乳糖胆盐培养基：用于化妆品中粪大肠菌群测定的发酵培养基

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

注：双料培养基为配制浓度加倍，通常用于样品接种量较大、接种液会稀释培养基成分的场景。是否使用单料或双料，应按具体检验方法和样品处理流程执行。

三、检验原理

乳糖胆盐培养基的核心是“胆盐选择 + 乳糖发酵 + 酸碱指示 + 小倒管捕气”。蛋白胨为细菌生长提供基础营养，猪胆盐可抑制许多革兰氏阳性菌和非肠道背景菌，使肠道来源的革兰氏阴性菌更容易表现出生长优势。乳糖是大肠菌群和粪大肠菌群常用的发酵底物，目标菌若能发酵乳糖，会产生酸和气体。

培养基中加入溴甲酚紫作为pH指示剂。当乳糖被发酵并产生酸性代谢物时，培养基由紫色或紫蓝色转为黄色，提示产酸；试管内小倒管用于捕集发酵产生的气体，若小倒管内出现明显气泡或气体积聚，提示产气。产酸、产气并伴随生长混浊，是乳糖发酵阳性的典型表现。

由于化妆品样品基质复杂，部分样品含防腐剂、表面活性剂、香精或油脂成分，可能影响微生物恢复和发酵结果。因此，本品“不含中和剂”的特点需要特别说明：若样品具有较强抑菌性，应按方法要求进行适当中和或选择含中和剂的培养体系，并通过方法适用性或中和效果验证确认检测可靠性。

四、使用方法

称取本品30.0 g配制单料培养基，或称取60.0 g配制双料培养基，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解。将培养基分装于带有小倒管的试管中，每管10 mL，于115 ℃高压灭菌20 min，冷却后备用。

分装时应确保小倒管内尽量充满培养液，避免残留空气造成假阳性产气判断。灭菌后若小倒管内已有明显气泡，应谨慎使用或剔除。培养基灭菌温度采用115 ℃，不建议随意改为121 ℃长时间灭菌，以免乳糖和指示剂受热变化，导致颜色异常或发酵判读受影响。

接种后按规定条件培养。质控条件为44±0.5 ℃培养24±2 h。培养结束后观察培养液是否混浊、颜色是否变黄，以及小倒管内是否出现气体。若出现产酸产气，应按标准方法进行后续分离和确认。

五、质量控制

注：质控表中的“生长率”包含生长支持和发酵显色两方面含义。对于乳糖胆盐培养基，阳性质控不仅应生长，还应表现出产酸、产气和混浊。

六、结果判读

若培养基变黄但不产气，或产气但颜色变化不明显，应记录为可疑或非典型结果，并结合标准方法进行复试或后续确认。若培养时间过长，部分细菌可能继续分解蛋白胨产生碱性物质，使颜色发生回变，影响判读，因此应按规定时间观察。

七、与化妆品粪大肠菌群检测流程的关系

在化妆品粪大肠菌群检测中，乳糖胆盐培养基通常用于乳糖发酵初筛。若培养后不产酸、不产气，可按方法判断为相应阶段阴性；若产酸产气，则需进一步转种选择性或鉴别性平板，如伊红美蓝琼脂，观察典型菌落，并进行后续鉴定。

乳糖胆盐培养基本身不能区分所有乳糖发酵菌，也不能直接确认粪大肠菌群。部分非目标菌可能出现类似产酸产气反应，部分受损目标菌也可能反应较弱。因此，完整检测应包括样品前处理、必要的中和、乳糖发酵、分离培养和确认试验。

八、不含中和剂配方的应用提示

本品为不含中和剂配方，适用于样品中抑菌成分影响较小，或实验流程中已另行完成中和处理的检测场景。化妆品中常含防腐剂、表面活性剂、醇类或其他抑菌成分，若直接接种，可能抑制目标菌生长，导致假阴性。

因此，在产品说明中明确“不含中和剂”非常重要，可帮助使用者根据样品类型选择合适的前处理方式。

九、常见问题与原因分析

若阳性质控菌不产酸产气，应重点检查培养基pH、乳糖和溴甲酚紫状态、灭菌温度是否过高、小倒管是否正确放置、培养温度是否达到44±0.5 ℃、菌株活性是否正常以及接种量是否合适。粪大肠菌群测定对培养温度较敏感，温度偏低可能降低筛选特异性，温度偏高则可能抑制目标菌生长。

若金黄色葡萄球菌出现生长，应检查猪胆盐质量、配制浓度、灭菌条件和培养基保存时间。若小倒管内出现气泡但培养液不混浊、不变黄，应优先考虑分装或灭菌后残留空气，而不是发酵产气。若培养基灭菌后颜色明显偏黄，可能是pH偏低、过度加热或原料受潮导致；若颜色偏蓝紫且阳性菌变色弱，应检查初始pH是否偏高。

十、贮存与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护，建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的试管培养基应按实验室验证条件保存，并在规定期限内使用。若出现污染、颜色异常、pH异常、小倒管气泡过多、沉淀异常或质控结果不符合要求，应停止使用并排查原因。检测后的带菌培养物、试管和接触样品的耗材，应经高压灭菌后再按实验室生物安全要求处理。

参考标准与资料

GB/T 7918.3-1987《化妆品微生物标准检验方法 粪大肠菌群》。

《化妆品安全技术规范》（2015年版）相关微生物检验方法。

相关化妆品微生物检验方法中粪大肠菌群乳糖发酵、分离和确认要求。