葡萄糖胰蛋白胨琼脂（DTA培养基）：用于乳与乳制品中嗜热需氧芽孢数测定的常用培养基

一、产品用途与基本信息

二、配方组成及作用

三、检验原理

DTA培养基的核心思路是“基础营养支持生长 + 高温条件筛选目标菌 + 指示剂辅助观察”。胰蛋白胨为细菌提供氮源和生长所需的小分子营养，葡萄糖作为可发酵糖被部分嗜热芽孢菌利用后产生酸性代谢产物，使溴甲酚紫由紫色向黄色转变，因此目标菌常表现为黄色菌落或菌落周围发黄。

需要注意的是，DTA培养基本身并不含胆盐、抗生素、染料类强抑制剂等典型选择性成分，因此它不是强选择性培养基。其对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等非目标菌的抑制，主要依赖 55 ℃培养条件以及目标菌耐热、嗜热生长特性的差异。也就是说，DTA培养基的“选择性”更多来自检测方法中的热处理和高温培养条件，而不是培养基中加入了选择性抑菌剂。

四、使用方法

称取本品 30.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，按实验需要分装后，于 121 ℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至适宜温度，按标准方法制备平板或进行后续检测操作。

制备过程中应确保干粉充分溶解，避免琼脂未完全融化导致平板凝固不均或局部成分分布异常。灭菌时间不宜随意延长，以免葡萄糖受热分解、培养基颜色加深或营养成分受损。倒平板时应在无菌条件下操作，并避免冷凝水过多影响菌落扩散和计数准确性。

五、质量控制

六、结果观察与应用提示

在符合检测条件的情况下，嗜热脂肪芽孢杆菌等目标菌可在DTA平板上形成较明显菌落，并因分解葡萄糖产酸而呈黄色。若目标菌生长率偏低，应重点排查培养基灭菌是否过度、pH是否偏离、干粉是否吸潮、培养温度是否准确，以及接种菌液状态是否正常。若非目标菌抑制不足，则应检查培养温度、热处理步骤和培养时间是否符合方法要求。

对于乳与乳制品样品，嗜热需氧芽孢数检测不仅依赖培养基本身，还与样品前处理、热处理条件、稀释液、培养温度和计数规则密切相关。实际检测时应严格按照 NY/T 1331 或实验室确认的方法执行，避免仅凭培养基配方判断结果是否合格。

七、贮存与注意事项

本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。干粉培养基使用后应立即旋紧瓶盖，置于避光、干燥处保存，防止吸潮、结块和指示剂变色。称量时应避免粉尘吸入，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短，若出现明显结块、变色或性能异常，应经质量验证合格后再使用。

参考标准

NY/T 1331-2007《乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定》。