SBG磺胺增菌液：用于沙门氏菌选择性增菌的亚硒酸盐-煌绿体系培养基

一、产品用途与基本信息

二、配方组成、用量及作用

三、检验原理

SBG磺胺增菌液的核心是“营养支持 + 多重选择性抑菌”。蛋白胨和酵母粉提供氨基酸、短肽、维生素和生长因子，帮助沙门氏菌在选择性环境中恢复并增殖。D-甘露醇作为可利用碳源，为目标菌代谢提供能量。磷酸盐缓冲体系维持pH稳定，减少样品基质或代谢产物引起的酸碱波动。

选择性方面，亚硒酸钠、煌绿、牛磺胆酸钠和磺胺吡啶共同抑制多种背景菌。亚硒酸钠是SBG体系中重要的选择性成分，可抑制许多革兰氏阳性菌和部分非沙门氏菌肠道菌；煌绿是一种抑菌染料，可进一步限制部分非目标菌生长；牛磺胆酸钠属于胆盐类成分，可抑制胆盐敏感菌；磺胺吡啶用于增强培养基选择性。

需要注意的是，SBG增菌液的选择性并非绝对。部分非目标菌可能在选择压力下降、接种量过大或培养时间过长时恢复生长。因此，增菌液浑浊不是沙门氏菌阳性结果，必须转种选择性分离平板并进行确认。

四、使用方法

称取本品24.2 g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装备用。该培养基无需高压灭菌，应避免过分加热。

SBG磺胺增菌液含有亚硒酸钠和煌绿等热敏或受热后性能可能变化的选择性成分，因此不宜进行121 ℃高压灭菌，也不宜长时间煮沸。配制时应以“完全溶解”为目的，避免过度加热导致选择性下降、颜色异常或成分分解。溶解后应在无菌条件下分装至无菌试管或容器中。

配制后的培养基通常呈绿色或黄绿色，可能略带浑浊。若出现明显沉淀、异常变色、pH异常或空白对照污染，应停止使用并排查原因。由于该培养基无需高压灭菌，配制和分装过程的无菌操作尤为重要。

五、质量控制

注：原资料中“大肠埃希氏菌 ATCC2592”应修正为“大肠埃希氏菌 ATCC 25922”。质控时若只观察肉汤浑浊，信息相对有限；更严谨的做法是将增菌液转种至选择性平板，结合沙门氏菌典型菌落表现评价增菌效果。

六、结果观察与判读

SBG增菌后，应转种至沙门氏菌选择性分离培养基。沙门氏菌在不同选择性平板上的菌落表现不同，例如在XLD上常见红色菌落并可有黑心，在BS琼脂上可形成黑色或带金属光泽菌落，在DHL或HE平板上也可出现相应疑似菌落。但这些表现均属于初筛特征，必须经后续确认。

七、与其他沙门氏菌增菌液的区别

SBG磺胺增菌液与RVS增菌液、亚硒酸盐增菌液、四硫磺酸盐类增菌液都可用于沙门氏菌选择性增菌，但选择性机制不同。

不同增菌液对不同样品和不同沙门氏菌血清型的恢复能力可能不同，实际检测应按标准方法、样品类型和实验室验证结果选择。

八、为什么不能高压灭菌

SBG磺胺增菌液中含有亚硒酸钠、煌绿、磺胺吡啶和牛磺胆酸钠等功能成分，其中亚硒酸盐和煌绿对加热条件较敏感。高压灭菌或长时间煮沸可能导致选择性成分变化，使培养基抑菌能力下降或对沙门氏菌产生不利影响。

因此，配制时应采用加热煮沸溶解、避免过分加热、无菌分装的方式。若实验室因管理要求必须改变灭菌方式，应进行完整性能验证，包括沙门氏菌生长率、非目标菌选择性、pH和外观稳定性，确认符合要求后方可使用。

九、常见问题与原因分析

若鼠伤寒沙门氏菌或肠炎沙门氏菌质控不浑浊，应检查培养基配制浓度、加热时间、pH、原料是否受潮、亚硒酸钠或煌绿是否过量、菌株活性、接种量和培养温度。选择性培养基中抑菌剂过强或加热异常，都可能影响目标菌恢复。

若大肠埃希氏菌或金黄色葡萄球菌未受到抑制，应检查亚硒酸钠、煌绿、牛磺胆酸钠和磺胺吡啶是否称量准确，培养基是否过度稀释，培养时间是否过长，以及接种量是否过大。选择性培养基的抑菌能力有限，非目标菌初始菌量过高时可能突破抑制。

若配制后培养基颜色异常、沉淀明显或空白对照浑浊，应考虑加热过度、原料吸潮、水质问题、分装污染或储存不当。由于该培养基不高压灭菌，无菌分装和容器灭菌质量对结果可靠性影响较大。

十、安全注意事项

SBG磺胺增菌液含亚硒酸钠、煌绿和磺胺类成分，操作时应注意化学安全。亚硒酸盐具有较强毒性，煌绿为染料类抑菌成分，称量和配制时应避免吸入粉尘、皮肤接触和误食。建议佩戴口罩、手套和护目镜，并在通风良好的环境中操作。

含亚硒酸盐和煌绿的废液不应随意排放。检测后的带菌培养物应先按实验室生物安全要求灭菌，再结合化学废物管理要求处理。若发生溅洒，应按实验室含毒性化学品和生物污染物应急流程处理。

十一、贮存、废物处理与注意事项

本品不得用于临床检验。干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，避免吸潮、结块和选择性成分性能下降。称量时应注意粉尘防护。未开封产品在规定条件下保质期为三年；开封后受储存湿度、温度、光照和使用频次影响，保质时间可能缩短。

配制后的SBG磺胺增菌液应按实验室验证条件保存，并尽量在规定期限内使用。若出现污染、pH异常、颜色异常、明显沉淀或质控结果不符合要求，应停止使用并排查原因。检测后的带菌增菌液、试管和平板应置于121 ℃高压灭菌30 min后，再按实验室生物安全及含亚硒酸盐废物管理要求处理。

参考资料

SBG Sulfa Enrichment相关培养基资料。

沙门氏菌选择性增菌、亚硒酸盐-煌绿体系培养基和食品微生物检验相关资料。

沙门氏菌选择性分离平板及后续确认鉴定相关资料。