CommaPrep®表面涂抹采样管(LST):大肠菌群相关物表采样与选择性检测应用要点
- 2026-06-24 15:09:42
- 逗点生物
CommaPrep®表面涂抹采样管(LST):大肠菌群相关物表采样与选择性检测应用要点
一、产品概况
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | CommaPrep®表面涂抹采样管-月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) |
| 简称 | LST表面涂抹采样管 |
| 货号 | BCCY004 |
| 英文名称 | Surface Sampling Kit(LST) |
| 采样液/培养液 | 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤 |
| 英文对应 | Lauryl Sulfate Tryptose Broth / Lauryl Tryptose Broth |
| 产品规格 | 10 mL×10支/盒 |
| 配置 | LST肉汤,内含采样拭子 |
| 保存条件 | 2 ℃~25 ℃ |
| 有效期 | 12个月,具体以产品标签为准 |
| 适用场景 | 食品、制药、餐饮、饮料工业等环境表面采样 |
| 适用检测方向 | 更适合大肠菌群、大肠埃希氏菌相关筛查或选择性增菌衔接 |
二、产品组成、用量、作用及用途
| 组成部分 | 用量或规格 | 主要作用 | 在检测流程中的用途 |
|---|---|---|---|
| LST肉汤 | 10 mL/支 | 提供选择性乳糖发酵检测环境 | 用于表面样品洗脱、大肠菌群相关筛查或增菌衔接 |
| 采样拭子 | 1支/管 | 涂抹并吸附表面微生物 | 用于物表、设备、餐饮具、手部等表面采样 |
| 人造纤维拭子头 | 按产品配置 | 提高样品采集与释放效率 | 有助于提高表面微生物回收率 |
| 采样管 | 1支/套 | 容纳LST肉汤和拭子,便于密封转运 | 采样后保存样品并送检 |
| 外包装 | 10支/盒 | 便于储存、运输和现场使用 | 适合批量采样和环境卫生监测 |
三、LST典型配方、作用及用途
不同标准和厂家配方可能略有差异,具体组成应以产品标签、说明书和质检单为准。以下为常见LST体系的组成及功能说明。
| 成分 | 典型用量 | 主要作用 | 在LST中的用途 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨/胰酪胨 | 20.0 g/L | 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 | 支持大肠菌群等目标菌生长 |
| 乳糖 | 5.0 g/L | 可发酵糖类 | 用于大肠菌群乳糖发酵产酸、产气相关检测 |
| 氯化钠 | 5.0 g/L | 维持渗透压 | 提供适宜离子环境 |
| 磷酸氢二钾 | 2.75 g/L | 缓冲剂 | 稳定培养基pH |
| 磷酸二氢钾 | 2.75 g/L | 缓冲剂和磷源 | 与磷酸氢二钾共同维持缓冲体系 |
| 月桂基硫酸钠 | 0.1 g/L | 选择性抑制剂 | 抑制部分非目标菌,增强大肠菌群检测选择性 |
| 典型最终pH | 6.8±0.2 | 维持适宜酸碱环境 | 保证目标菌生长和乳糖发酵反应稳定 |
LST的关键不是“通用营养支持”,而是“选择性乳糖发酵检测”。其中,乳糖用于观察大肠菌群的发酵能力,月桂基硫酸钠用于抑制部分非目标菌,磷酸盐维持pH稳定,胰蛋白胨提供基础营养。
四、检验原理
LST的检测原理主要围绕大肠菌群的乳糖发酵和选择性生长展开。大肠菌群在适宜条件下可利用乳糖发酵产酸并产生气体;月桂基硫酸钠可抑制部分革兰阳性菌和非目标微生物,使大肠菌群相关反应更易被观察。传统多管发酵法中,LST常与倒置小管配合观察产气;但本产品为表面涂抹采样管,是否可直接观察产气,应以产品结构和方法验证为准。
| 作用环节 | 相关成分 | 原理 |
|---|---|---|
| 营养支持 | 胰蛋白胨/胰酪胨 | 提供目标菌生长所需氮源和肽类 |
| 乳糖发酵 | 乳糖 | 大肠菌群可发酵乳糖,产生酸和气体 |
| 选择性抑制 | 月桂基硫酸钠 | 抑制部分非目标菌,减少干扰 |
| pH稳定 | 磷酸盐体系 | 缓冲乳糖发酵过程中的酸碱变化 |
| 渗透压维持 | 氯化钠 | 提供适宜渗透压 |
| 后续确认 | BGLB、VRBA或其他确认培养基 | 对疑似结果进行确认或计数 |
若用于环境表面大肠菌群筛查,LST采样管可作为样品洗脱和选择性增菌衔接工具。若用于标准化计数或确证,应结合相应标准规定的培养基、培养条件、确认试验和结果报告方式执行。
五、产品特点
| 产品特点 | 说明 | 实际价值 |
|---|---|---|
| 即时便捷采样 | 打开后即可用于现场表面涂抹 | 适合生产现场和实验室日常抽检 |
| 易于运输 | 采样后可密封转运 | 降低样品外漏和外源污染风险 |
| 高品质人造纤维棉 | 拭子头均一,样品释放性能较好 | 有助于提高微生物采集与释放效率 |
| 样本释放率高 | 产品资料显示样本释放率可达95% | 有利于提高回收效率 |
| 拭子头面积较大 | 可满足多角度表面涂抹 | 提高采样覆盖率 |
| LST体系 | 含乳糖和月桂基硫酸钠 | 更适合大肠菌群相关选择性检测衔接 |
“样本释放率达95%”可作为产品性能特点表述,但用于方法学文件时,建议结合验证数据说明验证菌株、接种量、表面材质、洗脱方式和评价标准。对于LST采样管,还应额外关注其选择性是否会影响非目标项目结果。
六、适用场景
| 应用场景 | 采样对象 | 适用检测方向 |
|---|---|---|
| 食品生产环境 | 操作台、传送带、工器具、设备表面 | 大肠菌群或卫生指示菌筛查 |
| 饮料厂环境 | 灌装线、瓶盖接触面、管路外表面 | 大肠菌群污染风险监测 |
| 餐饮场所 | 案板、刀具、餐台、餐饮具 | 餐饮具或食品接触面卫生评价 |
| 制药环境 | 设备外表面、人员手部、操作区表面 | 环境微生物风险监测中的指定项目 |
| 公共卫生场景 | 高频接触表面 | 大肠菌群相关污染风险筛查 |
若检测目标是细菌总数,建议使用0.85%生理盐水、PBS或经验证的采样液;若检测目标是李斯特菌或金黄色葡萄球菌,应按对应标准使用合适的增菌液、选择性分离培养基和确认流程,不宜仅用LST采样管替代。
七、基本采样流程
| 步骤 | 操作要点 |
|---|---|
| 1. 准备 | 准备LST采样管、无菌模板、标签、记录表和个人防护用品 |
| 2. 标识 | 标注样品编号、采样点、采样面积、时间和采样人 |
| 3. 开管 | 无菌打开采样管,避免污染管口和拭子头 |
| 4. 取拭子 | 握持拭子杆或手柄,不要触碰拭子头 |
| 5. 润湿 | 使拭子头充分接触LST肉汤 |
| 6. 涂抹 | 按规定面积横向、纵向和旋转涂抹表面 |
| 7. 回收 | 将拭子放回采样管中并旋紧管盖 |
| 8. 洗脱 | 充分振荡、挤压或涡旋,使微生物释放到LST中 |
| 9. 培养或送检 | 按检测方法要求尽快送检或进入后续培养流程 |
| 10. 确认 | 对疑似结果转接BGLB、VRBA或其他确认培养基 |
原资料中“采样时应拿住头部,不要触碰到拭子”建议修正为“采样时应握持拭子杆或手柄,避免触碰拭子头、管口和采样液”。采样全过程应保持无菌操作,防止外源污染导致假阳性。
八、后续检测与结果判断
LST采样管获得的是含样品的LST肉汤体系,不是最终结果。后续应按检测目的进行培养、转接、确认和报告。
| 检测方向 | 后续操作思路 | 报告要点 |
|---|---|---|
| 大肠菌群筛查 | 按规定条件培养后观察疑似反应,再转接确认培养基 | 需结合产气、BGLB或VRBA等确认结果 |
| 大肠埃希氏菌相关检测 | 可作为前端选择性增菌衔接,但需后续选择性或确证步骤 | 不能仅凭LST生长判断 |
| 环境卫生监测 | 用于大肠菌群污染风险提示 | 建议与企业内控限值和趋势数据结合 |
| 菌落总数 | 不建议使用LST作为采样液 | LST选择性会影响总菌回收 |
| 金黄色葡萄球菌、李斯特菌 | 不建议使用LST作为专用采样液 | 应选择对应标准方法和培养基 |
若产品结构中未配倒置小管,不能简单沿用传统LST多管发酵法中“产气阳性”的判读方式。发布资料中应避免写成“采样管直接产气即可判定大肠菌群阳性”,而应强调需按方法验证和后续确认流程执行。
九、LST采样管与PBS、NS、BPW、含中和剂采样管的区别
| 项目 | LST采样管 | PBS采样管 | 0.85% NS采样管 | BPW采样管 | 含中和剂采样管 |
|---|---|---|---|---|---|
| 主要功能 | 大肠菌群相关选择性检测衔接 | 缓冲、洗脱、转运 | 渗透压维持、洗脱、转运 | 缓冲、温和营养和恢复 | 洗脱、转运并中和部分消毒剂残留 |
| 是否有选择性 | 有 | 无 | 无 | 无 | 取决于配方 |
| 主要选择性成分 | 月桂基硫酸钠 | 无 | 无 | 无 | 中和剂不是选择剂 |
| 主要糖类 | 乳糖 | 无 | 无 | 无或按配方 | 无或按配方 |
| 适用目标 | 大肠菌群相关筛查 | 一般物表采样 | 一般短时间采样 | 受损菌恢复衔接 | 消毒后表面采样 |
| 是否适合菌落总数 | 不推荐 | 可根据方法使用 | 可根据方法使用 | 可根据方法使用 | 可根据方法使用 |
| 是否适合消毒后表面 | 需谨慎 | 需谨慎 | 需谨慎 | 需谨慎 | 更适合 |
LST采样管的优势是可直接衔接大肠菌群相关选择性检测;局限是会抑制部分非目标菌,因此不宜作为多项目通用采样管。若同一采样点需要同时检测菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌和李斯特菌,建议根据项目分别选择采样液或进行方法确认。
十、质量控制与方法确认建议
LST采样管的质量控制除关注常规无菌性、装量和密封性外,还应关注对目标菌的促生长能力、对非目标菌的选择性,以及与后续确认培养基的衔接效果。
| 质控或确认项目 | 目的 | 建议关注点 |
|---|---|---|
| 外观检查 | 确认包装和LST肉汤状态 | 无破损、无渗漏、无浑浊、无异物 |
| 装量检查 | 确认采样液体积稳定 | 10 mL/支符合标签要求 |
| 无菌性检查 | 排除产品自身污染 | 空白采样管应无菌生长 |
| pH检查 | 确认LST体系稳定 | 应符合产品说明或质检单要求 |
| 促生长验证 | 确认大肠菌群目标菌可恢复生长 | 可选用大肠埃希氏菌等目标菌 |
| 选择性验证 | 确认对部分非目标菌有抑制能力 | 可选用革兰阳性菌等受抑制菌 |
| 回收率验证 | 确认拭子采集和洗脱效率 | 结合目标菌和表面材质验证 |
| 后续确认验证 | 确认与BGLB、VRBA等流程衔接 | 疑似阳性应能进入确认流程 |
| 消毒剂干扰评估 | 判断是否需含中和剂产品 | 消毒后表面应重点评估 |
资料中提到“样本释放率达95%”,可作为产品特点描述,但用于质量文件时,建议说明验证菌株、接种量、表面材质、洗脱方式和评价标准。对于LST采样管,还应验证月桂基硫酸钠对非目标检测项目的影响。
十一、采样效果的关键影响因素
| 影响因素 | 可能影响 | 控制建议 |
|---|---|---|
| 拭子湿润程度 | 影响干燥表面微生物采集效率 | 采样前确保拭子头充分湿润 |
| 涂抹力度 | 力度过轻漏采,过重可能损伤拭子 | 保持均匀、适度压力 |
| 涂抹方向 | 单一方向覆盖不充分 | 横向、纵向和旋转涂抹结合 |
| 采样面积 | 面积不一致影响结果换算 | 使用无菌模板或明确采样范围 |
| 表面材质 | 粗糙、多孔表面回收率较低 | 对不同材质表面进行方法确认 |
| 洗脱方式 | 洗脱不足导致结果偏低 | 采样后充分振荡、挤压或涡旋 |
| 转运时间 | 时间过长可能改变菌群结构 | 采样后尽快检测 |
| 消毒剂残留 | 可能继续抑制目标菌 | 必要时选择含中和剂采样液 |
| 方法选择 | LST选择性影响非目标菌 | 按检测项目选择合适采样液 |
十二、常见问题与原因分析
| 常见问题 | 可能原因 | 解决建议 |
|---|---|---|
| 大肠菌群检出率偏低 | 采样不足、洗脱不足、目标菌受损严重或消毒剂残留 | 规范采样和洗脱,必要时验证中和体系 |
| 非目标菌也生长 | LST选择性有限或污染负荷高 | 结合后续确认培养基判断 |
| 菌落总数结果偏低 | LST抑制了部分普通细菌 | 菌落总数检测不建议使用LST采样管 |
| 金黄色葡萄球菌或李斯特菌检出异常 | LST不是相应目标菌专用增菌体系 | 改用对应标准方法和培养基 |
| 样液浑浊 | 样品污染负荷高、带入杂质或已有生长 | 结合空白对照和后续确认判断 |
| 空白对照阳性 | 产品污染或操作污染 | 复核产品批次和无菌操作 |
| 运输中泄漏 | 管盖未旋紧或包装受损 | 采样后确认密封完整 |
| 数据波动大 | 采样面积、力度、方向或洗脱方式不一致 | 统一SOP并加强人员培训 |
十三、储存、转运与注意事项
本品为微生物表面采样和大肠菌群相关检测衔接用品,不得用于临床诊断。使用前应检查包装完整性、有效期、采样液体积和外观。若发现包装破损、采样液明显减少、浑浊、变色或有异物,不建议继续使用。
| 注意事项 | 要求 |
|---|---|
| 用途限制 | 不得用于临床诊断 |
| 储存条件 | 2 ℃~25 ℃保存 |
| 有效期 | 12个月,具体以产品标签为准 |
| 包装检查 | 使用前确认包装完整、无渗漏 |
| 无菌操作 | 避免污染拭子头、管口和LST肉汤 |
| 采样后处理 | 采样后应尽快送检或进入培养流程 |
| 延迟检测 | 不能及时检测时,应按方法验证的温度和时限保存 |
| 冷藏转运 | 如需冷藏,应按实验室SOP或标准方法要求执行 |
| 冻融控制 | 避免反复冻融 |
| 样品标识 | 标注采样点、面积、时间和采样人 |
| 结果确认 | 疑似大肠菌群结果需按方法确认 |
| 废弃物处理 | 使用后按微生物实验室废弃物要求处理 |
原资料中“标本采集后应当在2个工作日内运送至对应的实验室;如未能在48 h内送至实验室,应置于2 ℃~8 ℃或更低温度,并保证1周内送达”的表述不建议作为常规食品、环境表面细菌检测的通用要求。更严谨的写法是:采样后应尽快送检;如不能及时检测,应按相应标准方法、实验室SOP或经验证的保存条件执行,并避免反复冻融。
小结
CommaPrep®表面涂抹采样管(LST)是一款以月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤为采样液/培养液的表面涂抹采样产品。LST含胰蛋白胨、乳糖、氯化钠、磷酸盐缓冲剂和月桂基硫酸钠,适合大肠菌群相关选择性检测衔接。其人造纤维拭子有助于表面微生物采集和释放,可用于食品、制药、餐饮、饮料工业等环境表面的大肠菌群污染风险监测。
使用该产品时应注意三点:第一,LST采样管不是通用采样液,更适合大肠菌群相关筛查,不推荐用于菌落总数、金黄色葡萄球菌或李斯特菌等项目的通用采样;第二,若采样表面存在消毒剂残留,应评估是否需要含中和剂采样液;第三,表面涂抹采样结果受采样面积、涂抹方式、表面材质、转运时间和后续确认流程影响,应通过统一SOP和方法确认提高结果可靠性。




