磺胺、喹诺酮、四环素类抗生素都是常见人畜共用抗生素，因成本低廉、抗菌活性好被广泛用于养殖。本方法以GB 31658.17-2021为参考，用QuEChERS方法净化兽残，选择猪肉、猪肝和虾仁为基质做了三水平加标验证，回收率满足60%~110%，RSD＜10%，符合使用要求，可供客户选择。

准确称取粉碎均匀的肉类样品2 g于干净离心管中，加入2 mL pH=4.0的Mcllvaine-Na2EDTA溶液，涡旋1 min，加入10 mL 1%乙酸乙腈溶液，涡旋1 min，倒入Copure®兽残专用QuEChERS提取管（货号：COQ050051），涡旋混匀后超声提取10 min，5000 r/min离心2 min，待净化。

二、样品净化

取6 mL上清液于净化管（货号COQ015605），2500 r/min涡旋2 min，8000 r/min离心5 min，取上清液5 mL，氮吹近干后用0.1%甲酸水：甲醇=9:1溶液定容至1 mL，上机。

三、基质标准曲线溶液的制备

选同类型空白肉类样品，按上述前处理方法进行操作，取净化后的上清液加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶，配制成上机浓度分别为2 μg/L、10 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、500 μg/L的标准曲线。

四、仪器条件

【色谱条件】

仪器：UPLC-MS/MS

Thermo Fisher TSQ Endura

色谱柱：Commasil®兽残专用柱BEH T-C18 (2.1 mm×100 mm，3 μm)

流动相：A：水（0.1 %甲酸）   B：甲醇：乙腈=2:8（0.1 %甲酸）

洗脱方式：梯度洗脱，见表1

流速：0.3 mL/min

柱温：35℃

进样量：10 μL

表1 梯度洗脱程序

【质谱条件】

离子源：HESI

电喷雾电压：3500 V

鞘气压力：40 arb

辅气压力：2 arb      

离子传输管：380 ℃

辅气温度：350 ℃

表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）

五、实验结果

表3  兽残加标回收实验结果

图1 添加水平为10 μg/kg时猪肉样品中磺胺、喹诺酮、四环素类总离子流图

图2 添加水平为10 μg/kg时猪肝样品中磺胺、喹诺酮、四环素类总离子流图

六、订购信息