SIM动力培养基：一支试管同时观察硫化氢、吲哚和动力反应

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、检验原理

SIM动力培养基的核心是“一管三用”。首先，硫代硫酸钠可作为含硫底物，部分细菌具有还原能力，可将其还原生成硫化氢。硫化氢本身为无色气体，不易直接观察，因此培养基中加入硫酸铁铵作为指示剂。硫化氢与铁离子反应生成黑色硫化铁沉淀，培养基沿接种线或底部出现黑色即提示H₂S阳性。

其次，SIM培养基中含有丰富胰蛋白胨，能够提供色氨酸。部分细菌产生色氨酸酶，可分解色氨酸生成吲哚。培养结束后，在培养基表面滴加Kovacs氏靛基质试剂，若表层出现红色或玫瑰红色环，即为吲哚阳性；若不出现红色环，则为阴性。

第三，培养基中琼脂含量较低，使其呈半固体状态。用接种针沿中央垂直穿刺接种后，具有运动性的细菌可从穿刺线向四周扩散，使培养基呈弥散性浑浊；无动力菌通常只沿穿刺线生长，周围培养基相对澄清。动力试验要求穿刺线尽量笔直，否则会影响扩散范围判断。

四、使用方法

称取本品29.9 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装小试管后，于121 ℃高压灭菌15 min。灭菌后保持直立冷却，制成半固体深层培养基备用。

接种时应使用直针挑取纯培养菌落，自培养基中央垂直穿刺至距管底约0.5～1 cm处，再沿原路线拔出。接种后置36±1 ℃培养24～48 h。培养结束后先观察硫化氢和动力结果，再滴加Kovacs氏靛基质试剂观察吲哚反应。加入吲哚试剂后培养基表层变化会影响后续观察，因此应将吲哚试验放在最后判读。

五、结果判读

若H₂S阳性很强，黑色沉淀可能遮盖动力扩散情况，此时动力结果需要谨慎判断，必要时可另做动力培养基确认。若培养时间过长，扩散浑浊可能增强，也可能影响动力判读，因此应按规定时间观察。

六、质量控制

注：原资料中“大肠埃希氏菌ATCC25922 动力+/-”和“伤寒沙门氏菌 H₂S+/-”提示不同实验条件或菌株状态下反应强弱可能存在差异。作为产品质控资料时，建议结合企业内控标准明确“阳性、弱阳性或典型反应范围”，避免客户误解为结果可随意判读。

七、典型应用场景

SIM动力培养基常用于肠杆菌科及相关菌株的生化鉴定，也可在食品微生物检验中作为单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、志贺氏菌、大肠埃希氏菌等检测流程中的辅助鉴定项目。不同标准方法对SIM试验的使用目的和结果组合要求不同，应以具体检测标准为准。

对于单核细胞增生李斯特氏菌检验，运动性是重要鉴别项目之一。李斯特菌在适宜条件下可表现出特征性运动，但具体培养温度、培养时间和判读方式应按标准方法执行。SIM培养基在此类检测中主要作为动力及相关生化反应观察工具，而不是选择性分离培养基。

八、常见问题与原因分析

若动力结果难以判断，常见原因包括琼脂浓度偏高或偏低、穿刺不直、接种量过大、培养时间过长、培养基脱水或菌株本身运动性较弱。半固体培养基的琼脂浓度是动力观察的关键，若凝胶过硬，运动菌不易扩散；若过软，则可能出现假性扩散。

若H₂S阳性菌不显黑，应检查硫代硫酸钠和硫酸铁铵是否失效、培养基pH是否异常、灭菌是否过度以及培养时间是否足够。若吲哚阳性菌不显红，应检查Kovacs试剂是否新鲜、试剂加入量是否合适、培养时间是否足够，以及胰蛋白胨中色氨酸来源是否稳定。

若培养基出现气泡、裂隙或异常沉淀，可能影响穿刺线和扩散观察，应避免使用。若分装后未保持直立凝固，培养基斜面或表面不平也会影响结果判读。

九、与MIU、半固体动力培养基的区别

SIM培养基、MIU培养基和普通半固体动力培养基都可用于观察运动性，但检测项目不同。SIM培养基可同时观察硫化氢、吲哚和动力；MIU培养基常用于动力、吲哚和脲酶试验；普通半固体动力培养基则主要用于动力观察。选择哪一种培养基，应根据目标菌鉴定流程和标准方法要求确定。

十、贮存、废物处理与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的半固体试管培养基应直立保存，避免脱水、污染和气泡影响判读。若出现明显干缩、裂隙、污染、颜色异常或质控结果不符合要求，应停止使用并排查原因。检测后的带菌培养物、试管和接触样品的耗材，应置于121 ℃高压灭菌30 min后，再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB 4789.30-2025《食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》。

相关GB食品微生物检验方法中硫化氢、吲哚和动力试验要求。