牛奶中氟苯尼考检测的固相萃取方法（Copure® HLB）

2019-07-31 09:52:35

逗点生物

简介：本方法适用于牛奶中氟苯尼考的测定

一、样品提取

准确称取牛奶 2.00 g（精确到 0.01 g），加入乙酸乙酯 15 mL，高速均质 1 min，加入 5 g 无水硫酸钠，涡旋振荡 1 min，摇床振荡 10 min。4000 r/min 转速离心 5 min。将上清液转移至梨形瓶中，于 45 ℃旋蒸至近干，用 6 mL 水溶解残渣，2×5 mL 次正己烷除脂，弃去正己烷层，取 3 mL 水层待净化。

二、SPE 柱净化

实验材料： Copure® HLB，60 mg/3 mL

(1) 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和5 mL 水活化。
(2) 上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以 2 mL/min 的流速过柱，弃去滤液，用 5 mL 水淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，抽干 5 min。用 5 mL 5 % 氨化甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。
(3)重新溶解：洗脱液于45 ℃氮吹吹干，用1 mL甲醇定容，0.22 μm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。

三、仪器条件

设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：224 nm
流动相：A：水 B：乙腈
洗脱方式：等度洗脱，A: B=83: 17
流速：1.0 mL/min

进样体积：20 μL