LB琼脂培养基（Lennox，pH 7.5）：适用于低盐、偏高pH分子生物学实验的固体培养基

产品信息

配方组成与作用

Lennox低盐配方与pH 7.5的应用特点

LB培养基常见配方之间的主要差异之一是氯化钠含量。Miller 型 LB 通常含 10.0 g/L 氯化钠，而 Lennox 型 LB 含 5.0 g/L 氯化钠。盐浓度会影响培养基渗透压、菌体生理状态、质粒稳定性以及部分抗生素筛选表现，因此在分子克隆实验中应根据实验方案选择对应配方，不宜将 Miller、Lennox 或其他低盐配方随意替换。

本产品同时具有 Lennox 低盐体系和 pH 7.5 两个特点。低盐条件适合对盐浓度较敏感的实验体系，pH 7.5 则适合需要略偏碱性环境的培养条件。对于某些转化子筛选、载体构建、菌株纯化或后续蛋白表达前的单克隆准备步骤，若实验方案明确要求低盐且偏高 pH 的 LB 固体培养基，使用该配方有助于保持培养条件一致性。

LB琼脂培养基本身不是选择性培养基，不含抗生素、诱导剂、显色底物或特殊抑制剂。若用于质粒转化子筛选，应在培养基灭菌后冷却至约 50～55℃时，无菌加入相应抗生素，如氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素或四环素等。抗生素一般不应与培养基一起高压灭菌，否则可能因热降解导致筛选压力下降。

使用方法

称取 LB琼脂培养基（Lennox，pH 7.5）干粉 35.0 g，加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中，搅拌并加热至完全溶解，再定容至 1 L。分装后于 121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后，将培养基冷却至约 50～55℃，如需添加抗生素或其他热敏性添加剂，应在无菌条件下加入并充分混匀，然后倒入无菌培养皿中制成平板。

平板凝固后可用于划线分离、涂布培养、转化子筛选或菌株短期保存。常规培养条件为 35～37℃培养 12～18 h，具体培养时间应根据菌株类型、接种量、抗生素种类和实验目的调整。已加入抗生素的平板应按照相应抗生素稳定性要求保存和使用，不宜长期暴露在室温或强光条件下。

需要注意的是，LB琼脂平板适合菌株短期培养、纯化和挑取单菌落，但不适合作为长期菌种保存体系。若需长期保存大肠杆菌或工程菌菌种，通常应制备甘油菌、冻干管或采用其他合适的低温保存方式。

质量控制

产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922、大肠杆菌 DH5α 和大肠杆菌 TOP10 作为质控菌株，在 36±1℃培养 12～18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长，生产率比值 PR 应不低于 0.7。

储存条件与注意事项

本品应置于室温、避光、干燥处保存，使用后立即旋紧瓶盖，防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况，不建议继续使用，以免影响称量准确性、溶解性、pH 和菌落生长表现。

本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途，不得用于临床诊断。实验结束后的带菌平板、培养物、吸头、接种环等污染物，应按实验室生物安全要求处理，通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

小结

LB琼脂培养基（Lennox，pH 7.5）是一种低盐、偏高 pH 的分子生物学固体培养基，由 10.0 g/L 胰蛋白胨、5.0 g/L 酵母提取物、5.0 g/L 氯化钠和 15.0 g/L 琼脂组成，最终 pH 为 7.5±0.2。该培养基适用于对盐浓度敏感且需要较高 pH 条件的大肠杆菌及工程菌株固体培养，可用于划线分离、涂布培养、转化子筛选、菌株纯化、单菌落挑取和短期保存。对于明确要求 Lennox 低盐体系和 pH 7.5 条件的分子生物学实验，该培养基有助于保持培养条件稳定和实验重复性。