马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：2025版药典真菌检验培养基的配方、原理及质控要点
- 2026-06-24 11:27:11
- 逗点生物
马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：2025版药典真菌检验培养基的配方、原理及质控要点
一、产品概况
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 |
| 常用简称 | PDA |
| 英文名称 | Potato Dextrose Agar |
| 货号 | GF657 |
| 规格 | 250 g/瓶 |
| 产品类型 | 真菌培养用营养性固体培养基 |
| 配方来源 | 《中华人民共和国药典》2025年版 |
| 适用标准 | 中国药典2025年版、USP、EP、JP等相关药典体系 |
| 用途 | 用于霉菌和酵母菌的检验、培养和观察 |
| 典型质控菌 | 黑曲霉 CMCC(F) 98003 |
| 典型结果 | 黑曲霉形成白色菌丝，后产生黑色孢子 |
| 储存 | 室温、避光、干燥、密封保存 |
| 保质期 | 未开封产品通常为三年，具体以标签为准 |
二、配方组成、用量、作用及用途
| 成分 | 用量 | 主要作用 | 在培养基中的用途 |
|---|---|---|---|
| 马铃薯（去皮） | 200.0 g/L | 提供马铃薯浸出物、淀粉类营养、矿物质和生长促进成分 | 促进霉菌菌丝生长、产孢和形态表现 |
| 葡萄糖 | 20.0 g/L | 易利用碳源和能源 | 支持霉菌、酵母菌快速生长 |
| 琼脂 | 15.0 g/L | 凝固剂 | 形成固体平板，便于菌落形成和观察 |
| 最终pH | 5.6±0.2（25 ℃） | 维持偏酸性培养环境 | 适合多数霉菌和酵母菌生长，并对部分细菌有一定不利影响 |
三、检验原理
PDA的核心原理是利用马铃薯浸出物和葡萄糖为真菌提供适宜营养环境。马铃薯浸出物含有多种天然营养成分，可促进霉菌菌丝生长和产孢；葡萄糖提供充足能源，使霉菌和酵母菌形成可见菌落；偏酸性pH有利于多数真菌生长；琼脂形成固体平板，便于观察菌落形态、颜色、质地和产孢情况。
| 作用环节 | 主要成分 | 原理 |
|---|---|---|
| 天然营养支持 | 马铃薯浸出物 | 提供淀粉类营养、矿物质和生长促进物质 |
| 能量供应 | 葡萄糖 | 为真菌代谢和菌落形成提供碳源 |
| 偏酸环境 | pH 5.6±0.2 | 适合多数霉菌和酵母菌生长 |
| 固体培养 | 琼脂 | 形成平板，便于分离、计数和形态观察 |
| 产孢观察 | 马铃薯浸出物、葡萄糖 | 有助于部分霉菌形成典型菌丝和孢子 |
PDA对霉菌形态观察较友好。黑曲霉在PDA上通常先形成白色菌丝，随后产生黑色孢子；酵母菌则多形成湿润、圆形、乳白色或淡色菌落。不同菌株的生长速度、菌落颜色和产孢情况可能受培养温度、培养时间、平板干湿程度和菌株状态影响。
四、使用方法
| 步骤 | 操作要点 |
|---|---|
| 1. 称量 | 称取本品40.0 g |
| 2. 加水 | 加入蒸馏水或去离子水1 L |
| 3. 溶解 | 搅拌加热煮沸至完全溶解 |
| 4. 分装 | 分装于三角瓶或其他适宜容器 |
| 5. 灭菌 | 121 ℃高压灭菌15 min |
| 6. 冷却 | 冷却至适宜倒板温度 |
| 7. 倒板 | 无菌倾注平皿 |
| 8. 保存 | 平板凝固后倒置、避光、密封保存，并按验证期限使用 |
配制时应确保琼脂完全溶解，避免平板凝胶不均。由于PDA含葡萄糖，灭菌后不宜长时间高温保温，也不建议反复融化，以免影响pH、颜色、凝胶状态和真菌生长表现。倒板后若平板表面水分过多，可能导致菌落扩散、霉菌蔓延或计数困难；若平板过干，则可能影响真菌恢复和产孢。
五、适用场景与检测要点
PDA常用于霉菌和酵母菌的检验、培养和形态观察，在药典真菌检查、菌种质控、污染调查和实验室基础培养中均有应用。
| 应用场景 | 主要目的 |
|---|---|
| 药典真菌检验 | 检查样品中霉菌和酵母菌生长情况 |
| 霉菌培养 | 观察菌丝、孢子和菌落形态 |
| 酵母菌培养 | 支持酵母菌形成可见菌落 |
| 质控菌验证 | 验证培养基对黑曲霉等真菌的促生长能力 |
| 真菌污染调查 | 对疑似真菌污染样品进行培养观察 |
| 菌种保存或转接 | 获得新鲜真菌培养物用于后续实验 |
PDA不应被理解为强抑菌真菌培养基。若样品中细菌数量较多，细菌也可能在PDA上生长并干扰结果。此时应依据检测目的选择合适的样品处理方式或配合其他含抑菌剂的真菌培养基使用。
六、结果观察与判读
| 观察结果 | 初步判断 | 说明 |
|---|---|---|
| 白色菌丝逐渐产生黑色孢子 | 黑曲霉等霉菌生长表现 | 黑曲霉质控常见反应 |
| 绒毛状、絮状或粉状菌落 | 霉菌生长 | 需结合颜色和显微形态进一步判断 |
| 圆形、湿润、乳白色菌落 | 酵母样菌落 | 可疑酵母需进一步确认 |
| 无菌落生长 | 未见真菌生长或培养条件不适宜 | 应结合阳性质控判断 |
| 细菌样小菌落较多 | 可能有细菌污染或背景菌干扰 | 需结合样品情况和后续确认 |
| 空白平板有菌落 | 培养基或操作污染 | 检测结果无效 |
PDA上的真菌菌落形态受培养时间影响明显。霉菌早期可能仅见白色菌丝，随着培养时间延长才逐渐形成有色孢子，因此过早判读可能导致特征不典型。正式检验应按药典或实验室作业指导书规定的培养条件和判读时间执行。
七、质量控制
下列质控菌株接种待测培养基后，于20 ℃～25 ℃培养3～5 d，观察生长率和特征性反应。
| 质控项目 | 质控菌株及编号 | 培养条件 | 标准值 | 预期结果 |
|---|---|---|---|---|
| 生长率 | 黑曲霉 CMCC(F) 98003 | 20 ℃～25 ℃，3～5 d | 0.5～2.0 | 白色菌丝，黑色孢子 |
| 无菌性 | 未接种培养基 | 同条件培养 | 无菌落生长 | 验证培养基无菌性 |
| 外观检查 | 灭菌后平板 | 室温观察 | 凝胶均匀、颜色正常、无污染 | 验证配制质量 |
| pH检查 | 成品培养基 | 25 ℃ | 5.6±0.2 | 验证酸碱环境是否适宜 |
若黑曲霉生长率偏低，应检查培养温度、培养时间、接种量、菌株活性、pH、灭菌条件和平板干湿程度。若黑曲霉菌丝生长但黑色孢子不明显，可能与培养时间不足、平板含水量或菌株状态有关，应延长至规定时间后再判读。
八、与其他真菌培养基的区别
| 培养基 | 主要特点 | 适用场景 |
|---|---|---|
| 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA） | 马铃薯浸出物和葡萄糖，适合霉菌生长和产孢观察 | 真菌培养、霉菌形态观察、药典真菌检验 |
| 沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA） | 葡萄糖含量较高，常用于霉菌和酵母菌培养 | 真菌分离培养和计数 |
| 改良马丁琼脂培养基 | 药典真菌培养基，营养适中 | 生物制品无菌试验、霉菌和酵母菌检查 |
| 玫瑰红钠琼脂培养基 | 可限制部分霉菌蔓延 | 霉菌和酵母菌计数 |
| DRBC培养基 | 含抑菌和限制扩散成分 | 食品、饲料等样品中霉菌计数 |
PDA的优势在于对霉菌菌丝和产孢形态表现较好，适合观察真菌典型形态；但若样品细菌背景高或霉菌扩散性强，可能需要选择更具抑菌或限制扩散能力的培养基。
九、常见问题与原因分析
| 常见问题 | 可能原因 | 解决建议 |
|---|---|---|
| 黑曲霉生长弱 | 菌株活性差、培养温度不合适、pH异常或灭菌过度 | 复核菌株、pH、培养条件和灭菌流程 |
| 黑曲霉不产黑色孢子 | 培养时间不足、平板过湿或菌株状态影响 | 延长至规定时间，控制平板水分 |
| 菌落扩散严重 | 平板表面水多或霉菌本身扩散性强 | 使用前适度干燥平板，必要时选择限制扩散培养基 |
| 细菌背景多 | PDA选择性不足 | 按方法要求调整样品处理或选用含抑菌剂培养基 |
| 平板偏软或不凝 | 琼脂未充分溶解、称量错误或过度加热影响凝胶 | 复核称量和溶解过程 |
| 平板颜色异常 | 灭菌过度、pH偏差或原料变化 | 控制灭菌条件，复核pH |
| 空白平板污染 | 灭菌不足或倒板污染 | 复核灭菌和无菌操作 |
| 干粉结块 | 吸潮 | 不建议继续用于正式检验 |
十、使用与储存注意事项
本品为实验室微生物检验用培养基，不得用于临床诊断。称量干粉时应避免吸入粉尘，建议佩戴口罩、手套和实验服，在通风良好环境下操作。干粉使用后应立即密封，防止吸潮结块，并于室温避光干燥处保存。
| 注意事项 | 要求 |
|---|---|
| 用途限制 | 不得用于临床检验 |
| 个人防护 | 称量时佩戴口罩和手套，避免吸入粉尘 |
| 干粉保存 | 室温、避光、干燥、密封保存 |
| 配制用水 | 使用蒸馏水或去离子水 |
| 灭菌条件 | 121 ℃高压灭菌15 min |
| 平板保存 | 倒置、避光、密封，并按验证期限使用 |
| 培养条件 | 按药典或实验室作业指导书执行 |
| 结果确认 | 真菌形态观察需结合显微镜或后续鉴定 |
| 废弃物处理 | 接种后培养物和平板需灭菌后处理 |
小结
马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）是用于霉菌和酵母菌检验的经典真菌培养基。马铃薯浸出物有助于霉菌菌丝生长和产孢，葡萄糖提供能源，琼脂形成固体平板，pH 5.6±0.2适合多数真菌生长。黑曲霉在PDA上通常形成白色菌丝并产生黑色孢子，可用于培养基促生长质控。
使用该培养基时应注意三点：第一，配方中“马铃薯（去皮）200 g/L”表示鲜马铃薯浸出物来源或等效浸出量，商品化脱水培养基实际称量按40.0 g/L执行；第二，PDA不是强选择性培养基，细菌背景较高时可能需要配合其他方法；第三，药典相关检验应按2025年版《中国药典》或企业确认的适用标准执行，配制和质控结果应以产品说明书、标签和质检单为准。
