LB琼脂培养基(Lennox):适用于盐浓度敏感实验的低盐LB固体培养基

2026-06-25 14:14:27
逗点生物
简介

LB琼脂培养基(Lennox):适用于盐浓度敏感实验的低盐LB固体培养基

产品信息

项目 内容
产品名称 LB琼脂培养基(Lennox)
英文名称 LB Agar(Lennox)
产品货号 GF1256
包装规格 250 g/瓶
配制比例 35.0 g/L
灭菌条件 121℃高压灭菌 20 min
运输与保存 常温运输,室温避光干燥保存
产品用途 用于分子生物学中对盐浓度敏感的试验;适用于大肠杆菌及工程菌株的固体培养、单菌落分离、转化子筛选、菌株纯化和短期保存
参考来源 《分子克隆实验指南》相关配方体系

配方组成与作用

成分 用量(g/L) 主要作用 对培养基用途的贡献
胰蛋白胨 10.0 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 支持大肠杆菌及常用工程菌株生长
酵母提取物 5.0 提供维生素、核苷酸、矿物质和生长因子 促进菌体恢复和菌落形成
氯化钠 5.0 维持渗透压和离子强度 构成 Lennox 低盐 LB 体系,适合盐浓度敏感实验
琼脂 15.0 培养基凝固剂 形成固体培养表面,便于划线分离、涂布培养和单菌落挑取
最终 pH(25℃) 7.0±0.2 维持接近中性的培养环境 适合大肠杆菌及常用工程菌株固体培养

Lennox低盐配方的应用特点

LB 培养基常见配方之间的主要区别之一是氯化钠含量。Miller 型 LB 通常含 10.0 g/L 氯化钠,而 Lennox 型 LB 含 5.0 g/L 氯化钠。盐浓度差异会影响培养基渗透压、菌体生理状态、质粒稳定性以及部分抗生素筛选表现。因此,在分子克隆实验中,如果实验方案指定使用 Lennox 配方,应使用对应低盐 LB 培养基,不建议直接用 Miller 型 LB 替代。

LB琼脂培养基(Lennox)本身不是选择性培养基,不含抗生素、诱导剂、显色底物或特殊抑制剂。若用于质粒转化子筛选,应在培养基灭菌后冷却至约 50~55℃时,无菌加入相应抗生素,如氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素或四环素等。抗生素一般不应与培养基一起高压灭菌,否则可能因热降解导致筛选压力下降。

在实际应用中,本产品可用于转化后菌液涂布培养、工程菌单菌落分离、菌株纯化和后续挑取单克隆。对于盐浓度敏感的菌株、载体体系或筛选条件,Lennox 低盐 LB 琼脂有助于减少高盐条件带来的干扰,使培养条件更符合实验方案要求。

使用方法

称取 LB琼脂培养基(Lennox)干粉 35.0 g,加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中,搅拌并加热至完全溶解,再定容至 1 L。分装后于 121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后,将培养基冷却至约 50~55℃,如需添加抗生素或其他热敏性添加剂,应在无菌条件下加入并充分混匀,然后倒入无菌培养皿中制成平板。

平板凝固后可用于划线分离、涂布培养、转化子筛选或菌株短期保存。常规培养条件为 35~37℃培养 12~18 h,具体培养时间应根据菌株类型、接种量、抗生素种类和实验目的调整。已加入抗生素的平板应按照相应抗生素稳定性要求保存和使用,不宜长期暴露在室温或强光条件下。

需要注意的是,LB琼脂平板适合菌株短期培养、纯化和挑取单菌落,但不适合作为长期菌种保存体系。若需长期保存大肠杆菌或工程菌菌种,通常应制备甘油菌、冻干管或采用其他合适的低温保存方式。

质量控制

产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和大肠杆菌 TOP10 作为质控菌株,在 36±1℃培养 12~18 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长,生产率比值 PR 应不低于 0.7。

质控菌株 培养条件 质控评定指标
大肠埃希氏菌 ATCC 25922 36±1℃,12~18 h PR≥0.7
大肠杆菌 TOP10 36±1℃,12~18 h PR≥0.7

储存条件与注意事项

本品应置于室温、避光、干燥处保存,使用后立即旋紧瓶盖,防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况,不建议继续使用,以免影响称量准确性、溶解性、pH 和菌落生长表现。

本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途,不得用于临床诊断。实验结束后的带菌平板、培养物、吸头、接种环等污染物,应按实验室生物安全要求处理,通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

小结

LB琼脂培养基(Lennox)是一种低盐型分子生物学固体培养基,由 10.0 g/L 胰蛋白胨、5.0 g/L 酵母提取物、5.0 g/L 氯化钠和 15.0 g/L 琼脂组成,最终 pH 为 7.0±0.2。该培养基适用于对盐浓度敏感的大肠杆菌及工程菌株固体培养,可用于划线分离、涂布培养、转化子筛选、菌株纯化、单菌落挑取和短期保存。对于明确要求 Lennox 低盐体系的分子生物学实验,使用对应配方有助于保持培养条件一致性和实验重复性。