SOC肉汤培养基:用于感受态细胞转化后复苏的经典培养基

2026-06-25 14:14:47
逗点生物
简介

SOC肉汤培养基:用于感受态细胞转化后复苏的经典培养基

产品信息

项目 内容
产品名称 SOC肉汤培养基
英文名称 Super Optimal Broth with Catabolite Repression
产品货号 GF1280
包装规格 250 g/瓶
配制比例 31.4 g/L
灭菌条件 116℃高压灭菌 30 min
运输与保存 常温运输,室温避光干燥保存
产品用途 用于基因工程大肠杆菌培养,尤其适用于化学转化或电转化后感受态细胞的复苏;也可用于高效率转化体系中的短时间恢复培养
参考来源 《分子克隆实验指南》及 Hanahan 大肠杆菌质粒转化相关体系

配方组成与作用

成分 用量(g/L) 主要作用 对培养基用途的贡献
胰蛋白胨 20.0 提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源 为转化后大肠杆菌恢复和增殖提供主要营养
酵母浸粉 5.0 提供维生素、核苷酸、矿物质和生长因子 改善营养供给,促进细胞恢复
氯化钠 0.5 维持基础渗透压和离子强度 为细胞复苏提供较温和的盐环境
氯化镁 0.95 提供 Mg²⁺ 与硫酸镁共同构成镁离子体系,有助于维持细胞恢复阶段的离子环境
硫酸镁 1.2 提供 Mg²⁺和硫酸根离子 支持转化后细胞复苏和生理状态恢复
氯化钾 0.186 提供 K⁺ 维持适宜的细胞外离子环境
葡萄糖 3.6 提供易利用碳源和能源 帮助转化后细胞恢复代谢活性,利于抗性标记表达
最终 pH(25℃) 7.0±0.2 维持接近中性的培养环境 适合大肠杆菌感受态细胞复苏和短时间培养

SOC培养基的应用特点

SOC培养基最典型的用途是转化后复苏。化学转化中,感受态细胞通常经过低温离子处理和热激;电转化中,细胞会经历瞬时高电场刺激。这些处理会使细胞处于应激状态,需要在营养充足、离子条件适宜的培养基中短时间恢复。SOC 中的胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖和镁盐体系可以为细胞恢复提供支持,使细胞在接触抗生素选择压力前有时间修复损伤并表达抗性基因。

SOC 与 SOB 的主要区别在于葡萄糖和镁盐体系的设置。SOB 是基础复苏和感受态相关培养基,SOC 则通常用于转化后的恢复培养。对于很多常规克隆实验,转化后加入 SOC 复苏 30~60 min 后再涂布抗生素平板,是提高转化后菌落形成率的常见做法。若实验方案明确要求 SOC,不建议直接用 LB 或 SOB 替代,除非已经通过对照实验确认不会影响转化结果。

需要特别注意,SOC 可用于电转化后的细胞复苏,但不应用作电击前细胞悬液。电转化前细胞通常需要处于低盐或无盐体系中,以降低电弧风险;SOC 含有多种盐类和营养成分,应在电击完成后再加入用于复苏。化学转化后使用 SOC 时,也通常先完成热激处理,再加入 SOC 进行恢复培养。

SOC肉汤培养基本身不是选择性培养基,不含抗生素、诱导剂或显色底物。转化后复苏阶段通常不加入抗生素,待细胞恢复并表达抗性标记后,再涂布或转接至含相应抗生素的选择性平板或培养基中。若用于普通工程菌培养,可根据载体抗性标记,在灭菌冷却后无菌加入相应抗生素。

使用方法

称取 SOC肉汤培养基干粉 31.4 g,加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中,搅拌并加热至完全溶解,再定容至 1 L。根据实验需要分装于试管、离心管、培养瓶或三角瓶中,116℃高压灭菌 30 min。灭菌结束后冷却备用。由于本品含葡萄糖,配制和灭菌时应避免过度加热,以减少培养基颜色加深或成分变化。

用于化学转化后复苏时,一般在热激结束后向细胞中加入适量 SOC 培养基,在适宜温度下短时间恢复培养,再涂布含抗生素的选择性平板。用于电转化后复苏时,应在电击完成后立即加入 SOC 培养基,轻柔混匀后进行恢复培养。具体复苏时间、温度和涂布体积应按照宿主菌株、载体类型和实验方案确定。

若用于制备高效率感受态细胞,应重点控制菌株状态、培养阶段、收获 OD 值、温度、离心条件和缓冲体系。培养基只是影响感受态质量的因素之一,不能替代规范的感受态制备流程。

质量控制

产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和大肠杆菌 DH5α 作为质控菌株,在 36±1℃培养 12~24 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长,肉汤出现明显浑浊。

质控菌株 培养条件 质控评定指标
大肠埃希氏菌 ATCC 25922 36±1℃,12~24 h 生长良好,肉汤浑浊
大肠杆菌 DH5α 36±1℃,12~24 h 生长良好,肉汤浑浊

储存条件与注意事项

本品应置于室温、避光、干燥处保存,使用后立即旋紧瓶盖,防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况,不建议继续使用,以免影响称量准确性、溶解性、pH 和培养效果。

本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途,不得用于临床诊断。实验结束后的带菌培养物、移液吸头、培养瓶、离心管等污染物,应按实验室生物安全要求处理,通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

使用 SOC 进行转化复苏时,应避免过早加入抗生素。抗生素选择压力通常应在复苏完成后通过选择性平板或培养基施加,否则可能降低转化后细胞恢复率。用于电转化实验时,SOC 应在电击后加入,不应作为电击前洗涤或悬浮细胞的溶液。

小结

SOC肉汤培养基是一种用于大肠杆菌感受态细胞转化后复苏的经典培养基,由 20.0 g/L 胰蛋白胨、5.0 g/L 酵母浸粉、0.5 g/L 氯化钠、0.95 g/L 氯化镁、1.2 g/L 硫酸镁、0.186 g/L 氯化钾和 3.6 g/L 葡萄糖组成,最终 pH 为 7.0±0.2。该培养基在 SOB 基础上加入葡萄糖,并配合镁盐体系,为化学转化或电转化后的大肠杆菌提供营养和恢复环境。对于高效率转化实验,SOC 应与规范的感受态制备、转化操作、复苏时间和选择培养条件配合使用,才能获得稳定可靠的实验结果。