马铃薯葡萄糖水(PD水):用于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌和真菌增菌培养的营养培养基
- 2026-06-23 15:08:42
- 逗点生物
马铃薯葡萄糖水(PD水):用于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌和真菌增菌培养的营养培养基
一、产品用途与基本信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 马铃薯葡萄糖水(PD水) |
| 英文名称 | Potato Dextrose Broth |
| 产品货号 | GF1155 |
| 产品规格 | 250 g/瓶 |
| 产品类型 | 液体营养增菌培养基 |
| 主要用途 | 用于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)和真菌的增菌培养 |
| 参考标准 | GB 4789.29-2020 |
| 使用量 | 24.0 g/L |
| 灭菌条件 | 121 ℃高压灭菌20 min |
| 推荐质控培养条件 | 36~38 ℃培养48 h |
| 后续观察 | 增菌后转种mPDA,观察典型菌落 |
| 保质期 | 未开封三年 |
二、配方组成、用量及作用
| 成分 | 标示用量 | 主要作用 | 用途说明 |
|---|---|---|---|
| 马铃薯浸出物 | 相当于去皮马铃薯300.0 g/L | 提供淀粉水解产物、少量氮源、矿物质、维生素和生长因子 | 支持真菌及唐菖蒲伯克霍尔德氏菌恢复和增殖 |
| 葡萄糖 | 20.0 g/L | 提供易利用碳源和能量来源 | 促进菌体生长和代谢活性 |
| 干粉培养基 | 24.0 g/L | 由马铃薯浸出物等脱水成分与葡萄糖组成 | 实际配制时按产品用量称取干粉,不是另称鲜马铃薯300 g |
| 最终pH | 以产品说明或企业内控为准 | 影响目标菌和真菌生长 | 原资料未列最终pH,发布时不建议自行补写固定数值 |
三、培养基原理
马铃薯葡萄糖水的核心是“植物浸出营养 + 高可利用碳源”。马铃薯浸出物含有多种可溶性营养成分,包括淀粉水解产物、矿物质、维生素和少量含氮物质,可为真菌和部分细菌提供较温和的生长环境。葡萄糖作为易利用碳源,可迅速参与细胞能量代谢,促进目标菌在增菌阶段恢复和增殖。
在唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检测中,PD水主要用于增菌培养。样品中目标菌数量可能较低,或受到食品基质、加工条件和储存环境影响而处于受损状态,液体增菌可提高后续分离检出的机会。增菌后通常需转种至mPDA等鉴别培养基,观察是否形成典型紫色、光滑、湿润、边缘整齐的菌落,部分菌落中心可见草帽状凸起。
对于真菌培养,PD水同样可提供良好的营养环境,适合酵母和霉菌在液体中恢复和增殖。但液体培养不能提供单个菌落形态信息,若需要分离纯化、计数或鉴定,应转种至马铃薯葡萄糖琼脂、沙氏琼脂等固体培养基。
四、使用方法
称取本品24.0 g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,按实验需要分装后,于121 ℃高压灭菌20 min。灭菌结束后冷却备用。
配制时应确保干粉完全溶解,避免局部高糖浓度或未溶颗粒影响培养基均一性。由于培养基含有葡萄糖,过度加热可能导致颜色加深或糖类受热变化,因此不建议随意延长灭菌时间。灭菌后培养基应为均一液体,无污染、无明显异常沉淀或异味。若出现明显焦糖色、沉淀异常或pH偏离,应结合质控结果判断是否可用。
五、质量控制
| 质控指标 | 质控菌株及编号 | 培养条件 | 质控评定标准 | 结果说明 |
|---|---|---|---|---|
| 生长率 | 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 CICC 10574 | 36~38 ℃培养48 h,增菌后转种mPDA | 在mPDA上>10 CFU,紫色、光滑、湿润、边缘整齐菌落,菌落中心可有草帽状凸起 | 验证PD水对目标菌增菌恢复能力 |
| 外观检查 | 灭菌后培养基 | 室温观察 | 液体均一,无污染、无明显异常沉淀 | 评价配制和灭菌状态 |
| 无菌检查 | 未接种培养基 | 按实验室内控执行 | 不应出现污染生长 | 保证培养基制备过程无污染 |
注:质控标准中的“在mPDA上>10 CFU”说明该培养基的评价重点是增菌后目标菌能否在后续平板上恢复生长,而不是仅观察PD水本身是否混浊。
六、结果观察与应用提示
PD水为液体培养基,培养后可观察是否出现混浊、沉淀、菌膜、絮状物或其他生长迹象。但液体变浑浊不能直接判定为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌阳性,因为其他细菌或真菌也可能在该非选择性培养基中生长。完整检测流程中,应将增菌液转种至mPDA等指定平板,观察典型菌落,并结合后续生化鉴定、毒素相关检测或分子方法进行确认。
唐菖蒲伯克霍尔德氏菌在mPDA上的典型菌落可呈紫色、光滑、湿润、边缘整齐,部分菌落中心可有草帽状凸起。这些特征具有筛查意义,但不能单独作为最终结论。食品样品中可能存在颜色相近或形态相似的非目标菌,因此疑似菌落必须进一步纯化和确认。
七、与mPDA培养基的关系
PD水和mPDA在检测流程中的作用不同。PD水是液体增菌培养基,用于提高目标菌数量;mPDA是固体分离和鉴别培养基,用于观察菌落形态和挑取疑似菌落。
| 培养基 | 状态 | 主要用途 | 结果观察 |
|---|---|---|---|
| PD水 | 液体 | 增菌培养,提高目标菌检出机会 | 观察混浊或生长迹象,需后续转种 |
| mPDA | 固体平板 | 分离培养和初步鉴别 | 观察紫色菌落、边缘、湿润度和草帽状凸起 |
| 普通PDA | 固体平板 | 真菌培养、分离和计数 | 观察真菌菌落形态 |
因此,PD水不能替代mPDA平板,也不能直接用于菌落计数。两者配合使用,可提高检测流程的完整性和可靠性。
八、常见问题与原因分析
若唐菖蒲伯克霍尔德氏菌质控菌株增菌后在mPDA上菌落数不足,应检查PD水配制浓度、灭菌时间、培养温度、培养时间、菌株活性、接种量和后续转种条件。培养基过度加热、干粉吸潮、葡萄糖受热变化或保存时间过长,都可能影响增菌效果。
若PD水培养后明显混浊,但mPDA上无典型菌落,可能是背景菌或真菌在PD水中生长,不代表目标菌阳性。若mPDA上菌落形态不典型,应进行纯化和后续确认。若培养液出现膜状物、絮状菌丝或大量沉淀,需考虑真菌生长或样品基质干扰。
若未接种对照出现混浊,说明培养基污染或灭菌不彻底,应停止使用。若灭菌后颜色明显加深,可能与加热过度或葡萄糖受热反应有关;若出现异常沉淀,应检查水质、原料状态和配制过程。
九、食品安全检测中的意义
唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)与酵米面、湿米粉、发酵玉米面制品、变质银耳或木耳等食品中毒事件密切相关。其风险核心并不只是细菌本身,而是部分菌株可产生米酵菌酸。米酵菌酸耐热性强,普通烹调难以彻底破坏,因此该类食品风险控制更强调原料卫生、避免长时间浸泡发酵、低温储存和及时食用。
PD水在检测中的作用,是为目标菌提供增菌恢复条件,帮助后续平板分离和确认。它属于实验室检测流程中的培养基工具,并不能用于食品安全风险消除。对于疑似污染食品,应按监管和标准方法进行检测与处置。
十、贮存与注意事项
本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封,置于避光、干燥处保存,避免吸潮、结块和性能下降。称量时应注意粉尘防护,建议佩戴口罩并在通风良好的环境中操作。未开封产品在规定条件下保质期为三年;开封后受储存湿度、温度和使用频次影响,保质时间可能缩短。
配制后的PD水应按实验室验证条件保存,并在规定期限内使用。若出现污染、明显变色、沉淀异常、异味或质控结果不符合要求,应停止使用并排查原因。检测后的带菌培养液、试管、平板和接触样品的耗材,应经高压灭菌后再按实验室生物安全要求处理。
参考标准与资料
GB 4789.29-2020《食品安全国家标准 食品微生物学检验 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)检验》。
相关食品微生物检验方法中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌增菌、mPDA分离和疑似菌确认要求。




