:10:12
- 逗点生物
溶菌酶营养肉汤：蜡样芽孢杆菌溶菌酶试验用培养基
产品信息与用途
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 溶菌酶营养肉汤 |
| 更准确表述 | 溶菌酶营养肉汤基础，使用时需另加溶菌酶配套试剂 |
| 英文名称 | Lysozyme Nutrient Broth |
| 货号 | GF1115 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 保质期 | 未开封三年 |
| 产品用途 | 用于蜡样芽孢杆菌溶菌酶试验 |
| 参考标准 | GB 4789.14-2014《食品安全国家标准 食品微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验》 |
| 培养条件 | 36±1℃需氧培养24～48 h |
| 阳性结果 | 肉汤浑浊，表示菌株可在含溶菌酶条件下生长 |
| 阴性结果 | 肉汤澄清或生长受抑，表示菌株对溶菌酶敏感 |
配方组成及作用
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 牛肉粉 | 3.0 g/L | 提供氮源、矿物质、维生素和生长因子 | 支持细菌基础生长，提高培养稳定性 |
| 蛋白胨 | 5.0 g/L | 提供氨基酸、多肽和有机氮源 | 促进蜡样芽孢杆菌等细菌恢复和增殖 |
| 溶菌酶配套试剂TJ020 | 每100 mL基础培养基添加1支，另加 | 鉴别性抑菌成分 | 用于观察菌株对溶菌酶的耐受性；阳性菌可生长浑浊，敏感菌受抑制 |
| 最终pH | 6.8±0.1，25℃ | 维持适宜微酸至近中性环境 | 保证菌体生长和溶菌酶试验条件稳定 |
| 干粉称量 | 8.0 g/L | 商品化配制量 | 按标签称取本品8.0 g配制1 L基础培养基 |
检验原理
溶菌酶是一种能作用于细菌细胞壁肽聚糖的酶类物质，可破坏部分细菌细胞壁结构，使敏感菌生长受抑或细胞裂解。不同细菌对溶菌酶的耐受性不同，这种差异可用于生化鉴别。
蜡样芽孢杆菌通常能够在含溶菌酶的营养肉汤中生长，培养后肉汤变浑浊，判为溶菌酶试验阳性。枯草芽孢杆菌等溶菌酶敏感菌则受到抑制，培养后肉汤保持澄清或浑浊度明显低于阳性菌株。该试验可作为蜡样芽孢杆菌鉴别中的辅助项目，但不能单独作为最终确证依据，应结合MYP平板菌落特征、卵黄反应、动力试验、溶血试验、酪蛋白分解试验及其他确认结果综合判断。
使用方法
称取本品8.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热至完全溶解，分装后于121℃高压灭菌15 min。灭菌结束后冷却至约50℃，每100 mL基础培养基加入1支配套试剂TJ020，混匀后备用。
添加TJ020时应进行无菌操作，并注意培养基温度。温度过高可能导致溶菌酶活性下降；温度过低则可能影响混匀或造成分装不便。加入配套试剂后应充分混匀，避免溶菌酶分布不均造成同批试验结果波动。配制后的培养基如出现污染、异常沉淀、明显颜色变化或pH偏离，不宜继续使用。
质量控制
按标签方法制备培养基并加入配套试剂后，接种质控菌株，于36±1℃需氧培养24～48 h，观察肉汤浑浊情况。
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 质控评定标准 |
|---|---|---|
| 生化特性 | 蜡样芽孢杆菌 ATCC 11778 | 阳性，肉汤浑浊 |
| 生化特性 | 蜡样芽孢杆菌 CMCC(B) 63303 | 阳性，肉汤浑浊 |
| 生化特性 | 枯草芽孢杆菌 CMCC(B) 63501 | 阴性，生长受抑制 |
蜡样芽孢杆菌质控株应生长良好并使肉汤浑浊，说明培养基营养支持能力和溶菌酶耐受性判读体系正常。枯草芽孢杆菌应被抑制，用于评价溶菌酶试剂的有效性。若蜡样芽孢杆菌不生长，应检查培养基营养成分、pH、培养温度、培养时间、菌株活性及接种量。若枯草芽孢杆菌明显浑浊生长，则需重点检查TJ020是否漏加、添加量是否不足、加入温度是否过高、试剂是否失效或培养基是否污染。
结果观察与判读要点
溶菌酶试验以肉汤浑浊度作为主要观察指标。培养后肉汤明显浑浊，说明菌株能够在含溶菌酶条件下生长，判为阳性；肉汤澄清或仅极弱浑浊，说明菌株生长受抑，判为阴性或敏感。判读时应设置未接种空白对照和已知阳性、阴性质控菌株，以排除培养基本底浑浊、污染或试剂失效对结果的影响。
若待检菌结果介于阳性和阴性之间，应结合接种量、培养时间和菌株活力进行复试。接种量过大可能削弱溶菌酶抑制效果，造成假阳性；培养时间不足可能导致阳性菌浑浊不明显，造成假阴性。因此，应严格按标准或实验室受控方法控制接种量、培养时间和培养温度。
操作与储存注意事项
本品不得用于临床检验。干粉培养基称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩，避免吸入粉尘引起呼吸道不适。干粉使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受环境湿度、密封状态和取用频次影响，保质时间可能缩短，应根据实际保存状态评估。
溶菌酶配套试剂应按说明书要求保存和使用，避免高温、反复冻融或长时间暴露。检测结束后的带菌培养液、试管、吸头和其他污染物，应按实验室生物安全要求处理，建议经121℃高压灭菌30 min后再废弃。
