动物源性食品中喹诺酮检测的固相萃取方法（Copure® HLB）
- 2019-07-31 13:13:30
- 逗点生物
一、样品提取
准确称取牛奶 / 猪肉试样 5.00 g（精确至 0.01）于 50 mL离心管中，加入 10 mL EDTA-Mellvaine 缓冲液，涡旋 1min，超声提取 10 min，再于 4000 r/min 下离心 5 min，取上清液，按上述步骤再提取两次，离心，合并三次上清液，用 EDTA-Mellvaine 缓冲液定容至 30 mL 备用。二、SPE 柱净化
实验材料： Copure® HLB，200 mg/6 mL
((1) 活化：净化前固相萃取柱依次使用 6 mL 甲醇活化、6 mL 水平衡。(2) 上样和洗脱：取 10 mL 上清液上样，弃去流出液，加2 mL 5 % 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，再用 6 mL 甲醇洗脱并收集洗脱液。
(3) 重新溶解：洗脱液于 50 ℃下氮吹至近干，加 1 mL 甲醇重新溶解，涡旋混匀，过0.22 µm有机滤膜，待上机测试。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695色谱柱：InerSustain®-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2487 紫外检测器
检测波长：254 nm
流动相：A：乙腈 B：0.1 % 甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 流动相梯度洗脱
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
四、实验结果
表 2 添加水平为 1.2 mg/kg 牛奶和猪肉基质中喹诺酮的添加回收结果
图 1 添加水平为 1.2 mg/kg 喹诺酮检测的液相色谱图
五、订购信息
