CIN-1培养基基础：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离培养的选择性培养基

一、产品用途与基本信息

二、基础配方组成、用量及作用

三、配套试剂及加入要求

CIN-1培养基基础需配合配套试剂使用。原始说明中提到 TJ063、TJ035、TJ036 和 TJ037 分阶段加入，说明这些组分可能存在耐热性、溶解性或稳定性差异，因此不宜随意改变加入温度和顺序。实际操作时应严格按照产品说明执行，避免因添加剂失活、溶解不充分或分布不均影响选择性和菌落特征。

注：配套试剂具体成分应以产品说明书或试剂标签为准。若需替换或自配添加剂，应经过方法学验证，不建议在常规检测中随意更改。

四、检验原理

CIN-1培养基的核心是“营养支持 + 甘露醇显色 + 选择性抑菌”。胰胨和酵母浸膏为目标菌提供氨基酸、短肽、维生素和生长因子，使小肠结肠炎耶尔森氏菌能够在平板上形成可观察菌落。甘露醇作为可发酵糖被目标菌利用后产生酸性代谢产物，使菌落中心及周围局部区域在中性红指示下呈红色，从而形成典型的红色“牛眼状”菌落。

去氧胆酸钠和结晶紫是培养基中的主要选择性成分，可抑制部分革兰氏阳性菌和胆盐敏感菌群。配套试剂进一步增强选择性，限制大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌等非目标菌的生长。需要注意的是，CIN-1平板上的典型菌落只能作为疑似小肠结肠炎耶尔森氏菌的筛选依据，不能作为最终确认结果。后续仍需结合纯化培养、生化鉴定、血清学或分子检测等方法确认。

五、使用方法

称取本品57.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌后待基础培养基冷却至80 ℃时，每100 mL加入1支配套试剂TJ063并混匀；继续冷却至50 ℃时，每100 mL加入配套试剂TJ035和TJ036各1支，充分混匀；最后在不断搅拌条件下加入1支配套试剂TJ037，混匀后倾注无菌平皿。

配制过程中应确保基础培养基完全溶解，尤其是琼脂和胆盐成分应充分分散。添加配套试剂时要控制温度，温度过高可能导致部分热敏成分失活，温度过低则培养基容易提前凝固，造成添加剂分布不均。倒平板前应持续轻柔混匀，避免产生大量气泡。制备好的平板应表面平整、厚度适中、无明显冷凝水和污染。

六、质量控制

七、结果观察与应用提示

小肠结肠炎耶尔森氏菌在CIN-1培养基上通常形成红色牛眼状菌落，即中心较红，边缘较浅或半透明，菌落较小、圆形，具有一定特征性。但食品样品中可能存在少数形态相似菌落，因此不能仅凭“牛眼状”外观直接判定为阳性。实际检测时，应挑取典型或可疑菌落进行纯化，并按标准方法进行后续确认。

若目标菌菌落不典型或生长率偏低，应重点检查培养温度、培养时间、培养基pH、添加剂加入温度、添加剂有效性、平板干燥程度和菌株活性。若杂菌生长过多，可能与配套试剂失效、加入量不足、平板放置过久、样品背景菌量过高或划线过密有关。CIN-1平板用于分离培养时，建议划线分离要稀疏，避免杂菌覆盖目标菌落，影响疑似菌筛选。

八、与PSB增菌液的配合使用

在小肠结肠炎耶尔森氏菌检测流程中，CIN-1培养基通常与改良磷酸盐缓冲液等增菌培养基配合使用。增菌阶段的作用是提高目标菌相对数量，CIN-1平板的作用则是通过选择性抑菌和甘露醇显色反应分离疑似菌落。对于复杂食品样品，单一培养基往往难以完成完整检测，需要增菌、分离、纯化和确认多个步骤共同配合。

CIN-1培养基的优势在于菌落特征较直观，红色牛眼状菌落便于初筛；不足之处是部分非目标菌也可能出现相似外观，因此后续确认步骤不可省略。

九、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的含添加剂平板应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。若平板出现明显变色、干裂、析水、污染或质控结果异常，应停止使用并排查原因。检测后的带菌培养物、平板和接触样品的耗材，应经高压灭菌后再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB 4789.8-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验》。

相关食品微生物检验方法中小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌、分离和确认要求。