酵母提取物琼脂：水质可培养微生物计数培养基的配方、原理及质控要点

一、产品概况

二、配方组成、用量、作用及用途

三、检验原理

酵母提取物琼脂通过提供适度营养，使水样中的可培养微生物在平板上形成可见菌落。每个可计数菌落通常被视为一个菌落形成单位，即CFU。通过记录平板上的菌落数，并结合接种体积和稀释倍数，可计算水样中可培养微生物数量。

该方法强调“培养条件”对结果的影响。同一样品在不同培养温度、培养时间、培养基营养水平下，得到的菌落数可能不同。因此报告结果时应注明检测方法、培养温度、培养时间和计数单位。

四、使用方法

配制时应确保琼脂完全溶解。若溶解不充分，平板会出现颗粒、凝胶不均或局部厚薄不一，影响菌落形成和计数。灭菌后不宜长时间高温保温，以免培养基颜色加深、pH漂移或凝胶强度下降。

五、培养和计数要点

酵母提取物琼脂可用于水中可培养微生物计数。ISO 6222方法通常涉及在不同温度下进行有氧培养，例如较高温度用于观察适应较温暖环境的微生物，较低温度用于观察水环境中较广泛的可培养微生物。实际操作应以采用的标准方法和实验室作业指导书为准。

水样中微生物数量可能较低，也可能因污染或工艺异常而较高。必要时应设置适当稀释度，使最终平板菌落数处于可计数范围。若平板菌落过多、蔓延生长或背景不清，应按实验室规定选择合适平板或重新检测。

六、质量控制

下列质控菌株接种待测培养基后，于36 ℃±1 ℃培养24 h～48 h，观察生长情况和生长率。

生长率PR用于评价待测培养基与参比培养基相比的促生长能力。若质控菌株生长率低于要求，应排查干粉状态、称量、pH、灭菌条件、水质、平板干燥程度和菌株活性。

七、结果判读与报告建议

报告结果时，应避免笼统写作“菌落总数”。更严谨的表述是“按ISO 6222条件测得的水中可培养微生物菌落数”或“水中可培养微生物计数”。若用于企业内部水质监测，可结合历史趋势、工艺节点和限值要求进行评价。

八、常见问题与原因分析

九、使用与储存注意事项

本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。称量干粉时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩、手套和实验服，在通风良好环境下操作。干粉使用后应立即密封，防止吸潮结块；如发现明显受潮、结块、变色或超过有效期，不建议继续使用。

小结

酵母提取物琼脂是一种用于水质可培养微生物计数的非选择性固体培养基。胰蛋白胨和酵母提取物提供基础营养，琼脂形成稳定固体平板，适用于按ISO 6222等方法对水样中可培养微生物进行菌落计数。

该培养基检测结果受培养温度、培养时间、接种方式、样品稀释度和平板状态影响。使用时应严格控制配制、灭菌、倒板、保存和培养条件，并通过大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和枯草芽胞杆菌等质控菌株验证促生长能力。结果报告时建议明确为“水中可培养微生物计数”，并注明所采用的方法和培养条件。