金黄色葡萄球菌显色培养基：配方、原理及质控要点
- 2026-06-24 09:54:44
- 逗点生物
金黄色葡萄球菌显色培养基：配方、原理及质控要点
一、产品概况
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 金黄色葡萄球菌显色培养基 |
| 英文名称 | Chromogenic Staph. aureus Agar |
| 货号 | GF1242 |
| 产品类型 | 选择性显色固体培养基 |
| 建议规格表述 | 按实际标签标注；若为干粉产品，可标注为“干粉培养基”；若为即用型产品，可标注为“1000 mL/瓶，固体” |
| 用途 | 用于金黄色葡萄球菌的分离和初步鉴别 |
| 典型结果 | 金黄色葡萄球菌形成粉红色至紫红色、边缘较整齐的菌落 |
| 储存 | 避光、干燥、密封保存 |
| 保质期 | 原资料有“两年/三年”不一致，发布前应以产品标签和质检文件为准 |
二、配方组成、用量、作用及用途
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 在培养基中的用途 |
|---|---|---|---|
| 蛋白胨 | 14.0 g/L | 提供肽类、氨基酸和氮源 | 支持金黄色葡萄球菌及相关菌生长 |
| 酵母膏粉 | 5.0 g/L | 提供维生素、生长因子和微量营养 | 促进目标菌恢复和生长 |
| 氯化钠 | 25.0 g/L | 提供高盐选择压力并维持渗透压 | 利用葡萄球菌耐盐性，抑制部分非目标菌 |
| 大豆胨 | 5.0 g/L | 提供蛋白胨类营养和氮源 | 增强培养基促生长能力 |
| 琼脂 | 15.0 g/L | 凝固剂 | 形成固体平板，便于菌落分离观察 |
| 抑菌剂 | 2.0 g/L | 选择性抑制成分 | 抑制部分杂菌和背景菌 |
| 显色剂 | 1.4 g/L | 酶底物或显色反应体系 | 与目标菌相关酶反应，形成特征颜色菌落 |
| 最终pH | 6.9±0.2 | 维持适宜酸碱环境 | 保证目标菌生长和显色反应稳定 |
三、检验原理
金黄色葡萄球菌具有较强耐盐能力，可在较高氯化钠环境中生长。培养基中的抑菌剂进一步限制部分杂菌生长，使目标菌更容易被分离出来。显色剂则与金黄色葡萄球菌相关酶发生反应，底物被水解后释放显色基团，在平板上形成粉红色至紫红色菌落。
| 反应环节 | 作用机制 | 典型表现 |
|---|---|---|
| 营养支持 | 蛋白胨、大豆胨和酵母膏粉提供营养 | 目标菌生长良好 |
| 高盐选择 | 25.0 g/L氯化钠形成选择压力 | 利于耐盐葡萄球菌生长 |
| 抑菌剂作用 | 抑制部分非目标菌 | 背景菌减少 |
| 显色反应 | 目标菌相关酶水解显色底物 | 粉红色至紫红色菌落 |
| 初步鉴别 | 不同菌种形成不同颜色或无色菌落 | 便于挑取可疑菌落 |
显色培养基的优势是菌落颜色直观、便于筛选，但其显色反应受菌株差异、培养时间、培养基批次、样品背景菌和保存条件影响。对颜色不典型或可疑菌落，应进一步确认。
四、使用方法
| 步骤 | 操作要点 |
|---|---|
| 1. 称量 | 称取本品67.4 g |
| 2. 加水 | 加入蒸馏水或去离子水1 L |
| 3. 溶解 | 搅拌加热煮沸至完全溶解 |
| 4. 冷却 | 待培养基冷却至约50 ℃ |
| 5. 混匀 | 充分混匀，避免显色剂和抑菌剂分布不均 |
| 6. 倾注 | 无菌倾注灭菌平皿 |
| 7. 凝固 | 待平板完全凝固后备用 |
| 8. 保存 | 倒置、避光、密封，并按验证期限使用 |
原资料未写明高压灭菌步骤，使用时应严格按产品说明书执行。若该产品为含热敏显色剂的干粉培养基，过度高温灭菌可能影响显色反应和选择性；若产品说明要求仅煮沸溶解后倒板，则不应擅自增加高压灭菌步骤。正式生产资料中建议明确标注“是否需要高压灭菌”。
五、结果观察与判读
下列质控菌株接种后通常于36 ℃±1 ℃培养48 h观察结果。实际样品检测时，应根据产品说明书或标准方法规定的温度和时间执行。
| 菌落表现 | 初步判断 | 说明 |
|---|---|---|
| 粉红色至紫红色、边缘较整齐菌落 | 疑似金黄色葡萄球菌 | 需进一步确认 |
| 蓝色至紫绿色菌落 | 非目标葡萄球菌或干扰菌可能 | 可用于区别部分非目标菌 |
| 无色菌落 | 非典型或非目标菌 | 不应直接判为目标菌 |
| 无生长或极弱生长 | 可能被抑制或样品阴性 | 需结合质控和样品流程判断 |
| 背景菌大量生长 | 选择性不足 | 应排查培养基、样品或培养条件 |
显色平板应选择菌落颜色清晰、边缘可辨、背景干净的区域判读。若培养过久，部分菌落颜色可能加深或扩散，影响区分效果；若培养时间不足，目标菌颜色可能偏浅。
六、质量控制
| 质控项目 | 质控菌株及编号 | 预期结果 | 评价意义 |
|---|---|---|---|
| 生长率 | 金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 | PR≥0.7，粉红色至紫红色菌落 | 验证目标菌促生长能力和显色反应 |
| 生长率 | 金黄色葡萄球菌 CMCC(B) 26003 | PR≥0.7，粉红色至紫红色菌落 | 验证目标菌典型反应 |
| 特异性 | 腐生葡萄球菌 FSCC(I) 223042 | 蓝色至紫绿色菌落 | 验证非目标菌显色差异 |
| 选择性 | 表皮葡萄球菌 CMCC(B) 26069 | G≤5，无色菌落 | 验证对部分非目标葡萄球菌的区分能力 |
| 选择性 | 枯草芽孢杆菌 ATCC 6633 | G≤1 | 验证对芽孢杆菌的抑制能力 |
| 选择性 | 普通变形杆菌 CMCC(B) 49027 | G≤1 | 验证对肠道干扰菌的抑制能力 |
| 选择性 | 粪肠球菌 ATCC 29212 | G≤1 | 验证对肠球菌等非目标菌的抑制能力 |
| 无菌性 | 未接种平板 | 无菌落生长 | 验证培养基无菌性 |
若金黄色葡萄球菌质控菌株生长率低或颜色不典型，应排查培养基配制温度、显色剂稳定性、pH、平板保存时间和菌株状态。若非目标菌生长过多或颜色接近目标菌，应检查抑菌剂有效性和培养条件。
七、与传统培养基的关系
金黄色葡萄球菌常用分离培养基包括Baird-Parker琼脂、血平板和显色培养基等。显色培养基的优势是颜色直观、筛选效率高，但传统培养基仍有其用途。例如Baird-Parker琼脂可观察黑色或灰黑色菌落、卵黄反应和透明圈等典型表现；血平板可辅助观察溶血现象。不同培养基的目标是互补，而不是简单替代。
| 培养基类型 | 主要特点 | 用途 |
|---|---|---|
| 金黄色葡萄球菌显色培养基 | 目标菌形成粉红至紫红色菌落 | 快速筛选和初步鉴别 |
| Baird-Parker琼脂 | 观察典型黑灰色菌落及卵黄反应 | 传统分离和筛选 |
| 血平板 | 观察菌落形态和溶血 | 纯化和辅助鉴别 |
| 确认试验 | 凝固酶、耐热核酸酶等 | 最终确认 |
显色培养基可提高筛选效率，但不能省略标准规定的确认步骤。尤其在食品基质复杂、背景菌丰富或菌落颜色不典型时，应谨慎判读。
八、常见问题与原因分析
| 常见问题 | 可能原因 | 解决建议 |
|---|---|---|
| 目标菌颜色偏浅 | 培养时间不足、菌株状态弱或显色剂活性下降 | 延长至规定时间，复核质控 |
| 粉红色菌落不典型 | 背景菌干扰或显色反应交叉 | 挑取可疑菌落做确认试验 |
| 金黄色葡萄球菌生长率低 | 抑菌剂过强、平板过干、pH异常或过度加热 | 检查配制和保存条件 |
| 非目标菌生长多 | 抑菌剂失效或配制错误 | 复核称量、溶解和产品储存 |
| 整板颜色异常 | 显色剂降解、过度加热或保存不当 | 避光保存并控制加热 |
| 平板沉淀或不透明 | 溶解不充分、水质问题或成分析出 | 使用合格水源并充分溶解 |
| 批间颜色差异 | 原料、显色剂或培养条件差异 | 加强批次质控 |
| 结果重复性差 | 接种量、培养时间、平板厚度不一致 | 统一操作并记录条件 |
九、使用与储存注意事项
本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。称量干粉时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩、手套和实验服，在通风良好环境下操作。干粉培养基使用后应立即密封，避免吸潮结块；显色培养基应注意避光保存，防止显色剂降解。
| 注意事项 | 要求 |
|---|---|
| 用途限制 | 不得用于临床检验 |
| 个人防护 | 称量时佩戴口罩和手套，避免吸入粉尘 |
| 干粉保存 | 避光、干燥、密封保存 |
| 开封后管理 | 使用后立即盖紧，防止吸潮 |
| 平板保存 | 倒置、避光、密封，并按验证期限使用 |
| 加热控制 | 避免过度加热，按说明书处理 |
| 结果确认 | 粉红至紫红色菌落为可疑结果，需进一步确认 |
| 废弃物处理 | 接种后培养物和污染平板需灭菌后处理 |
小结
金黄色葡萄球菌显色培养基是一种用于金黄色葡萄球菌分离和初步鉴别的选择性显色培养基。蛋白胨、大豆胨和酵母膏粉提供营养，氯化钠和抑菌剂形成选择压力，显色剂与目标菌相关酶反应，使金黄色葡萄球菌形成粉红色至紫红色菌落。
使用该培养基时，应注意配制温度、显色剂稳定性、平板避光保存和质控验证。粉红色至紫红色菌落可作为疑似金黄色葡萄球菌筛选依据，但不能直接作为最终阳性结果。正式检验应结合现行标准方法，对可疑菌落进行进一步确认。
