氨基酸脱羧酶试验培养基基础：原理、配方与使用注意事项

一、产品概况

项目	内容
产品名称	氨基酸脱羧酶试验培养基基础
英文名称	Decarboxylase Medium Base
货号	GF1228
规格	以产品标签和实际包装为准
用途	供鉴别肠道菌属能否产生氨基酸脱羧酶或相关代谢酶系用
适用方向	食品微生物检验、菌株生化鉴定、培养基质控
储存	避光、干燥、密封保存
保质期	未开封产品通常为三年，具体以标签为准

成分	用量	主要作用	在试验中的用途
蛋白胨	5.0 g/L	提供氮源、肽类和氨基酸	支持细菌基础生长
酵母浸粉	3.0 g/L	提供维生素、氨基酸和生长因子	促进肠道菌生长和酶活表达
葡萄糖	1.0 g/L	可发酵糖类	使培养基初期酸化，诱导脱羧相关反应
溴甲酚紫	0.02 g/L	pH指示剂	酸性呈黄色，碱性或回碱呈紫色
L-氨基酸	5.0 g/L	反应底物	检测对应氨基酸脱羧或相关代谢能力
DL-氨基酸	10.0 g/L	反应底物	可替代L-氨基酸使用，通常需加倍
最终pH	6.8±0.2	维持适宜初始酸碱环境	保证指示剂和酶反应正常

氨基酸脱羧酶试验一般在相对厌氧环境下进行。接种后，细菌先利用培养基中的少量葡萄糖产酸，使溴甲酚紫由紫色转为黄色。若细菌能产生对应氨基酸脱羧酶或相关代谢酶系，则会分解加入的氨基酸底物，产生碱性胺类或碱性代谢产物，使培养基由黄色重新转为紫色，判为阳性。

若细菌只能发酵葡萄糖而不能利用对应氨基酸产生碱性产物，培养基通常保持黄色或偏黄色，判为阴性。若菌株不生长或生长极弱，则结果不能直接判读，应重新检查接种菌活性、培养条件和培养基质量。

步骤	操作要点
1. 称量	称取氨基酸脱羧酶试验培养基基础约9 g，加入1 L蒸馏水或去离子水
2. 加入底物	分别加入5 g/L L-赖氨酸、L-精氨酸或L-鸟氨酸；若使用DL-氨基酸，通常加入10 g/L
3. 溶解	搅拌加热煮沸至完全溶解
4. 校正pH	溶解后校正最终pH至6.8±0.2
5. 分装	分装于小试管中，装量应满足检测需要
6. 覆盖液体石蜡	液面覆盖约3 mm高度液体石蜡
7. 灭菌	115 ℃高压灭菌10 min
8. 冷却备用	冷却后避光保存，按规定期限使用

氨基酸脱羧酶试验建议同时设置不加氨基酸的基础对照管。原因是部分菌株可能对葡萄糖发酵较弱、生长缓慢，或在基础培养基中产生一定碱性变化。只有将“加底物管”和“无底物对照管”进行比较，才能更准确判断阳性反应。

本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。称量干粉时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩并在通风良好环境中操作。开封后应立即密封，避免吸潮结块；如发现干粉明显结块、变色、受潮或超过有效期，不建议继续使用。

氨基酸脱羧酶试验培养基基础用于制备赖氨酸、精氨酸或鸟氨酸等氨基酸脱羧酶试验培养基，主要用于肠道菌属的生化鉴别。其反应原理是：菌株先发酵葡萄糖使培养基酸化变黄，若能利用对应氨基酸产生碱性产物，则培养基回变为紫色，判为阳性。

该培养基使用时应注意三点：第一，它是基础培养基，必须按检测目的分别加入氨基酸底物；第二，应覆盖液体石蜡以维持相对厌氧环境；第三，应设置无底物对照、阳性质控和阴性质控，不能仅凭单管颜色草率判读。对于沙门氏菌等食品微生物检验相关鉴定流程，应结合现行标准方法和产品说明书执行。