三糖铁琼脂培养基（TSI）：肠杆菌科糖发酵、产气和硫化氢反应的鉴别培养基

一、产品概况

二、配方组成、用量、作用及用途

三、检验原理

TSI的核心原理是通过斜面和底层的颜色变化判断糖发酵类型。细菌发酵糖类产酸时，酚红指示剂变黄；若细菌不能持续发酵乳糖或蔗糖，斜面上的蛋白胨分解可产生碱性代谢产物，使斜面重新变红。底层处于相对厌氧环境，更能显示葡萄糖发酵产酸反应。

TSI的结果常用“斜面/底层”表示。例如，A/A表示斜面产酸、底层产酸；K/A表示斜面产碱、底层产酸；K/K表示斜面产碱、底层产碱或无糖发酵反应。若底层发黑，通常表示产硫化氢，应默认底层存在酸性反应，因为H₂S生成通常需要酸性环境支持。

四、制备方法

TSI必须制成高低层短斜面，不能简单倒成平板。底层过浅会影响厌氧环境和H₂S反应，斜面过长或底层不足也会影响斜面/底层结果的区分。制备后应检查颜色、凝胶状态、底层深度和无菌性。

五、接种与培养要点

TSI应使用接种针进行“先穿刺、后划线”。若只划线不穿刺，底层反应无法正确显示；若只穿刺不划线，斜面反应不充分。判读时间也很重要，过早可能反应不充分，过晚可能因蛋白胨分解导致斜面回碱或结果偏移。

六、结果判读

由于黑色硫化铁可能覆盖底层颜色，出现底层黑色时应记录为H₂S阳性，并结合其他反应判断底层酸性。TSI结果应按“斜面/底层，产气，H₂S”完整记录，例如“K/A，Gas+，H₂S+”。

七、常见菌株反应举例

不同菌株或血清型可能存在差异，因此TSI只能作为初步生化鉴别依据。对于沙门菌，若只写“产酸/产酸”容易造成误解，建议规范记录为“K/A或A/A、是否产气、是否产H₂S”，并以标准菌株实际质控结果为准。

八、质量控制

下列质控菌株接种待测培养基后，于30 ℃～35 ℃培养18～24 h，观察生长和生化反应。

原资料中乙型副伤寒沙门氏菌写为“产酸/产酸，产气，产硫化氢”，建议发布时修正为“通常斜面产碱/底层产酸，产气，产硫化氢”，即K/A，Gas+，H₂S+。若企业内部质控记录确实显示A/A，应以该批产品质控单和菌株实际反应为准，并注明可能与菌株特性或判读条件有关。

九、常见问题与原因分析

十、与相关培养基的区别

TSI的优势是一次反应中同时观察三糖发酵、产气和硫化氢，但它不能替代完整生化鉴定体系。对于肠杆菌科细菌，应结合其他鉴别培养基和生化试验综合判断。

十一、使用与储存注意事项

本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。称量干粉时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩、手套和实验服，在通风良好环境下操作。干粉使用后应立即密封，防止吸潮结块，并于室温避光干燥处保存。

小结

三糖铁琼脂培养基（TSI）用于初步鉴别肠杆菌科细菌对葡萄糖、乳糖、蔗糖的发酵反应，同时观察产气和硫化氢生成。蛋白胨和牛肉浸出粉提供营养，三种糖类用于发酵鉴别，酚红显示酸碱变化，硫代硫酸钠和硫酸亚铁用于H₂S反应，琼脂形成高低层短斜面结构。

使用TSI时应注意三点：第一，必须制成斜面和底层结构，并按“先穿刺、后划线”接种；第二，结果应按“斜面/底层，产气，H₂S”完整记录；第三，TSI只是初步生化鉴别培养基，不能单独作为菌种确认依据。药典相关检验应按2025年版《中国药典》或企业确认的适用标准执行。