水产品中氟苯尼考检测的固相萃取方法（Copure® C18）
- 2019-07-31 10:02:09
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取均质后的鱼肉 5.00 g（精确到 0.01 g），加入乙酸乙酯 15 mL，高速均质 1 min，加入 3 g 无水硫酸钠，涡旋混匀 1 min，摇床振荡 10 min。4000 r/min 转速离心 5 min。将上清液转移至梨形瓶中，于 45 ℃旋蒸至近干，用 6 mL 水溶解残渣，2×5 mL 次正己烷除脂，弃去正己烷层，待净化。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® C18，500 mg/6 mL
(1) 活化：C18 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和5 mL 水活化，保持柱体湿润。(2) 上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以 2 mL/min 的流速过柱，弃去滤液，用 5 mL 水淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，抽干小柱。用 6 mL 甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。
(3)重新溶解：洗脱液于45 ℃氮吹吹干，用1 mL甲醇溶解，0.22 μm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：224 nm
流动相：A: 水 B: 乙腈
洗脱方式：等度洗脱，A：B=83：17
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 2 添加水平为 1.0 mg/kg 鱼肉中氟苯尼考的添加回收结果
图 1 添加水平为 1.0 mg/kg 鱼肉中氟苯尼考的检测色谱图
五、订购信息
