布氏肉汤(Brucella Broth):弯曲菌增菌与布氏琼脂制备中的基础营养培养基

2026-06-23 14:55:44
逗点生物
简介

布氏肉汤(Brucella Broth):弯曲菌增菌与布氏琼脂制备中的基础营养培养基

一、产品用途与基本信息

项目 内容
产品名称 布氏肉汤(Brucella Broth)
产品货号 GF1120
产品规格 250 g/瓶
产品类型 基础型液体培养基
主要用途 用于弯曲菌增菌肉汤和布氏琼脂的制备
参考用途 食品微生物检验中弯曲菌相关培养体系
使用量 28.1 g/L
灭菌条件 121 ℃高压灭菌15 min
最终pH 7.0±0.2(25 ℃)
保质期 未开封三年

二、配方组成、用量及作用

成分 用量(g/L) 主要作用 用途说明
蛋白胨 10.0 提供氮源、氨基酸、短肽和部分碳源 支持细菌基础生长,改善目标菌复苏状态
胰酪蛋白胨 10.0 提供优质氮源、肽类和易利用营养物质 满足弯曲菌等营养要求较高细菌的生长需求
酵母浸粉 2.0 提供B族维生素、核苷酸和生长因子 促进受损细胞恢复和增殖
氯化钠 5.0 维持培养基渗透压稳定 保持细胞正常生理状态
葡萄糖 1.0 提供可利用碳源和能量来源 为菌体代谢和早期增殖提供能量
亚硫酸氢钠 0.1 还原剂,降低氧化压力 改善对微需氧菌较友好的培养环境
最终pH 7.0±0.2 控制酸碱环境 保证培养基性能稳定,适合多数目标菌复苏生长

三、培养基原理

布氏肉汤的核心作用是为营养要求较高的微生物提供温和、稳定且较丰富的基础生长环境。蛋白胨和胰酪蛋白胨提供氨基酸、短肽和氮源,是菌体蛋白合成和代谢活动的重要基础;酵母浸粉补充维生素、核苷酸及其他生长促进因子,可改善目标菌复苏效果;葡萄糖作为易利用碳源,为菌体早期生长提供能量;氯化钠维持渗透压,使细胞处于较稳定的生理状态。

亚硫酸氢钠是该培养基中的还原性成分,可降低培养体系中的氧化压力。对于空肠弯曲菌等微需氧菌而言,过高的氧化应激不利于复苏和增殖,因此适当的还原性环境有助于提高培养效果。但需要注意,布氏肉汤本身并不提供强选择性。如果样品中背景菌较多,仅使用基础肉汤可能导致杂菌同步生长;因此在弯曲菌检测中,通常需结合选择性添加剂、血液成分和微需氧培养条件使用。

四、使用方法

称取本品28.1 g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,按实验需要分装后,于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却备用,具体是否加入血液、抗生素或其他添加剂,应根据所采用的检测标准、实验方案或配套试剂说明执行。

如果用于制备弯曲菌增菌肉汤,应注意培养条件通常需要微需氧环境,并根据方法要求加入相应选择性成分。若用于制备布氏琼脂,应明确本品为肉汤基础,配方中不含琼脂;实际制备固体培养基时,需按相应方法补加琼脂或使用配套琼脂基础,不能直接将本品作为固体培养基使用。

五、质量控制

质控指标 质控菌株及编号 培养条件 质控评定标准 结果说明
生长率 空肠弯曲菌 ATCC 33291 42±1 ℃,培养48±2 h 混浊度1~2 说明培养基可支持空肠弯曲菌生长
外观检查 灭菌后培养基 室温观察 应为均一液体,无明显异常沉淀或污染 评价配制和灭菌状态
pH检查 灭菌冷却后培养基 25 ℃ 7.0±0.2 保证培养基酸碱度符合要求

六、结果观察与应用提示

布氏肉汤为液体培养基,培养后可通过肉汤混浊度初步观察菌体增殖情况。但对于弯曲菌检测而言,肉汤变浑浊不能直接判定为目标菌阳性,因为样品中其他伴随菌也可能生长。实际检测中,应按标准方法将增菌液转种至选择性平板,如改良CCDA等,再观察典型菌落并进行后续确认试验。

如果空肠弯曲菌质控生长不佳,应重点检查培养温度、微需氧条件、培养时间、培养基pH、干粉保存状态和菌种活性。若用于含添加剂体系,还需确认血液、抗生素或其他添加剂是否按要求加入,是否存在失效、浓度过高或加入温度不当等问题。弯曲菌对氧环境较敏感,培养气氛控制往往比普通细菌培养更关键。

七、与弯曲菌培养体系的关系

在弯曲菌检测流程中,布氏肉汤常作为基础营养平台使用。其优势在于营养组成较全面,并含有一定还原性成分,有利于目标菌复苏;不足之处是选择性较弱,需要依靠外加选择性试剂和微需氧环境来控制杂菌。与Bolton肉汤等专门用于弯曲菌选择性增菌的培养基相比,布氏肉汤更偏向基础培养基角色,适合根据不同标准方法进行改良或配制衍生培养基。

因此,在产品使用和结果解释中应区分“基础培养基”和“选择性培养基”的概念。布氏肉汤提供生长所需的营养和较温和的还原环境,但真正的选择性通常来自添加剂、培养温度、培养气氛以及后续分离平板。

八、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护,建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年;开封后受储存湿度、温度和使用频次影响,保质时间可能缩短。

配制后培养基应按实验室验证条件保存,并避免反复加热。若灭菌后颜色、pH、澄清度或质控结果异常,应查找原料吸潮、灭菌过度、水质不合格、分装容器污染等原因,经质量验证合格后方可使用。

参考标准与资料

GB 4789.9《食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌和结肠弯曲菌检验》。

相关SN食品微生物检验方法中弯曲菌增菌肉汤和布氏琼脂制备要求。