LB Pro肉汤培养基:适用于大肠杆菌快速增菌与分子生物学实验的基础培养基
- 2026-06-25 14:14:27
- 逗点生物
LB Pro肉汤培养基:适用于大肠杆菌快速增菌与分子生物学实验的基础培养基
产品信息
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 产品名称 | LB Pro肉汤培养基 |
| 英文名称 | LB Pro Broth |
| 产品货号 | GF1255 |
| 包装规格 | 250 g/瓶 |
| 配制比例 | 25.0 g/L |
| 灭菌条件 | 121℃高压灭菌 20 min |
| 运输与保存 | 常温运输,室温避光干燥保存 |
| 产品用途 | 用于分子生物学试验中大肠杆菌及工程菌株的培养、活化、扩增和菌液制备;适用于质粒制备前培养、蛋白表达前培养及对增菌速度要求较高的实验场景 |
| 参考来源 | 《分子克隆实验指南》相关配方体系 |
配方组成与作用
| 成分 | 用量(g/L) | 主要作用 | 对培养基用途的贡献 |
|---|---|---|---|
| 胰蛋白胨 | 10.0 | 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 | 支持大肠杆菌及常用工程菌株生长和增殖 |
| 酵母提取物 | 5.0 | 提供维生素、核苷酸、矿物质和生长因子 | 促进菌体恢复,提高培养稳定性 |
| 氯化钠 | 10.0 | 维持渗透压和离子强度 | 构成常规 Miller 型 LB 盐环境,适合多数分子生物学培养实验 |
| 最终 pH(25℃) | 7.0±0.2 | 维持接近中性的培养环境 | 适合大肠杆菌及常用工程菌株液体培养 |
LB Pro肉汤培养基的应用特点
LB Pro肉汤培养基主要用于大肠杆菌液体培养。与普通实验室自配 LB 相比,商品化干粉培养基的优势在于配方称量方便、批间稳定性较好,适合需要重复开展分子克隆、质粒制备或表达前培养的实验室使用。对于含质粒的大肠杆菌培养,稳定的营养供给和适宜的盐环境有助于获得较一致的菌体生长状态。
本产品可用于含 pUC19 等质粒的大肠杆菌培养。根据产品性能测试,在接种比例为 1:100 的条件下,使用本产品配制的 LB Pro肉汤培养含 pUC19 质粒的大肠杆菌时,增菌速度较快,OD600 可在 4 h 内达到约 1.5。该数据反映的是特定菌株、质粒、接种比例和培养条件下的测试结果,实际培养效果仍会受到宿主菌株、质粒类型、抗生素浓度、培养温度、装液量、通气条件和振荡速度等因素影响。
LB Pro肉汤培养基本身不是选择性培养基,不含抗生素、诱导剂或特殊抑制剂。用于携带质粒或表达载体的工程菌培养时,应根据载体抗性标记,在灭菌冷却后的培养基中无菌加入相应抗生素,例如氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素或四环素等。抗生素通常不应随培养基一起高压灭菌,以免热降解导致筛选压力不足。
需要注意的是,LB Pro肉汤可用于工程菌短期活化和培养,但不宜单独作为长期菌种保存体系。若需保存大肠杆菌或工程菌菌种,通常应与无菌甘油等保护剂配合制备甘油菌,并置于低温条件下保存。
使用方法
称取 LB Pro肉汤培养基干粉 25.0 g,加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中,搅拌并加热至完全溶解,再定容至 1 L。根据实验需要分装于三角瓶、培养瓶、试管或离心管中,121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后冷却备用。
用于常规大肠杆菌培养时,可接种新鲜单菌落或适量种子液,通常在 35~37℃条件下振荡培养 12~18 h。若用于质粒制备前培养,应控制接种量、培养体积、装液量、培养时间和抗生素浓度,避免过度培养导致菌体老化、质粒稳定性下降或后续提取效果波动。若用于蛋白表达相关实验,应根据宿主菌株、表达载体、诱导剂浓度、诱导温度和目标蛋白性质优化培养条件。
对于高密度培养或蛋白表达前培养,不应只依赖延长培养时间来提高菌体量。培养体系的通气条件、碳氮源利用、诱导时机和菌体生理状态同样关键。实际应用中,可结合 OD600、生长曲线和后续实验结果建立适合本实验体系的培养条件。
质量控制
产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922、大肠杆菌 DH5α 和大肠杆菌 HB101 作为质控菌株,在 36±1℃培养 12~18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长,肉汤出现明显浑浊,浑浊度达到规定要求。
| 质控菌株 | 培养条件 | 质控评定指标 |
|---|---|---|
| 大肠埃希氏菌 ATCC 25922 | 36±1℃,12~18 h | 肉汤浑浊,浑浊度 2 |
| 大肠杆菌 DH5α | 36±1℃,12~18 h | 肉汤浑浊,浑浊度 2 |
| 大肠杆菌 HB101 | 36±1℃,12~18 h | 肉汤浑浊,浑浊度 2 |
性能数据说明
本产品配制的 LB Pro肉汤用于含 pUC19 质粒的大肠杆菌增菌测试时,在接种比例为 1:100 的条件下,OD600 可在 4 h 内达到约 1.5,说明该培养基可支持工程菌较快增殖。该数据可作为产品性能参考,但不应简单等同于所有菌株、所有质粒和所有培养条件下均可获得相同结果。若用于质粒制备、蛋白表达或工艺放大,建议结合具体菌株和载体建立本实验室的培养时间、接种比例和收获标准。
储存条件与注意事项
本品应置于室温、避光、干燥处保存,使用后立即旋紧瓶盖,防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况,不建议继续使用,以免影响称量准确性、溶解性、pH 和培养效果。
本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途,不得用于临床诊断。实验结束后的带菌培养物、移液吸头、培养瓶、离心管等污染物,应按实验室生物安全要求处理,通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。
小结
LB Pro肉汤培养基是一种适用于大肠杆菌及工程菌株培养的分子生物学基础液体培养基,由 10.0 g/L 胰蛋白胨、5.0 g/L 酵母提取物和 10.0 g/L 氯化钠组成,最终 pH 为 7.0±0.2。该产品可用于菌株活化、扩增培养、菌液制备、质粒制备前培养和蛋白表达前培养。对于含 pUC19 质粒的大肠杆菌,在特定测试条件下可表现出较快增菌速度,适合对培养效率和实验重复性有要求的分子生物学应用场景。




