LB琼脂培养基（Miller）：分子生物学中大肠杆菌固体培养的经典培养基
- 2026-06-25 14:14:09
- 逗点生物
LB琼脂培养基（Miller）：分子生物学中大肠杆菌固体培养的经典培养基
产品信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | LB琼脂培养基 |
| 英文名称 | LB Agar（Miller） |
| 产品货号 | GF1251 |
| 包装规格 | 250 g/瓶 |
| 配制比例 | 40.0 g/L |
| 灭菌条件 | 121℃高压灭菌 20 min |
| 产品用途 | 用于分子生物学中大肠杆菌及常用工程菌株的固体培养、单菌落分离、转化子筛选、菌株纯化和短期保存 |
| 参考来源 | 《分子克隆实验指南》相关配方 |
配方组成与作用
| 成分 | 用量（g/L） | 主要作用 | 对培养基用途的贡献 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨 | 10.0 | 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 | 支持大肠杆菌及常用工程菌株生长 |
| 酵母提取物 | 5.0 | 提供维生素、核苷酸、矿物质和生长因子 | 促进菌体增殖，提高菌落形成能力 |
| 氯化钠 | 10.0 | 维持渗透压和离子强度 | 构成 Miller 高盐 LB 体系，适合多数常规分子克隆实验 |
| 琼脂 | 15.0 | 培养基凝固剂 | 形成固体培养表面，便于划线分离、涂布培养和菌落挑取 |
| 最终 pH（25℃） | 7.0±0.2 | 维持接近中性的培养环境 | 适合大肠杆菌及常用工程菌株培养 |
LB琼脂培养基的应用特点
LB琼脂培养基本身不是选择性培养基，不含抗生素、诱导剂、显色底物或特殊抑制剂。若用于质粒转化子筛选，应在灭菌后冷却至约 50～55℃时，无菌加入相应抗生素，如氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素或四环素等。抗生素一般不应与培养基一起高压灭菌，否则可能因热降解导致筛选压力下降。
在分子克隆实验中，LB琼脂平板常用于转化后菌液涂布培养，培养后可观察菌落生长情况并挑取单菌落进行后续扩增、鉴定或质粒提取前培养。对于不含选择压力的普通菌株培养，LB琼脂可用于菌株活化、纯化和短期保存。需要注意的是，长期保存菌种通常不依赖 LB 平板，而应采用甘油菌、冻干管或其他合适的保存方式。
Miller 配方的 LB琼脂含 10.0 g/L 氯化钠，适用于多数常规大肠杆菌实验菌株。若实验体系对盐浓度敏感，或实验方案明确要求低盐 LB，应选择 Lennox 配方或其他指定配方，避免盐浓度变化影响菌体状态、质粒稳定性或筛选结果。
使用方法
称取 LB琼脂培养基干粉 40.0 g，加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中，搅拌并加热至完全溶解，再定容至 1 L。分装后于 121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后，将培养基冷却至约 50～55℃，如需添加抗生素或其他热敏性添加剂，应在无菌条件下加入并充分混匀，然后倒入无菌培养皿中制成平板。
平板凝固后可用于划线分离、涂布培养或转化子筛选。常规培养条件为 35～37℃培养 12～18 h，具体培养时间应根据菌株类型、接种量、抗生素种类和实验目的调整。已加入抗生素的平板应按照相应抗生素稳定性要求保存和使用，不宜长期暴露在室温或强光条件下。
质量控制
产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922、大肠杆菌 DH5α 和大肠杆菌 HB101 作为质控菌株，在 36±1℃培养 12～18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长，生产率比值 PR 应不低于 0.7，菌落通常呈灰白色。
| 质控菌株 | 培养条件 | 质控评定指标 |
|---|---|---|
| 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | 36±1℃，12～18 h | PR≥0.7，灰白色菌落 |
| 大肠杆菌 DH5α | 36±1℃，12～18 h | PR≥0.7，灰白色菌落 |
| 大肠杆菌 HB101 | 36±1℃，12～18 h | PR≥0.7，灰白色菌落 |
储存条件与注意事项
本品应置于室温、避光、干燥处保存，使用后立即旋紧瓶盖，防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况，不建议继续使用，以免影响称量准确性、溶解性、pH 和菌落生长表现。
本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途，不得用于临床诊断。实验结束后的带菌平板、培养物、吸头、接种环等污染物，应按实验室生物安全要求处理，通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。
小结
LB琼脂培养基（Miller）是一种经典、通用的分子生物学固体培养基，由 10.0 g/L 胰蛋白胨、5.0 g/L 酵母提取物、10.0 g/L 氯化钠和 15.0 g/L 琼脂组成，最终 pH 为 7.0±0.2。该培养基可为大肠杆菌及常用工程菌株提供稳定的固体培养环境，适用于单菌落分离、转化子筛选、菌株纯化、划线培养和短期保存，是分子克隆实验中使用频率较高的基础培养基之一。
