LB肉汤培养基（pH 7.5）：适用于偏高pH分子生物学实验的基础液体培养基
- 2026-06-25 14:14:09
- 逗点生物
LB肉汤培养基（pH 7.5）：适用于偏高pH分子生物学实验的基础液体培养基
产品信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | LB肉汤培养基（pH 7.5） |
| 英文名称 | LB Broth（Miller, pH 7.5） |
| 产品货号 | GF1252 |
| 包装规格 | 250 g/瓶 |
| 配制比例 | 25.0 g/L |
| 灭菌条件 | 121℃高压灭菌 20 min |
| 产品用途 | 用于分子生物学中需要偏高 pH 条件的试验；适用于大肠杆菌及工程菌株的活化、扩增培养、质粒制备前培养、蛋白表达前培养和菌液制备 |
| 参考来源 | 《分子克隆实验指南》相关配方 |
配方组成与作用
| 成分 | 用量（g/L） | 主要作用 | 对培养基用途的贡献 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨 | 10.0 | 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 | 支持大肠杆菌及常用工程菌株生长 |
| 酵母提取物 | 5.0 | 提供维生素、核苷酸、矿物质和生长因子 | 促进菌体增殖，提高培养稳定性 |
| 氯化钠 | 10.0 | 维持渗透压和离子强度 | 构成 Miller 型 LB 体系，适合多数常规分子克隆实验 |
| 最终 pH（25℃） | 7.5±0.2 | 维持偏中性至微碱性培养环境 | 适用于需要较高 pH 条件的大肠杆菌培养实验 |
pH 7.5 LB肉汤的应用特点
LB肉汤培养基（pH 7.5）本身不是选择性培养基，不含抗生素、诱导剂或特殊抑制剂。用于携带质粒或表达载体的工程菌培养时，应根据载体抗性标记，在灭菌冷却后的培养基中无菌加入相应抗生素，例如氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素或四环素等。抗生素通常不应随培养基一起高压灭菌，以免热降解导致筛选压力不足。
pH 7.5 的设置适合对培养环境 pH 有特定要求的实验。例如某些分子克隆、质粒扩增或蛋白表达体系可能要求培养基处于略偏碱性条件，以减少 pH 差异对菌体状态、载体稳定性或表达体系的影响。实际使用时，应按照实验方案选择 pH 7.0、pH 7.5 或其他特定 pH 的 LB 培养基，不建议在未验证的情况下随意替换。
需要注意的是，LB肉汤可用于工程菌短期活化和培养，但不宜单独作为长期保存体系。若需保存大肠杆菌或工程菌菌种，通常应与无菌甘油等保护剂配合制备甘油菌，并置于低温条件下保存。
使用方法
称取 LB肉汤培养基（pH 7.5）干粉 25.0 g，加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中，搅拌并加热至完全溶解，再定容至 1 L。根据实验需要分装于三角瓶、培养瓶、试管或离心管中，121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后冷却备用。
用于常规大肠杆菌培养时，可接种新鲜单菌落或适量种子液，通常在 35～37℃条件下振荡培养 12～18 h。若用于质粒制备前培养，应控制接种量、培养体积、装液量和培养时间，避免过度培养导致菌体老化或质粒稳定性下降。若用于蛋白表达相关实验，应根据宿主菌株、表达载体、诱导剂浓度、诱导温度和目标蛋白性质优化培养条件。
质量控制
产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和大肠杆菌 DH5α 作为质控菌株，在 36±1℃培养 12～18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长，肉汤出现明显浑浊，浑浊度达到规定要求。
| 质控菌株 | 培养条件 | 质控评定指标 |
|---|---|---|
| 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | 36±1℃，12～18 h | 肉汤浑浊，浑浊度 2 |
| 大肠杆菌 DH5α | 36±1℃，12～18 h | 肉汤浑浊，浑浊度 2 |
储存条件与注意事项
本品应置于室温、避光、干燥处保存，使用后立即旋紧瓶盖，防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况，不建议继续使用，以免影响称量准确性、溶解性、pH 和培养效果。
本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途，不得用于临床诊断。实验结束后的带菌培养物、移液吸头、培养瓶、离心管等污染物，应按实验室生物安全要求处理，通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。
小结
LB肉汤培养基（pH 7.5）是一种适用于偏高 pH 分子生物学实验的基础液体培养基，由 10.0 g/L 胰蛋白胨、5.0 g/L 酵母提取物和 10.0 g/L 氯化钠组成，最终 pH 为 7.5±0.2。该培养基可用于大肠杆菌及常用工程菌株的活化、扩增培养、质粒制备前培养、蛋白表达前培养和菌液制备。对于明确要求 Miller 型 LB 且 pH 为 7.5 的实验体系，使用该培养基有助于保持培养条件一致性和实验重复性。
