沙氏葡萄糖液体培养基（SDB）：药典真菌培养基的配方、原理及质控要点
- 2026-06-24 10:37:45
- 逗点生物
沙氏葡萄糖液体培养基（SDB）：药典真菌培养基的配方、原理及质控要点
一、产品概况
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 沙氏葡萄糖液体培养基（SDB） |
| 英文名称 | Sabouraud Dextrose Broth |
| 货号 | GF606 |
| 规格 | 250 g/瓶 |
| 产品类型 | 非选择性液体培养基 |
| 适用标准 | 中国药典2025年版、中国药典2020年版、中国药典2015年版，以及USP、EP、JP等相关药典体系 |
| 用途 | 用于霉菌和酵母菌的培养 |
| 典型培养对象 | 白色念珠菌、酿酒酵母、黑曲霉等真菌 |
| 储存 | 室温、避光、干燥、密封保存 |
| 保质期 | 未开封产品通常为三年，具体以标签为准 |
二、配方组成、用量、作用及用途
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 在培养基中的用途 |
|---|---|---|---|
| 动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物 | 10.0 g/L | 提供肽类、氨基酸、氮源、部分碳源和生长因子 | 支持霉菌、酵母菌恢复和增殖 |
| 葡萄糖 | 20.0 g/L | 主要可发酵碳源和能源 | 促进真菌生长，提高培养基营养水平 |
| 最终pH | 5.6±0.2（25 ℃） | 维持偏酸性环境 | 有利于真菌生长，并抑制部分细菌干扰 |
三、检验原理
SDB的核心作用是为真菌提供适宜营养和偏酸性环境。动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物提供真菌生长所需的氮源、氨基酸和生长因子；葡萄糖作为易利用碳源，为真菌代谢提供能量；pH 5.6左右的环境适合多数霉菌和酵母菌生长，同时对部分细菌具有一定抑制作用。
| 作用环节 | 主要成分 | 原理 |
|---|---|---|
| 氮源供应 | 蛋白胨类混合物 | 提供肽类和氨基酸，支持菌体合成 |
| 碳源供应 | 葡萄糖 | 为真菌代谢和繁殖提供能量 |
| 生长促进 | 蛋白胨类营养物质 | 提供部分维生素和生长因子 |
| 酸性环境 | pH 5.6±0.2 | 有利于真菌生长，减少部分细菌干扰 |
| 液体培养 | 不含琼脂 | 适合增菌、活化和菌悬液制备 |
SDB不是选择性培养基，不能完全抑制细菌生长。若样品中细菌背景较高，或检测目的要求抑制细菌，应根据标准方法选择含抗生素的沙氏培养基或其他适用培养基。
四、使用方法
| 步骤 | 操作要点 |
|---|---|
| 1. 称量 | 称取本品30.0 g |
| 2. 加水 | 加入蒸馏水或去离子水1 L |
| 3. 溶解 | 搅拌加热煮沸至完全溶解 |
| 4. 分装 | 按实验需要分装至试管、三角瓶或培养瓶 |
| 5. 灭菌 | 121 ℃高压灭菌15 min |
| 6. 冷却 | 冷却后备用 |
| 7. 接种培养 | 按药典或实验室作业指导书规定接种和培养 |
| 8. 观察 | 观察肉汤混浊、菌膜、沉淀、菌丝团或转接结果 |
配制时应避免长时间过度加热，以减少葡萄糖热降解和培养基颜色加深。灭菌后若出现明显焦糖色、异常沉淀、浑浊污染或pH偏离，应停止使用并复核配制流程。
五、适用场景与使用要点
SDB常用于药典微生物检验中的真菌培养相关环节，包括菌种活化、培养基适用性检查、方法适用性试验、真菌培养和实验室质控。由于其为液体培养基，观察结果时不能以“菌落数”直接表达，而应观察生长状态或转接至固体培养基后进行确认。
| 应用场景 | 主要目的 |
|---|---|
| 真菌菌种活化 | 恢复白色念珠菌、黑曲霉等质控菌株 |
| 方法适用性试验 | 验证供试品是否影响真菌检出 |
| 促生长能力检查 | 验证培养基能否支持规定真菌生长 |
| 菌悬液制备 | 为后续接种或挑战试验提供培养物 |
| 增菌培养 | 提高低数量真菌的检出概率 |
若用于药典相关检验，应严格按药典通则和企业验证文件执行，包括接种量、培养温度、培养时间、质控菌株和结果判定标准。
六、结果观察与判读
液体培养基的结果观察与固体平板不同。酵母菌通常使肉汤出现均匀或轻度混浊；霉菌可形成菌丝团、絮状物、表面菌膜或瓶壁附着生长。不同真菌的生长表现差异较大，应结合质控对照判断。
| 观察结果 | 初步判断 | 说明 |
|---|---|---|
| 肉汤混浊 | 酵母或细菌样生长可能 | 需结合菌种和转接结果判断 |
| 出现白色菌丝团 | 霉菌生长 | 黑曲霉早期可见白色菌丝 |
| 表面菌膜或絮状物 | 真菌或污染菌生长 | 必要时转接确认 |
| 肉汤澄清无变化 | 未见明显生长 | 需结合培养时间和阳性对照判断 |
| 空白对照混浊 | 培养基或操作污染 | 检测结果无效 |
| 质控菌生长弱 | 培养基或培养条件异常 | 需复核pH、灭菌和菌株状态 |
SDB中的生长表现不能直接用于菌落计数。若需要确认培养物种类，应转接至适宜固体培养基，结合菌落形态、显微镜观察或其他鉴定方法进行判断。
七、质量控制
下列质控菌株接种待测培养基后，按规定培养条件观察生长情况。液体培养基宜以“生长良好、肉汤混浊度与对照相当、形成菌丝”等表述评价促生长能力。
| 质控项目 | 质控菌株及编号 | 培养条件 | 预期结果 | 评价意义 |
|---|---|---|---|---|
| 促生长 | 白色念珠菌 CMCC(F) 98001 | 20 ℃～25 ℃，48 h | 生长良好，肉汤混浊 | 验证对酵母样真菌的支持能力 |
| 促生长 | 黑曲霉 CMCC(F) 98003 | 20 ℃～25 ℃，3 d～5 d | 生长良好，可见白色菌丝 | 验证对霉菌的支持能力 |
| 无菌性 | 未接种培养基 | 同条件培养 | 无生长、无混浊 | 验证培养基无菌性 |
| 外观检查 | 灭菌后培养基 | 室温观察 | 色泽正常，无异常沉淀或污染 | 验证配制质量 |
若白色念珠菌不混浊或黑曲霉不形成菌丝，应排查干粉保存状态、pH、灭菌条件、配制用水、培养温度、培养时间和菌株活性。若空白对照出现混浊，则该批培养基或操作过程存在污染风险。
八、SDB与SDA的区别
| 项目 | 沙氏葡萄糖液体培养基（SDB） | 沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA） |
|---|---|---|
| 形态 | 液体培养基 | 固体琼脂培养基 |
| 是否含琼脂 | 不含 | 含琼脂 |
| 主要用途 | 真菌培养、增菌、菌种活化、适用性检查 | 真菌分离、培养和菌落计数 |
| 结果观察 | 肉汤混浊、菌丝团、菌膜、沉淀 | 菌落形态、菌落数量、菌丝和孢子 |
| 是否适合直接计数 | 不适合 | 适合平板计数 |
实际应用中，SDB和SDA常配合使用。SDB可用于真菌增菌或活化，SDA可用于分离、纯化和观察菌落形态。若发布产品资料，应避免把SDB写成“用于真菌菌落总数测定”的直接计数培养基。
九、常见问题与原因分析
| 常见问题 | 可能原因 | 解决建议 |
|---|---|---|
| 白色念珠菌生长弱 | pH异常、灭菌过度、菌株状态差或培养温度不合适 | 复核pH、培养温度和菌株活性 |
| 黑曲霉不长菌丝 | 培养时间不足、孢子活性差或培养条件不适 | 延长至规定时间并检查孢子悬液 |
| 肉汤颜色加深 | 葡萄糖过度加热或灭菌后长时间保温 | 控制加热和冷却时间 |
| 空白对照混浊 | 灭菌不足或无菌操作污染 | 复核灭菌和分装操作 |
| 肉汤有沉淀 | 水质、蛋白胨批次或加热过程影响 | 与空白对照比较，必要时复配 |
| 细菌污染明显 | SDB选择性弱或无菌操作不当 | 加强无菌操作，必要时使用含抗生素培养基 |
| 结果重复性差 | 接种量、培养时间、温度不一致 | 统一操作并设置对照 |
| 干粉结块 | 吸潮 | 不建议继续使用 |
十、使用与储存注意事项
本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。称量干粉时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩、手套和实验服，在通风良好环境下操作。干粉培养基使用后应立即密封，防止吸潮结块，并于室温避光干燥处保存。
| 注意事项 | 要求 |
|---|---|
| 用途限制 | 不得用于临床检验 |
| 个人防护 | 称量时佩戴口罩和手套，避免吸入粉尘 |
| 干粉保存 | 室温、避光、干燥、密封保存 |
| 配制用水 | 使用蒸馏水或去离子水 |
| 灭菌条件 | 121 ℃高压灭菌15 min |
| 培养条件 | 按药典或实验室作业指导书执行 |
| 结果确认 | 液体培养阳性需转接或进一步鉴定 |
| 废弃物处理 | 接种后培养物需灭菌后处理 |
小结
沙氏葡萄糖液体培养基（SDB）是一种药典体系常用的真菌培养液体培养基。其配方由动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物、葡萄糖组成，最终pH为5.6±0.2，适合霉菌和酵母菌培养。白色念珠菌通常表现为肉汤混浊，黑曲霉可形成白色菌丝或菌丝团。
使用时应明确：SDB为液体培养基，不用于直接平板计数；若需观察菌落形态或进行菌落计数，应转接至SDA等固体培养基。药典相关检验应按2025年版《中国药典》或企业已确认的适用标准执行，并通过白色念珠菌、黑曲霉等质控菌株验证培养基的促生长能力和无菌性。
