采样吸收液1-GVPC液体培养基：用于空调系统军团菌采样的保护性吸收液

一、产品用途与基本信息

二、基础配方组成、用量及作用

注：原资料未列出最终pH。由于军团菌对pH较敏感，实际配制后应按产品说明书或实验室内控要求检测pH；若加入添加剂后pH偏离，应按方法要求调整并经质控合格后使用。

三、GVPC配套试剂的作用

GVPC是Glycine-Vancomycin-Polymyxin-Cycloheximide的缩写，即甘氨酸、万古霉素、多黏菌素和放线菌酮选择体系。采样吸收液加入GVPC配套试剂后，可在一定程度上控制样品中伴随菌和真菌的干扰。与此同时，配套体系中通常还会补充军团菌所需的特殊生长因子，例如L-半胱氨酸和铁源，具体组成应以产品配套试剂说明为准。

注：采样吸收液中选择性成分的目的不是替代后续平板分离，而是在采样和短时保存阶段降低伴随菌干扰。疑似军团菌仍需转种至BCYE、GVPC等培养基进行分离和确认。

四、检验原理

采样吸收液1-GVPC液体培养基的核心是“采样吸收 + 活性维持 + 缓冲保护 + 选择性抑制”。酵母浸粉为军团菌提供基础有机营养，α-酮戊二酸有助于维持细胞代谢和恢复能力，ACES与氢氧化钾共同构成缓冲体系，使吸收液在采样过程中保持相对稳定的酸碱环境。

活性炭是军团菌培养体系中的重要保护成分。它不应简单理解为“分解过氧化氢”，更准确的表述是：活性炭可吸附或降低过氧化物、脂肪酸、代谢副产物等抑制性物质对军团菌的影响，从而改善目标菌存活和后续分离培养条件。由于活性炭不溶，培养液外观可呈黑色或深色，属于正常现象。

GVPC配套试剂中的抗菌成分可抑制部分非目标细菌和真菌，有助于降低空调系统样品中复杂背景微生物的干扰。需要注意的是，该产品作为采样吸收液，评价重点是军团菌在短时间内的存活稳定性，而不是长时间增菌后的浑浊度或菌落数量增加。

五、使用方法

称取本品25.88 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热至完全溶解或充分分散，按实验需要分装后，于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌结束后冷却至约50 ℃，每100 mL基础培养基加入1支GVPC配套试剂，充分混匀后备用。

由于培养基含有不溶性活性炭，配制和分装前应充分摇匀或搅拌，使活性炭均匀分布。加入配套试剂时温度不宜过高，以免影响抗菌成分和半胱氨酸类成分稳定性；温度过低则可能影响混匀效果。配制后的吸收液应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。

六、质量控制

注：这里的“生长率”更准确可理解为短时存活稳定性。采样吸收液的质控逻辑与普通增菌培养基不同，重点是目标菌在规定时间内数量不发生过大波动。

七、结果观察与应用提示

采样吸收液1-GVPC液体培养基用于采样环节，不能直接通过液体是否浑浊判断军团菌阳性或阴性。采样完成后，应按相关检测方法将样品或吸收液进行后续处理，并接种至BCYE、GVPC等军团菌培养基，经过36±1 ℃培养3～10 d后观察疑似菌落，再进行确认试验。

若质控结果显示45 min前后菌落数下降超过允许范围，应重点检查配套试剂是否加入、加入温度是否过高、pH是否合适、活性炭是否分散均匀、灭菌是否过度、吸收液保存时间是否过长以及菌株状态是否正常。若吸收液中杂菌控制不佳，可能与GVPC配套试剂失效、加入量不足、操作污染或样品背景菌量过高有关。

八、与BCYE和GVPC琼脂的关系

采样吸收液1-GVPC液体培养基、BCYE琼脂和GVPC琼脂在军团菌检测流程中的作用不同。采样吸收液用于采样阶段，重点是吸收和短时保护；BCYE琼脂用于军团菌基础培养、纯化和半胱氨酸依赖性鉴别；GVPC琼脂则用于复杂样品中军团菌的选择性分离。

因此，采样吸收液不能替代BCYE或GVPC平板。完整检测应包括采样、样品处理、选择性分离、疑似菌落挑取、纯化和确认等步骤。

九、常见问题与原因分析

如果吸收液放置后出现明显沉降，通常与活性炭不溶有关，使用前充分混匀即可；若出现异常絮状物、异味、污染或pH异常，应停止使用。若加入配套试剂后颜色或状态变化明显，应核查添加剂保存条件、加入温度和有效期。若后续平板杂菌过多，应检查采样操作、吸收液无菌性、GVPC配套试剂活性和样品处理步骤。

军团菌对培养条件较敏感，采样后应尽量减少长时间暴露、高温、强光和剧烈震荡等不利因素。采样吸收液的目标是保持目标菌状态稳定，为后续分离培养创造条件，而不是让目标菌在采样瓶中长期增殖。

十、贮存、废物处理与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的含添加剂吸收液应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。若出现污染、pH异常、沉淀异常、添加剂漏加或质控结果不符合要求，应停止使用并排查原因。检测后的带菌吸收液、培养物和平板等，应置于121 ℃高压灭菌30 min后，再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB/T 18204.5-2025《公共场所卫生检验方法 第5部分：集中空调通风系统》。

WS 394-2012《公共场所集中空调通风系统卫生规范》（历史参考文件，已废止）。

相关公共场所集中空调通风系统和军团菌检测方法中采样、吸收液和分离培养要求。