肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂）：配方、原理及使用注意事项

一、产品概况

项目	内容
产品名称	肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂）
英文名称	Bile Aesculin Azide Agar / Bile Esculin Azide Agar
货号	GF1240
规格	250 g/瓶
用途	用于生活饮用水中肠球菌的分离培养，也可用于食品和水样中肠球菌相关检测方法
产品类型	选择性鉴别固体培养基
储存	避光、干燥、密封保存
保质期	未开封产品通常为三年，具体以标签为准

成分	用量	主要作用	在培养基中的用途
胰蛋白胨	17.0 g/L	提供肽类、氨基酸和氮源	支持肠球菌及相关菌生长
牛肉浸粉	3.0 g/L	提供氮源、生长因子和微量营养	增强基础营养
酵母浸粉	5.0 g/L	提供B族维生素、氨基酸和生长因子	促进目标菌恢复和生长
牛胆粉	10.0 g/L	胆盐类选择剂	抑制部分非目标菌，筛选耐胆盐菌
氯化钠	5.0 g/L	维持渗透压	提供适宜离子环境
柠檬酸钠	1.0 g/L	缓冲和络合作用	稳定培养基体系，辅助选择性
七叶苷	1.0 g/L	鉴别底物	被肠球菌水解后产生七叶亭
柠檬酸铁铵	0.5 g/L	铁离子来源	与七叶苷水解产物反应形成黑色复合物
叠氮化钠	0.25 g/L	选择性抑制剂	主要抑制革兰氏阴性菌
琼脂	13.5 g/L	凝固剂	形成固体平板
最终pH	7.2±0.2（25 ℃）	维持适宜酸碱环境	保证目标菌生长及显色反应稳定

肠球菌通常能在胆盐存在下生长，并具有七叶苷水解能力。七叶苷被水解后生成七叶亭，七叶亭与柠檬酸铁铵提供的铁离子反应，形成深褐色至黑色复合物，使菌落周围培养基变黑。典型肠球菌在本培养基上可形成黄褐色至棕褐色菌落，菌落周围出现黑色或深褐色变色区。

需要注意，胆汁七叶苷阳性并不等于最终确认肠球菌。部分D群链球菌或其他耐受菌也可能出现类似反应，因此正式检验中仍需结合后续确认试验或标准流程进行判定。

制备时应避免过度加热。含七叶苷、胆盐和铁盐体系的培养基若长时间高温处理，可能出现颜色加深、沉淀增加或鉴别反应减弱等问题。倒板前应确保培养基完全溶解并混匀，避免局部成分不均影响菌落表现。

培养后应观察菌落形态、颜色和周围变黑情况。典型反应可作为筛选依据，但不能代替确证。若用于生活饮用水或食品水样检测，应按对应标准方法要求进行后续鉴定和结果报告。

下列质控菌株接种后于36 ℃培养24 h，观察生长和选择性表现。

质控项目	质控菌株及编号	预期结果	评价意义
生长率	粪肠球菌 ATCC 29212	PR≥0.7，黄褐色菌落，菌落周围变黑	验证目标菌促生长能力和鉴别反应
选择性	大肠埃希氏菌 ATCC 25922	G≤1	验证对革兰氏阴性菌的抑制能力
选择性	金黄色葡萄球菌 ATCC 6538	G≤1	验证对部分非目标革兰氏阳性菌的抑制能力
无菌性	未接种平板	无菌落生长	验证培养基无菌性

若粪肠球菌生长不良或不变黑，可能提示培养基营养、七叶苷、铁盐、pH或灭菌条件存在问题；若大肠埃希氏菌或金黄色葡萄球菌生长明显，则可能提示选择性不足、叠氮化钠失效或配制过程异常。

本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。由于配方中含叠氮化钠，称量和配制时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩和手套，在通风良好环境中操作。含叠氮化钠废液和废弃培养基应按实验室化学和生物安全要求处理，不应随意排入金属管道。

肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂）是一种用于肠球菌分离培养的选择性鉴别培养基。牛胆粉和叠氮化钠提供选择性，抑制部分非目标菌；七叶苷和柠檬酸铁铵构成鉴别体系，肠球菌水解七叶苷后与铁盐反应，使菌落周围培养基变黑。

该培养基适用于生活饮用水及食品、水样中肠球菌相关检测的分离培养环节。使用时应注意完全溶解、避免过度加热、控制灭菌条件和保存期限，并通过粪肠球菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌等质控菌株验证促生长能力、选择性和鉴别反应。正式检验结果应结合现行标准方法和后续确认试验进行判定。