肠道菌增菌液体培养基：耐胆盐革兰阴性菌检查的配方、原理及质控要点

一、产品概况

二、配方组成、用量、作用及用途

三、检验原理

肠道菌增菌液体培养基的核心是“选择性增菌”。目标菌需要能耐受胆盐和亮绿形成的选择压力，并能利用培养基中的营养成分增殖。明胶胰酶水解物为细菌提供氮源和生长因子，葡萄糖提供能源，磷酸盐缓冲体系维持pH稳定；牛胆盐和亮绿抑制多数革兰氏阳性菌及部分非目标菌，使耐胆盐革兰阴性菌在培养过程中相对富集。

原资料中“牛胆盐和亮绿抑制非肠杆菌科细菌”的表述不够准确。更严谨的说法是：牛胆盐和亮绿主要用于抑制革兰氏阳性菌、胆盐不耐受菌及部分背景菌，从而有利于耐胆盐革兰阴性菌增菌。该培养基不用于直接确认菌种，阳性增菌后仍需按药典方法进行后续分离或确认。

四、使用方法

本品使用方法为100 ℃加热30 min后立即冷却，而不是121 ℃高压灭菌。含胆盐、亮绿和葡萄糖的选择性培养基对加热条件较敏感，过度加热可能影响选择性、促生长能力和外观颜色。配制时应严格按产品说明书执行，不建议擅自提高灭菌温度或延长加热时间。

五、在药典检查中的应用要点

在药典非无菌产品微生物检查中，耐胆盐革兰阴性菌检查通常包括样品处理、预增菌或复苏、选择性增菌、后续分离和确认等步骤。肠道菌增菌液体培养基主要用于选择性增菌阶段，其作用是提高目标菌检出概率。

如果供试品本身含防腐剂、抑菌剂或表面活性剂，仅使用本培养基可能不足以消除样品抑菌性，应通过方法适用性试验确认稀释、中和或过滤处理是否有效。

六、结果观察与判读

本品为液体培养基，结果观察应以肉汤浑浊、澄清、沉淀、菌膜及后续转接结果为依据。不能直接用菌落形态评价液体培养基中的生长。

耐胆盐革兰阴性菌检查不能仅凭肉汤浑浊作最终阳性判定。增菌液出现可疑生长后，应按药典流程进行转接分离和确认。

七、质量控制

下列质控菌株接种待测培养基后，按规定条件培养，观察促生长和选择性。液体培养基的质量控制应以“肉汤混浊”或“肉汤澄清”表述更为准确。

原资料中选择性项目写有“与对照培养基相当”，但对应特征为“肉汤澄清”。发布时建议修正为：金黄色葡萄球菌应被抑制，表现为肉汤澄清或无明显生长。若金黄色葡萄球菌明显生长，说明选择性不足或配制过程存在问题。

八、与相关培养基的区别

肠道菌增菌液体培养基的重点是增菌，不是分离和计数。若需要得到可疑菌落，应将增菌液转接至适宜选择性分离平板，再进行后续确认。

九、常见问题与原因分析

十、使用与储存注意事项

本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。称量干粉时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩、手套和实验服，在通风良好环境下操作。干粉使用后应立即密封，防止吸潮结块，并于室温避光干燥处保存。

小结

肠道菌增菌液体培养基是一种用于耐胆盐革兰阴性菌检查的选择性液体增菌培养基。明胶胰酶水解物和葡萄糖提供营养，磷酸二氢钾和二水合磷酸氢二钠维持pH稳定，牛胆盐和亮绿形成选择性环境，抑制多数革兰氏阳性菌及部分非目标菌，使耐胆盐革兰阴性菌得到富集。

使用该培养基时应注意三点：第一，本品按说明为100 ℃加热30 min后立即冷却，不应擅自改为121 ℃高压灭菌；第二，液体培养基结果应以肉汤浑浊或澄清结合后续转接确认判断，不能仅凭浑浊报告最终结果；第三，药典相关检验应按2025年版《中国药典》或企业确认的适用标准执行，并通过铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌等质控菌株验证促生长和选择性。