改良Y培养基：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离培养的选择性鉴别培养基

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、检验原理

改良Y培养基的核心是“营养支持 + 胆盐选择 + 乳糖鉴别 + 复苏促进”。蛋白胨和水解酪蛋白为细菌提供氨基酸、短肽和氮源，使小肠结肠炎耶尔森氏菌能够在平板上形成可观察菌落。氯化钠维持渗透压，保证细胞处于相对稳定的生理环境。

乳糖用于区分乳糖发酵菌和非乳糖发酵或弱发酵菌。大肠埃希氏菌等乳糖发酵菌可形成粉红色菌落，而小肠结肠炎耶尔森氏菌在该培养基上通常表现为无色透明、不黏稠菌落。孟加拉红作为染料和辅助鉴别成分，可帮助观察菌落颜色差异，同时对部分杂菌具有一定限制作用。

去氧胆酸钠和三号胆盐是该培养基的重要选择性成分，可抑制部分革兰氏阳性菌和胆盐敏感菌群。丙酮酸钠可减轻氧化损伤、促进受损细胞恢复，因此对样品中状态较弱的目标菌有一定保护和促生长作用。需要注意的是，改良Y培养基用于分离和初筛，不能作为最终确认培养基；疑似菌落仍需进一步纯化和鉴定。

四、使用方法

称取本品67.0 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，按实验需要分装后，于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌后冷却至适宜温度，倾注无菌平皿，凝固后备用。

配制时应确保琼脂、胆盐和染料类成分充分溶解并分散均匀。由于培养基中胆盐含量较高，若溶解不充分，可能导致局部选择性过强或平板外观不均。灭菌时间不宜随意延长，以免乳糖、丙酮酸钠或染料成分受热影响，造成颜色异常、pH偏移或目标菌生长下降。平板制备后应避免过度干燥，也不宜有明显冷凝水，以免影响菌落形态观察。

五、质量控制

注：原资料中的“金黄色葡萄糖球菌”应修正为“金黄色葡萄球菌”。

六、结果观察与应用提示

小肠结肠炎耶尔森氏菌在改良Y培养基上通常形成无色透明、不黏稠菌落。大肠埃希氏菌等乳糖发酵菌可形成粉红色菌落，因此可与目标菌形成一定区分。需要注意的是，食品样品背景复杂，部分非目标菌也可能形成无色或浅色菌落，因此不能仅凭菌落颜色直接判定阳性。

若目标菌生长率偏低，应重点检查培养温度、培养时间、培养基pH、胆盐浓度、丙酮酸钠稳定性、平板干燥程度和菌株活性。小肠结肠炎耶尔森氏菌常用较低温度培养，温度偏高可能影响典型菌落形成。若杂菌生长过多，应检查样品增菌步骤、平板保存时间、胆盐和去氧胆酸钠是否有效，以及划线分离是否过密。

七、与PSB和CIN-1培养基的配合使用

在小肠结肠炎耶尔森氏菌检测流程中，改良磷酸盐缓冲液常用于增菌，CIN-1培养基和改良Y培养基则用于后续分离培养。PSB的作用是提高目标菌相对数量，CIN-1通过甘露醇发酵和选择性抑菌形成红色牛眼状疑似菌落，改良Y培养基则通过乳糖发酵差异和菌落颜色表现辅助筛选。

改良Y培养基的优势是目标菌菌落相对清晰，便于与乳糖发酵菌进行初步区分；不足之处是选择性和鉴别性并非绝对，仍需要后续确认试验。实际检测中，应结合增菌液、分离平板、菌落形态、纯化结果和确认试验综合判断。

八、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的平板应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。若平板出现明显变色、干裂、析水、污染或质控结果异常，应停止使用并排查原因。检测后的带菌培养物、平板和接触样品的耗材，应经高压灭菌后再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB 4789.8-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验》。

相关食品微生物检验方法中小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌、分离和确认要求。