CommaPrep®表面涂抹采样管(LST):大肠菌群相关物表采样与选择性检测应用要点

2026-06-24 15:09:42
逗点生物
简介

CommaPrep®表面涂抹采样管(LST):大肠菌群相关物表采样与选择性检测应用要点

一、产品概况

项目 内容
产品名称 CommaPrep®表面涂抹采样管-月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)
简称 LST表面涂抹采样管
货号 BCCY004
英文名称 Surface Sampling Kit(LST)
采样液/培养液 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
英文对应 Lauryl Sulfate Tryptose Broth / Lauryl Tryptose Broth
产品规格 10 mL×10支/盒
配置 LST肉汤,内含采样拭子
保存条件 2 ℃~25 ℃
有效期 12个月,具体以产品标签为准
适用场景 食品、制药、餐饮、饮料工业等环境表面采样
适用检测方向 更适合大肠菌群、大肠埃希氏菌相关筛查或选择性增菌衔接

二、产品组成、用量、作用及用途

组成部分 用量或规格 主要作用 在检测流程中的用途
LST肉汤 10 mL/支 提供选择性乳糖发酵检测环境 用于表面样品洗脱、大肠菌群相关筛查或增菌衔接
采样拭子 1支/管 涂抹并吸附表面微生物 用于物表、设备、餐饮具、手部等表面采样
人造纤维拭子头 按产品配置 提高样品采集与释放效率 有助于提高表面微生物回收率
采样管 1支/套 容纳LST肉汤和拭子,便于密封转运 采样后保存样品并送检
外包装 10支/盒 便于储存、运输和现场使用 适合批量采样和环境卫生监测

三、LST典型配方、作用及用途

不同标准和厂家配方可能略有差异,具体组成应以产品标签、说明书和质检单为准。以下为常见LST体系的组成及功能说明。

成分 典型用量 主要作用 在LST中的用途
胰蛋白胨/胰酪胨 20.0 g/L 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 支持大肠菌群等目标菌生长
乳糖 5.0 g/L 可发酵糖类 用于大肠菌群乳糖发酵产酸、产气相关检测
氯化钠 5.0 g/L 维持渗透压 提供适宜离子环境
磷酸氢二钾 2.75 g/L 缓冲剂 稳定培养基pH
磷酸二氢钾 2.75 g/L 缓冲剂和磷源 与磷酸氢二钾共同维持缓冲体系
月桂基硫酸钠 0.1 g/L 选择性抑制剂 抑制部分非目标菌,增强大肠菌群检测选择性
典型最终pH 6.8±0.2 维持适宜酸碱环境 保证目标菌生长和乳糖发酵反应稳定

LST的关键不是“通用营养支持”,而是“选择性乳糖发酵检测”。其中,乳糖用于观察大肠菌群的发酵能力,月桂基硫酸钠用于抑制部分非目标菌,磷酸盐维持pH稳定,胰蛋白胨提供基础营养。

四、检验原理

LST的检测原理主要围绕大肠菌群的乳糖发酵和选择性生长展开。大肠菌群在适宜条件下可利用乳糖发酵产酸并产生气体;月桂基硫酸钠可抑制部分革兰阳性菌和非目标微生物,使大肠菌群相关反应更易被观察。传统多管发酵法中,LST常与倒置小管配合观察产气;但本产品为表面涂抹采样管,是否可直接观察产气,应以产品结构和方法验证为准。

作用环节 相关成分 原理
营养支持 胰蛋白胨/胰酪胨 提供目标菌生长所需氮源和肽类
乳糖发酵 乳糖 大肠菌群可发酵乳糖,产生酸和气体
选择性抑制 月桂基硫酸钠 抑制部分非目标菌,减少干扰
pH稳定 磷酸盐体系 缓冲乳糖发酵过程中的酸碱变化
渗透压维持 氯化钠 提供适宜渗透压
后续确认 BGLB、VRBA或其他确认培养基 对疑似结果进行确认或计数

若用于环境表面大肠菌群筛查,LST采样管可作为样品洗脱和选择性增菌衔接工具。若用于标准化计数或确证,应结合相应标准规定的培养基、培养条件、确认试验和结果报告方式执行。

五、产品特点

产品特点 说明 实际价值
即时便捷采样 打开后即可用于现场表面涂抹 适合生产现场和实验室日常抽检
易于运输 采样后可密封转运 降低样品外漏和外源污染风险
高品质人造纤维棉 拭子头均一,样品释放性能较好 有助于提高微生物采集与释放效率
样本释放率高 产品资料显示样本释放率可达95% 有利于提高回收效率
拭子头面积较大 可满足多角度表面涂抹 提高采样覆盖率
LST体系 含乳糖和月桂基硫酸钠 更适合大肠菌群相关选择性检测衔接

“样本释放率达95%”可作为产品性能特点表述,但用于方法学文件时,建议结合验证数据说明验证菌株、接种量、表面材质、洗脱方式和评价标准。对于LST采样管,还应额外关注其选择性是否会影响非目标项目结果。

六、适用场景

应用场景 采样对象 适用检测方向
食品生产环境 操作台、传送带、工器具、设备表面 大肠菌群或卫生指示菌筛查
饮料厂环境 灌装线、瓶盖接触面、管路外表面 大肠菌群污染风险监测
餐饮场所 案板、刀具、餐台、餐饮具 餐饮具或食品接触面卫生评价
制药环境 设备外表面、人员手部、操作区表面 环境微生物风险监测中的指定项目
公共卫生场景 高频接触表面 大肠菌群相关污染风险筛查

若检测目标是细菌总数,建议使用0.85%生理盐水、PBS或经验证的采样液;若检测目标是李斯特菌或金黄色葡萄球菌,应按对应标准使用合适的增菌液、选择性分离培养基和确认流程,不宜仅用LST采样管替代。

七、基本采样流程

步骤 操作要点
1. 准备 准备LST采样管、无菌模板、标签、记录表和个人防护用品
2. 标识 标注样品编号、采样点、采样面积、时间和采样人
3. 开管 无菌打开采样管,避免污染管口和拭子头
4. 取拭子 握持拭子杆或手柄,不要触碰拭子头
5. 润湿 使拭子头充分接触LST肉汤
6. 涂抹 按规定面积横向、纵向和旋转涂抹表面
7. 回收 将拭子放回采样管中并旋紧管盖
8. 洗脱 充分振荡、挤压或涡旋,使微生物释放到LST中
9. 培养或送检 按检测方法要求尽快送检或进入后续培养流程
10. 确认 对疑似结果转接BGLB、VRBA或其他确认培养基

原资料中“采样时应拿住头部,不要触碰到拭子”建议修正为“采样时应握持拭子杆或手柄,避免触碰拭子头、管口和采样液”。采样全过程应保持无菌操作,防止外源污染导致假阳性。

八、后续检测与结果判断

LST采样管获得的是含样品的LST肉汤体系,不是最终结果。后续应按检测目的进行培养、转接、确认和报告。

检测方向 后续操作思路 报告要点
大肠菌群筛查 按规定条件培养后观察疑似反应,再转接确认培养基 需结合产气、BGLB或VRBA等确认结果
大肠埃希氏菌相关检测 可作为前端选择性增菌衔接,但需后续选择性或确证步骤 不能仅凭LST生长判断
环境卫生监测 用于大肠菌群污染风险提示 建议与企业内控限值和趋势数据结合
菌落总数 不建议使用LST作为采样液 LST选择性会影响总菌回收
金黄色葡萄球菌、李斯特菌 不建议使用LST作为专用采样液 应选择对应标准方法和培养基

若产品结构中未配倒置小管,不能简单沿用传统LST多管发酵法中“产气阳性”的判读方式。发布资料中应避免写成“采样管直接产气即可判定大肠菌群阳性”,而应强调需按方法验证和后续确认流程执行。

九、LST采样管与PBS、NS、BPW、含中和剂采样管的区别

项目 LST采样管 PBS采样管 0.85% NS采样管 BPW采样管 含中和剂采样管
主要功能 大肠菌群相关选择性检测衔接 缓冲、洗脱、转运 渗透压维持、洗脱、转运 缓冲、温和营养和恢复 洗脱、转运并中和部分消毒剂残留
是否有选择性 取决于配方
主要选择性成分 月桂基硫酸钠 中和剂不是选择剂
主要糖类 乳糖 无或按配方 无或按配方
适用目标 大肠菌群相关筛查 一般物表采样 一般短时间采样 受损菌恢复衔接 消毒后表面采样
是否适合菌落总数 不推荐 可根据方法使用 可根据方法使用 可根据方法使用 可根据方法使用
是否适合消毒后表面 需谨慎 需谨慎 需谨慎 需谨慎 更适合

LST采样管的优势是可直接衔接大肠菌群相关选择性检测;局限是会抑制部分非目标菌,因此不宜作为多项目通用采样管。若同一采样点需要同时检测菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌和李斯特菌,建议根据项目分别选择采样液或进行方法确认。

十、质量控制与方法确认建议

LST采样管的质量控制除关注常规无菌性、装量和密封性外,还应关注对目标菌的促生长能力、对非目标菌的选择性,以及与后续确认培养基的衔接效果。

质控或确认项目 目的 建议关注点
外观检查 确认包装和LST肉汤状态 无破损、无渗漏、无浑浊、无异物
装量检查 确认采样液体积稳定 10 mL/支符合标签要求
无菌性检查 排除产品自身污染 空白采样管应无菌生长
pH检查 确认LST体系稳定 应符合产品说明或质检单要求
促生长验证 确认大肠菌群目标菌可恢复生长 可选用大肠埃希氏菌等目标菌
选择性验证 确认对部分非目标菌有抑制能力 可选用革兰阳性菌等受抑制菌
回收率验证 确认拭子采集和洗脱效率 结合目标菌和表面材质验证
后续确认验证 确认与BGLB、VRBA等流程衔接 疑似阳性应能进入确认流程
消毒剂干扰评估 判断是否需含中和剂产品 消毒后表面应重点评估

资料中提到“样本释放率达95%”,可作为产品特点描述,但用于质量文件时,建议说明验证菌株、接种量、表面材质、洗脱方式和评价标准。对于LST采样管,还应验证月桂基硫酸钠对非目标检测项目的影响。

十一、采样效果的关键影响因素

影响因素 可能影响 控制建议
拭子湿润程度 影响干燥表面微生物采集效率 采样前确保拭子头充分湿润
涂抹力度 力度过轻漏采,过重可能损伤拭子 保持均匀、适度压力
涂抹方向 单一方向覆盖不充分 横向、纵向和旋转涂抹结合
采样面积 面积不一致影响结果换算 使用无菌模板或明确采样范围
表面材质 粗糙、多孔表面回收率较低 对不同材质表面进行方法确认
洗脱方式 洗脱不足导致结果偏低 采样后充分振荡、挤压或涡旋
转运时间 时间过长可能改变菌群结构 采样后尽快检测
消毒剂残留 可能继续抑制目标菌 必要时选择含中和剂采样液
方法选择 LST选择性影响非目标菌 按检测项目选择合适采样液

十二、常见问题与原因分析

常见问题 可能原因 解决建议
大肠菌群检出率偏低 采样不足、洗脱不足、目标菌受损严重或消毒剂残留 规范采样和洗脱,必要时验证中和体系
非目标菌也生长 LST选择性有限或污染负荷高 结合后续确认培养基判断
菌落总数结果偏低 LST抑制了部分普通细菌 菌落总数检测不建议使用LST采样管
金黄色葡萄球菌或李斯特菌检出异常 LST不是相应目标菌专用增菌体系 改用对应标准方法和培养基
样液浑浊 样品污染负荷高、带入杂质或已有生长 结合空白对照和后续确认判断
空白对照阳性 产品污染或操作污染 复核产品批次和无菌操作
运输中泄漏 管盖未旋紧或包装受损 采样后确认密封完整
数据波动大 采样面积、力度、方向或洗脱方式不一致 统一SOP并加强人员培训

十三、储存、转运与注意事项

本品为微生物表面采样和大肠菌群相关检测衔接用品,不得用于临床诊断。使用前应检查包装完整性、有效期、采样液体积和外观。若发现包装破损、采样液明显减少、浑浊、变色或有异物,不建议继续使用。

注意事项 要求
用途限制 不得用于临床诊断
储存条件 2 ℃~25 ℃保存
有效期 12个月,具体以产品标签为准
包装检查 使用前确认包装完整、无渗漏
无菌操作 避免污染拭子头、管口和LST肉汤
采样后处理 采样后应尽快送检或进入培养流程
延迟检测 不能及时检测时,应按方法验证的温度和时限保存
冷藏转运 如需冷藏,应按实验室SOP或标准方法要求执行
冻融控制 避免反复冻融
样品标识 标注采样点、面积、时间和采样人
结果确认 疑似大肠菌群结果需按方法确认
废弃物处理 使用后按微生物实验室废弃物要求处理

原资料中“标本采集后应当在2个工作日内运送至对应的实验室;如未能在48 h内送至实验室,应置于2 ℃~8 ℃或更低温度,并保证1周内送达”的表述不建议作为常规食品、环境表面细菌检测的通用要求。更严谨的写法是:采样后应尽快送检;如不能及时检测,应按相应标准方法、实验室SOP或经验证的保存条件执行,并避免反复冻融。

小结

CommaPrep®表面涂抹采样管(LST)是一款以月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤为采样液/培养液的表面涂抹采样产品。LST含胰蛋白胨、乳糖、氯化钠、磷酸盐缓冲剂和月桂基硫酸钠,适合大肠菌群相关选择性检测衔接。其人造纤维拭子有助于表面微生物采集和释放,可用于食品、制药、餐饮、饮料工业等环境表面的大肠菌群污染风险监测。

使用该产品时应注意三点:第一,LST采样管不是通用采样液,更适合大肠菌群相关筛查,不推荐用于菌落总数、金黄色葡萄球菌或李斯特菌等项目的通用采样;第二,若采样表面存在消毒剂残留,应评估是否需要含中和剂采样液;第三,表面涂抹采样结果受采样面积、涂抹方式、表面材质、转运时间和后续确认流程影响,应通过统一SOP和方法确认提高结果可靠性。