实验室使用商品化培养基和试剂的质量控制方法解读

商品化培养基和试剂广泛用于食品微生物检验，包括即用型平板、试管装培养基、瓶装培养基、测试片、脱水培养基、选择性添加剂、显色试剂和染色试剂等。很多实验室容易把“商品化”理解成“厂家已经检验，实验室可以直接使用”，这种理解并不准确。商品化培养基虽然由生产企业完成配方、生产和出厂检验，但实验室仍应进行交货验收、储存管理、文件核查和必要的性能确认。

GB 4789.28—2013 曾将“生产商及实验室自制培养基和试剂”和“实验室使用商品化培养基和试剂”分成两套测试方法，其中商品化培养基多采用半定量或定性评价。现行 GB 4789.28—2024 已对这一逻辑进行调整，更强调商品化培养基的文件可追溯、同批次质控报告、实验室验收程序和必要时的性能复核。也就是说，实验室不应机械重复旧版6.2条款，而应按现行标准建立更合理的验收与质量控制体系。

一、商品化培养基的质量控制重点

实验室使用商品化培养基和试剂时，首先要确认“产品是否可以接收”，其次才是“是否需要重复性能测试”。交货验收不是简单看外包装是否完整，还应核查批号、有效期、储存条件、产品合格证明、质控报告和必要的安全信息。对于商品化脱水培养基，还要检查容器密闭性、粉末或颗粒的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化；如发现受潮、结块、颜色明显改变或物理性状异常，不应继续使用。

商品化即用型培养基的验收重点是外观、包装、储存和批次质控文件；商品化脱水培养基的重点还包括称量、溶解、pH、灭菌、分装和添加剂加入条件。实验室用脱水培养基重新配制平板或试管时，实际上已经参与了制备过程，因此不能只依赖厂家报告，还应记录配制过程并按需要进行性能确认。

二、哪些情况下需要重复性能测试

现行标准允许实验室根据供应商同批次检验报告和自身需求决定是否重复测试，但这不等于可以完全不测。对于高风险培养基、关键检验项目、新供应商、新批号异常、运输储存异常、客户投诉、能力验证异常或实验结果可疑时，应进行必要的性能复核。

实验室可以把商品化培养基分成低风险和高风险两类管理。普通非选择性培养基、基础稀释液、常规营养培养基可主要依赖供应商报告和外观验收；选择性强、添加剂复杂、显色反应明显、用于关键病原菌检验的培养基，则应设置更严格的验收或周期性复核。

三、商品化固体培养基的性能评价

旧版中，商品化非选择性分离和计数固体培养基常采用目标菌半定量划线法，通过生长指数G评价培养基可接受性。该方法操作简单，但人为影响较大，受接种环取液量、划线压力、培养物浓度和操作习惯影响明显。现行标准更强调按培养基类型采用定量、半定量或定性方法，并在定量评价中使用参比培养基作为对照。

对于非选择性分离和计数固体培养基，核心是目标菌生长率。细菌和酵母菌每平板接种量一般为50 CFU～250 CFU，霉菌为30 CFU～150 CFU。接种待测平板和参比平板后，按规定条件培养并计数，计算生长率PR。非选择性分离和计数固体培养基上目标菌的生长率应不小于0.7。

选择性分离和计数固体培养基的评价更复杂，既要看目标菌能否形成典型菌落，也要看非目标菌是否受到抑制。选择性分离固体培养基上目标菌生长率一般不小于0.5，最低不小于0.1；选择性计数固体培养基上目标菌生长率一般不小于0.7，具体要求应结合对应培养基的质量控制标准执行。非目标菌的选择性测试可采用1 μL接种环划线法，按生长指数G评价抑制效果。

对于商品化平板，实验室还应关注平板表面状态。表面过湿会造成菌落扩散、混杂或计数困难；表面过干会降低回收率或造成小菌落。使用前应按说明书平衡至室温，必要时适度干燥，但不应过度干燥。

四、商品化液体培养基的性能评价

液体培养基的性能评价通常围绕浊度、产气、后续平板计数或典型反应展开。非选择性增菌培养基重点看目标菌能否低水平接种后明显增殖；选择性增菌培养基则要同时评价目标菌生长促进能力和非目标菌抑制能力；选择性液体计数培养基还需观察产气情况。

目测浊度常用0～2级表示：0为无浑浊，1为轻微浑浊，2为明显浑浊。需要注意的是，部分微生物生长后可能形成沉淀或细胞团，聚集在试管底部，此时应轻轻振荡混匀后再判断，不应直接把沉淀误判为不生长。

对于选择性增菌培养基，仅观察浑浊并不可靠，因为浑浊可能来自目标菌，也可能来自非目标菌突破抑制或培养基本身沉淀。因此，应通过培养后再接种选择性平板或非选择性平板来确认目标菌增殖和非目标菌抑制情况。

五、悬浮培养基和运输培养基的验收重点

悬浮培养基和运输培养基的目标不是让微生物快速繁殖，而是在样品处理或运输过程中保持菌数相对稳定。旧版商品化培养基验收中曾采用定性划线方式判断接种前后目标菌生长是否良好；现行标准中，悬浮培养基和运输培养基更强调定量评价，即比较接种后立即计数和规定条件放置后的菌落数变化。

如果悬浮液导致菌数明显下降，可能造成样品回收率偏低；如果运输培养基让菌数明显增加，则可能改变样品原始污染水平，影响定量结果真实性。因此，这类培养基不能用“长得越多越好”来评价，而应看菌数是否稳定。

六、鉴定培养基和实验试剂的质量控制

鉴定培养基和实验试剂的质量控制重点是反应是否正确。液体鉴定培养基通常观察颜色变化、产气、浊度或指示剂反应；半固体培养基常用于动力、扩散生长或深层生化反应；斜面、高层斜面和平板鉴定培养基则通过斜面颜色、底层反应、沉淀、黑色中心、透明圈或菌落形态进行判断。

商品化试剂不应只看有效期。染色剂可能出现沉淀，指示剂可能褪色或失灵，抗生素类添加剂可能因储存不当导致效价下降，显色底物可能因光照或温度异常而失效。因此，关键试剂应结合阳性和阴性质控进行确认。

七、从旧版6.2到现行要求，实验室应怎样调整SOP

旧版GB 4789.28—2013中，商品化培养基和试剂的实验室验收更偏向简化的半定量或定性测试，例如目标菌半定量划线、浊度观察、接种前后划线比较等。这些方法操作方便，但受人为因素影响较大，尤其是接种环取液量、划线力度、菌悬液浓度和判读经验都会影响结果。

现行管理思路应调整为三层：第一层是文件和交货验收，包括合格证明、批号、包装、有效期、储存条件和质控报告；第二层是使用前检查，包括外观、脱水、沉淀、污染、pH或必要阴性对照；第三层是性能复核，根据培养基风险等级选择定量、半定量或定性方法。对于关键培养基，应优先使用现行标准第6章规定的方法，而不是继续沿用旧版商品化培养基的简化划线法。

实验室可在SOP中建立如下流程：接收产品后记录批号和日期，核查文件和包装，按说明书储存；使用前检查外观和有效期；根据产品风险等级决定是否进行性能测试；测试时选择附录F规定的测试菌株、培养条件和判定标准；结果符合要求后放行使用；异常时隔离产品并开展原因调查。

八、常见问题与排查方向

商品化培养基验收或使用中常见问题包括：平板失水、表面水汽过多、颜色异常、沉淀、目标菌生长率偏低、非目标菌抑制不住、典型菌落不典型、液体培养基浊度弱或产气不足。出现这些问题时，应同时检查产品批号、运输温度、储存条件、有效期、使用前平衡时间、平板干燥程度、添加剂状态、测试菌株活力和接种量。

若同批次多个实验室均反馈异常，应优先考虑产品批次问题；若仅单个实验室异常，则应重点排查储存、复溶、灭菌、添加剂加入、接种量、培养条件和判读时间。对商品化脱水培养基，开封后受潮、结块或反复暴露于空气，常会造成pH变化、溶解不良、沉淀增加或选择性下降。

九、总结

实验室使用商品化培养基和试剂，并不意味着可以跳过质量控制。合理的做法是：文件验收看批次和报告，外观检查看包装和状态，储存管理看温度和有效期，性能复核看目标菌、非目标菌和特异性反应。对低风险产品，可主要依靠供应商同批次报告和实验室验收记录；对高风险或关键培养基，应按现行标准要求进行必要的性能确认。

培养基质量控制的最终目的不是完成一张表格，而是确认培养基在实际检验条件下能够完成其功能：该支持目标菌生长的要能长，该抑制非目标菌的要能抑制，该保持菌数稳定的不能让菌明显增减，该产生鉴别反应的必须反应清楚。只有这样，商品化培养基才能真正支撑食品微生物检验结果的准确性和可追溯性。