纤维二糖-多黏菌素E（CC）琼脂培养基：用于创伤弧菌选择性分离培养的专用培养基

一、产品用途与基本信息

二、基础配方组成、用量及作用

三、配套试剂及选择性作用

原配方表中未列出纤维二糖和多黏菌素E，但产品名称和检验原理均表明其为培养基关键功能成分，通常由配套试剂TJ021提供。按产品说明，每90 mL基础培养基加入2支配套试剂TJ021，混匀后倾注平皿。配套试剂不宜随意替换或改变加入量，否则会影响菌落显色和选择性。

注：多黏菌素E即黏菌素，英文常写作Colistin；“Polymyxin E Colistin”属于同义重复，技术资料中可统一写作“多黏菌素E（Colistin）”。

四、检验原理

CC琼脂培养基的核心是“高盐营养环境 + 纤维二糖发酵鉴别 + 多黏菌素选择性抑制”。蛋白胨和牛肉粉为创伤弧菌提供氮源、氨基酸、肽类、矿物质和生长因子，氯化钠提供较高盐度，符合创伤弧菌等嗜盐性弧菌的生长需求，并对部分非嗜盐性杂菌形成限制。

纤维二糖是该培养基的重要鉴别底物。创伤弧菌通常可发酵纤维二糖产酸，使局部pH下降，溴麝香草酚蓝和甲酚红共同指示酸化反应，目标菌表现为黄色菌落。霍乱弧菌等非目标菌可能不呈现相同的纤维二糖发酵表现，可形成紫色或非黄色菌落。多黏菌素E作为选择性抑菌剂，可抑制副溶血弧菌、溶藻弧菌等部分非目标菌，降低背景菌干扰。

需要注意的是，CC琼脂培养基属于选择性分离和初步鉴别培养基，不能单独作为创伤弧菌最终确认依据。典型黄色菌落仍需结合氧化酶试验、盐耐受性、生化鉴定、质谱或分子检测等方法进行确认。

五、使用方法

称取本品50.1 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解。待培养基冷却至48～55 ℃时，每90 mL基础培养基加入2支配套试剂TJ021，充分混匀后倾注无菌平皿，凝固后备用。

配制时应保证基础培养基完全溶解，尤其是琼脂和指示剂应分散均匀。添加配套试剂时温度不宜过高，以免影响糖类和抗菌成分稳定性；温度过低则培养基容易提前凝固，造成添加剂分布不均。产品说明采用煮沸溶解后加入配套试剂的方式，实际操作中应保证容器、操作环境和倒平板过程无菌；如实验室拟对基础培养基进行高压灭菌，应通过外观、pH和质控结果进行验证后再用于常规检测。

六、质量控制

七、结果观察与应用提示

创伤弧菌在CC琼脂培养基上通常形成黄色、圆形、扁平的菌落，菌落中间不透明，边缘较透明。黄色反应主要与纤维二糖发酵产酸有关。霍乱弧菌可表现为紫色菌落，提示其在该培养基上的糖代谢和pH变化与创伤弧菌不同。副溶血弧菌在该培养基上应受到明显抑制，用于体现培养基的选择性。

若目标菌生长率偏低，应重点检查培养基pH、氯化钠浓度、配套试剂加入温度和加入量、平板干燥程度、培养温度、菌株活性及培养时间。若副溶血弧菌等非目标菌抑制不足，可能与配套试剂失效、加入量不足、培养基放置过久或配制温度不当有关。若菌落颜色不典型，应检查指示剂颜色、培养基pH、纤维二糖有效性和培养时间，避免过早或过迟观察导致误判。

八、与创伤弧菌检测流程的关系

在创伤弧菌检测中，CC琼脂培养基主要用于选择性分离和疑似菌落筛选。水产品样品背景菌较复杂，单一平板结果不能直接作为最终结论。实际检验中通常需要结合增菌培养、选择性平板分离、典型菌落挑取、纯化培养和后续确认试验，才能完成完整判断。

CC琼脂的优势是创伤弧菌黄色菌落较直观，便于从复杂菌群中筛选疑似目标菌；不足之处是选择性和特异性并非绝对，部分非目标菌可能生长或产生类似颜色，因此后续确认不可省略。

九、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的含添加剂平板应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。若平板出现明显变色、干裂、析水、污染或质控结果异常，应停止使用并排查原因。检测后的带菌培养物、平板和接触样品的耗材，应经高压灭菌后再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB 4789.44-2020《食品安全国家标准 食品微生物学检验 创伤弧菌检验》。

GB 4789.28-2024《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》。