改良CCDA基础：用于弯曲菌选择性分离培养的血液替代型培养基

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、配套选择性添加剂及作用

改良CCDA基础本身提供营养、凝固和部分选择性作用，但实际用于弯曲菌分离时，还需要加入配套选择性试剂。按产品说明，每100 mL基础培养基加入1支配套试剂TJ025，混匀后倒平板。配套试剂中的抗菌成分用于进一步抑制食品样品中的伴随菌，减少杂菌覆盖，提高弯曲菌分离效率。

四、检验原理

改良CCDA的核心是“营养支持 + 氧化保护 + 选择性抑菌”。蛋白胨、牛肉浸出粉和酸水解酪蛋白为弯曲菌提供生长所需的氨基酸、肽类和营养因子，使目标菌能够在微需氧条件下形成可观察菌落。弯曲菌对氧较敏感，培养过程中容易受到过氧化物等氧化性物质影响，因此培养基中加入活性炭、丙酮酸钠和硫酸亚铁，用于吸附或中和部分抑制性物质，改善目标菌复苏环境。

选择性方面，去氧胆酸钠可抑制部分非目标菌，配套试剂中的头孢哌酮、两性霉素B和利福平进一步限制肠道杂菌、真菌及其他竞争性微生物的生长。需要注意的是，改良CCDA不是确认培养基，平板上出现疑似弯曲菌典型菌落后，还需结合显微镜形态、氧需求特征、生化反应、质谱或分子方法等进行确认。

五、使用方法

称取本品45.5 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热至完全溶解后分装三角瓶，121 ℃高压灭菌15 min。灭菌结束后冷却至约50 ℃，每100 mL基础培养基加入1支配套试剂TJ025，充分摇匀后倾注无菌平板，凝固后备用。

配制时应注意，选择性添加剂不宜与基础培养基一同高压灭菌，以免抗菌活性下降。由于培养基含有活性炭，外观呈深色或黑色属于正常现象，倒平板前应充分混匀，避免活性炭沉降造成平板成分分布不均。平板制备后应避免过度干燥，也不宜有明显冷凝水，以免影响菌落扩散特征和分离效果。

六、质量控制

七、结果观察与常见问题

空肠弯曲菌在改良CCDA平板上通常形成灰白色至灰色、湿润、有光泽、较扁平的菌落，部分菌落可呈轻度扩散生长趋势。由于培养基含活性炭，平板背景较深，观察时应注意光线角度和菌落边缘形态。若平板杂菌较多，应检查样品前处理、增菌条件、选择性添加剂是否正确加入，以及平板是否放置过久导致选择性下降。若目标菌生长弱或不生长，应重点排查微需氧环境、培养温度、添加剂浓度、培养基pH和菌株活性。

改良CCDA用于分离而非最终确认。食品样品中可能存在少量形态相似或耐受选择剂的非目标菌，因此疑似菌落应继续进行确认试验。实际检测时还应结合增菌培养基、选择性平板、培养气氛和后续鉴定方法综合判断。

八、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。配制后的含选择性添加剂平板应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。

参考标准与资料

GB 4789.9《食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验》。

FDA Bacteriological Analytical Manual（BAM）：Campylobacter 相关培养基资料。