YNB(含硫酸铵,不含氨基酸):酵母缺陷型培养基的基础氮源体系

2026-06-25 14:42:09
逗点生物
简介

YNB(含硫酸铵,不含氨基酸):酵母缺陷型培养基的基础氮源体系

产品信息

项目 内容
产品名称 YNB(Yeast Nitrogen Base)(含硫酸铵,不含氨基酸)
英文名称 Yeast Nitrogen Base with Ammonium Sulfate, without Amino Acids
产品货号 GF909
包装规格 100 g/瓶
常规配制浓度 酿酒酵母常用 6.7 g/L;毕赤酵母常用 13.4 g/L,具体以实验方案为准
运输条件 室温运输
储存条件 室温、密封、干燥保存
有效期 3 年
产品用途 用于配制 SD、SC、SG、SGR 等酵母合成培养基;适用于酵母营养缺陷型筛选、质粒维持、转化筛选和定义培养体系

YNB的组成与作用

组分类别 成分 用量(每 L) 主要作用 对培养基用途的贡献
氮源 硫酸铵 5.0 g 提供无机氮源 支持酵母在合成培养基中生长,是 YNB 的主要氮源
盐类 磷酸二氢钾 1.0 g 提供钾离子和磷酸盐 参与缓冲、离子平衡和磷源供应
盐类 硫酸镁 0.5 g 提供 Mg²⁺ 支持多种酶反应和细胞代谢
盐类 氯化钠 0.1 g 提供基础离子强度 维持培养体系基本渗透环境
盐类 氯化钙 0.1 g 提供 Ca²⁺ 参与细胞壁、膜稳定及相关生理过程
维生素 生物素 2.0 μg 参与羧化反应和脂肪酸代谢 支持酵母正常生长,尤其对部分酵母体系较关键
维生素 D-泛酸钙 400.0 μg 辅酶 A 前体 支持能量代谢和脂类代谢
维生素 叶酸 2.0 μg 参与一碳代谢 支持核酸合成和细胞增殖
维生素 肌醇 2.0 mg 参与膜脂代谢 支持细胞膜形成和酵母生长
维生素 烟酸 400.0 μg NAD/NADP 前体 支持氧化还原代谢
维生素 对氨基苯甲酸 200.0 μg 叶酸相关代谢前体 支持一碳代谢相关反应
维生素 维生素 B6 400.0 μg 氨基酸代谢相关辅酶前体 支持氨基酸和氮代谢
维生素 核黄素 / 维生素 B2 200.0 μg FAD、FMN 前体 支持氧化还原反应
维生素 维生素 B1 400.0 μg 硫胺素焦磷酸前体 支持糖代谢和能量代谢
微量元素 硼酸 500.0 μg 提供微量硼元素 维持微量元素平衡
微量元素 硫酸铜 40.0 μg 提供 Cu²⁺ 参与部分氧化还原酶功能
微量元素 碘化钾 100.0 μg 提供碘和钾 补充微量元素
微量元素 氯化铁 200.0 μg 提供铁元素 参与呼吸链、氧化还原和多种酶反应
微量元素 硫酸锰 400.0 μg 提供 Mn²⁺ 参与酶活性调节和抗氧化相关过程
微量元素 钼酸钠 200.0 μg 提供钼元素 补充微量元素,参与特定酶体系
微量元素 硫酸锌 400.0 μg 提供 Zn²⁺ 参与多种酶、转录因子和蛋白结构稳定

YNB、SD、SC、SG和SGR的关系

YNB 只是基础氮源和无机营养体系,不等于 SD 完整培养基。常见 SD 培养基通常由 YNB、葡萄糖和 Dropout supplement 组成;如果制备平板,还需要加入琼脂。SC 培养基通常指合成完全培养基体系,具体组成取决于是否已加入完整氨基酸和碱基补充物;SG 培养基通常以半乳糖为碳源;SGR 则常使用半乳糖与棉子糖组合,常见于需要诱导或预适应碳源切换的酵母实验。

碳源的选择会显著影响酵母代谢和基因表达。例如葡萄糖常用于常规生长和缺陷型筛选;半乳糖常用于 GAL 启动子诱导表达;棉子糖可用于部分 GAL 诱导体系的预培养,以减少葡萄糖阻遏并改善诱导切换效果。因此,YNB 的功能是提供标准化的基础营养背景,而真正决定培养基用途的,还包括碳源、Dropout 组合、pH、琼脂以及是否加入抗生素或其他筛选成分。

常用配方示例

以下为常见 SD 培养基配制示例。不同实验室使用的 Dropout supplement 规格可能不同,应按所用补充物标签说明添加,不能只按固定质量盲目添加。

培养基类型 1 L 配方示例 用途说明
SD 液体培养基 YNB 6.7 g + 葡萄糖 20 g + DO supplement 适量,补水至 1 L 用于酿酒酵母营养缺陷型筛选、质粒维持和定义培养
SD 平板培养基 YNB 6.7 g + 葡萄糖 20 g + DO supplement 适量 + 琼脂 20 g,补水至 1 L 用于酵母转化后筛选、单菌落分离和缺陷型平板培养
SG 培养基 YNB 6.7 g + 半乳糖 20 g + DO supplement 适量,补水至 1 L 常用于半乳糖诱导相关酵母表达体系
SGR 培养基 YNB 6.7 g + 半乳糖与棉子糖按实验方案加入 + DO supplement 适量,补水至 1 L 常用于需要碳源预适应或 GAL 系统相关实验
毕赤酵母相关合成培养基 YNB 常用 13.4 g/L,并按方案加入碳源和所需补充物 用于毕赤酵母定义培养、筛选或表达相关体系,具体配方应按菌株和载体系统确定

使用方法

用于酿酒酵母培养基配制时,通常称取 YNB 粉末 6.7 g,加入适量蒸馏水或去离子水溶解,再按实验方案加入葡萄糖或其他碳源、Dropout supplement,补水至 1 L。如需制备平板,可加入琼脂 20 g/L。常规 SD 培养基可根据需要调节 pH 至约 5.8,再进行灭菌处理。

用于毕赤酵母相关培养基配制时,YNB 常用浓度可为 13.4 g/L,但具体仍应以毕赤酵母表达系统、载体说明书和实验方案为准。毕赤酵母常用培养基体系与酿酒酵母不同,例如 BMGY、BMMY、MD、MM 等培养基对碳源、缓冲体系、生物素和氮源有不同要求,不应将酿酒酵母 SD 配方简单套用到毕赤酵母表达实验中。

由于 YNB 中含有维生素和微量元素,若对定义培养基成分稳定性要求较高,更推荐将 YNB 配制成一定浓度的无菌储备液,通过过滤除菌后加入已灭菌并冷却的基础体系中。若按常规方式整体高压灭菌,也应尽量避免过度加热,以减少热敏性维生素损失和培养基颜色变化。具体采用高压灭菌还是过滤除菌,应结合实验精度要求、污染控制要求和实验室操作习惯确定。

使用注意与常见问题

YNB 不含氨基酸,也不含碳源。若只将 YNB 溶于水接种酵母,通常不能满足完整生长需求。配制 SD 或其他合成培养基时,必须加入合适碳源,并根据菌株缺陷型加入相应 Dropout supplement 或氨基酸、碱基补充物。对于营养缺陷型筛选实验,Dropout 组合必须与筛选标记匹配,否则可能导致假阴性、背景生长或筛选压力不足。

如果制备含葡萄糖的 SD 平板,葡萄糖可随培养基一起灭菌,也可过滤除菌后加入。对普通筛选实验,整体灭菌操作简便;对碳源敏感、维生素稳定性敏感或表达调控实验,建议将葡萄糖和 YNB 分别制备无菌储备液,再加入冷却后的灭菌琼脂基础中,以提高培养基成分稳定性。

若粉剂出现严重吸水、结块、变色或异味,应停止使用。YNB 含多种微量成分,吸潮后不仅影响称量准确性,还可能造成局部成分分布不均,进而影响酵母生长和筛选结果。

储存条件与注意事项

本品应室温密封、干燥保存,避免受潮。开封后应及时旋紧瓶盖,并尽量减少长时间暴露在空气中的时间。未开封产品有效期为 3 年。

本产品仅限专业实验室科研使用,不得用于临床诊断或治疗,不得作为食品、药品或食品加工原料使用。操作时应穿实验服并佩戴一次性手套。实验结束后的带菌培养物、平板、吸头、离心管和其他污染物应按实验室生物安全要求处理,通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃。

小结

YNB(Yeast Nitrogen Base)(含硫酸铵,不含氨基酸)是一种用于酵母合成培养基配制的基础氮源和无机营养体系。其主要组成包括 5.0 g/L 硫酸铵、无机盐、维生素和微量元素,可为酵母提供基础氮源、大量元素、微量元素及维生素,但不提供氨基酸和碳源。使用时需根据实验目的加入葡萄糖、半乳糖、棉子糖等碳源,并配合相应 Dropout supplement 配制成 SD、SC、SG、SGR 等具体培养基。对于酵母营养缺陷型筛选、质粒维持、转化筛选和定义培养实验,YNB 是构建可控培养体系的重要基础成分。