LB琼脂培养基(pH 7.5):适用于高pH分子生物学实验的基础培养基

2026-06-25 14:13:36
逗点生物
简介

LB琼脂培养基(pH 7.5):适用于高pH分子生物学实验的基础培养基

产品信息

项目 内容
产品名称 LB琼脂培养基(pH 7.5)
英文名称 LB Agar Medium, pH 7.5
产品货号 GF1167
包装规格 250 g/瓶
配制比例 40.0 g/L
灭菌条件 121℃高压灭菌 20 min
产品用途 用于分子生物学中需要较高 pH 条件的试验;适用于工程菌株分离纯化、转化子筛选、单菌落挑取和菌株短期保存
参考来源 《分子克隆实验指南》相关配方

配方组成与作用

成分 用量(g/L) 主要作用 对培养基用途的贡献
蛋白胨 10.0 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 支持大肠杆菌及常用工程菌株生长
酵母提取物 5.0 提供维生素、核苷酸、矿物质和生长因子 促进菌体增殖,提高菌落形成能力
氯化钠 10.0 维持渗透压和离子强度 形成常见高盐 LB 体系,适合常规分子克隆实验
琼脂 15.0 培养基凝固剂 形成固体培养表面,便于单菌落分离和筛选
最终 pH(25℃) 7.5±0.2 维持偏中性至微碱性培养环境 适用于需要较高 pH 条件的实验体系

pH 7.5 LB琼脂的应用特点

LB琼脂培养基本身不是选择性培养基,主要作用是为细菌提供营养和固体生长表面。在分子克隆实验中,常在灭菌冷却后的 LB琼脂中无菌加入氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素等抗生素,用于筛选携带相应抗性标记的转化子。需要注意的是,抗生素通常不应随培养基一起高压灭菌,应待培养基冷却至约 50~55℃后再加入,以减少热降解。

pH 7.5 的设置适合对培养环境 pH 有特殊要求的实验。例如某些载体筛选、菌株培养或酶活相关实验可能要求培养基处于略偏碱性条件。实际使用时,应按照实验方案选择 pH 7.0、pH 7.5 或其他特定 pH 的 LB 培养基,避免不同 pH 条件混用导致实验结果波动。

使用方法

称取 LB琼脂培养基(pH 7.5)干粉 40.0 g,加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中,加热搅拌至完全溶解后定容至 1 L。分装后于 121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后,将培养基冷却至约 50~55℃,如需加入抗生素或其他热敏性添加剂,应在无菌条件下加入并充分混匀,然后倒入无菌培养皿中制成平板。

平板凝固后可用于划线分离、涂布培养、转化子筛选或菌株短期保存。常规培养条件为 35~37℃培养 12~18 h,具体培养时间应根据菌株类型、接种量、抗生素类型和实验目的调整。

质量控制

产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和大肠杆菌 DH5α 作为质控菌株,在 36±1℃培养 12~18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长,生产率比值 PR 应不低于 0.7。

质控菌株 培养条件 质控评定指标
大肠埃希氏菌 ATCC 25922 36±1℃,12~18 h PR≥0.7
大肠杆菌 DH5α 36±1℃,12~18 h PR≥0.7

储存条件与注意事项

本品应置于室温、避光、干燥处保存,使用后立即旋紧瓶盖,防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况,不建议继续使用,以免影响培养基溶解性、pH 和菌落生长表现。

本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途,不得用于临床诊断。实验结束后的带菌平板、培养物、吸头、接种环等污染物,应按实验室生物安全要求处理,通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

小结

LB琼脂培养基(pH 7.5)是一种常用的分子生物学基础固体培养基,配方由蛋白胨、酵母提取物、氯化钠和琼脂组成,最终 pH 为 7.5±0.2。该培养基可为大肠杆菌及常用工程菌株提供稳定的固体培养环境,适用于单菌落分离、转化子筛选、菌株纯化和短期保存。对于需要偏高 pH 条件的分子克隆实验,LB琼脂培养基(pH 7.5)是较为合适的选择。