SOB肉汤培养基：用于感受态细胞制备与转化复苏的经典培养基

产品信息

项目	内容
产品名称	SOB肉汤培养基
英文名称	Super Optimal Broth
产品货号	GF1278
包装规格	250 g/瓶
配制比例	28.0 g/L
灭菌条件	121℃高压灭菌 20 min
运输与保存	常温运输，室温避光干燥保存
产品用途	用于基因工程大肠杆菌培养、感受态细胞制备、化学转化或电转化后的细胞复苏，也可用于提高转化相关实验中细胞恢复状态
参考来源	《分子克隆实验指南》及 Hanahan 大肠杆菌质粒转化相关体系

配方组成与作用

成分	用量（g/L）	主要作用	对培养基用途的贡献
胰蛋白胨	20.0	提供肽类、氨基酸、氮源和部分碳源	为大肠杆菌快速恢复和生长提供主要营养来源
酵母浸粉	5.0	提供维生素、核苷酸、矿物质和生长因子	改善营养供给，促进细胞恢复和增殖
氯化钠	0.5	维持基础渗透压和离子强度	为大肠杆菌提供较温和的盐环境
硫酸镁	2.4	提供 Mg²⁺，参与细胞离子环境和膜稳定相关过程	有助于感受态细胞制备和转化后复苏阶段的细胞恢复
氯化钾	0.186	提供 K⁺，维持细胞外离子环境	有助于维持适宜的培养体系离子组成
最终 pH（25℃）	7.0±0.2	维持接近中性的培养环境	适合大肠杆菌及常用工程菌株培养

SOB培养基的应用特点

SOB 培养基的典型用途是服务于大肠杆菌转化相关实验。感受态细胞在制备和转化过程中会经历低温、离子处理、热激或电击等应激过程，转化后需要在营养较充分、离子环境适宜的培养基中进行短时间复苏，使细胞恢复代谢活性并表达抗性标记。SOB 的营养组成和 Mg²⁺、K⁺体系正是围绕这类应用建立的。

在化学转化实验中，SOB 可用于感受态细胞制备和转化后复苏；在电转化实验中，也可用于电击后细胞恢复。但在很多标准分子克隆方案中，转化后复苏更常使用 SOC 培养基。SOC 可以理解为在 SOB 基础上加入葡萄糖的复苏培养基，因此如果实验方案明确要求 SOC，不应直接用 SOB 替代，除非已经验证对转化效率和后续筛选没有明显影响。

SOB肉汤培养基本身不是选择性培养基，不含抗生素、诱导剂或显色底物。用于携带质粒的大肠杆菌培养时，应根据载体抗性标记，在灭菌冷却后的培养基中无菌加入相应抗生素。对于转化后复苏步骤，通常应先在无抗生素培养基中短时间恢复，再涂布或转接至含相应抗生素的选择性平板或培养基中，具体条件应以实验方案为准。

使用方法

称取 SOB肉汤培养基干粉 28.0 g，加入约 900 mL 蒸馏水或去离子水中，搅拌并加热至完全溶解，再定容至 1 L。根据实验需要分装于三角瓶、培养瓶、试管或离心管中，121℃高压灭菌 20 min。灭菌结束后冷却备用。

用于感受态细胞制备时，应使用状态良好的新鲜菌种，并严格控制接种比例、培养温度、培养时间和收获 OD 值。细胞生长阶段对感受态制备效果影响很大，过早或过晚收获都可能降低转化效率。用于转化后复苏时，应按实验方案加入适量 SOB 培养基，在适宜温度下短时间振荡或静置复苏，然后再进行选择性培养。

若用于常规大肠杆菌培养，可接种新鲜单菌落或适量种子液，通常在 35～37℃条件下培养。若用于电转化复苏，应注意培养基和耗材的无菌性，并避免不必要的盐分或杂质残留对电转化过程造成干扰。

质量控制

产品可采用大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和大肠杆菌 DH5α 作为质控菌株，在 36±1℃培养 12～24 h 后观察生长情况。合格培养基应支持质控菌株良好生长，肉汤出现明显浑浊。

质控菌株	培养条件	质控评定指标
大肠埃希氏菌 ATCC 25922	36±1℃，12～24 h	生长良好，肉汤浑浊
大肠杆菌 DH5α	36±1℃，12～24 h	生长良好，肉汤浑浊

储存条件与注意事项

本品应置于室温、避光、干燥处保存，使用后立即旋紧瓶盖，防止吸潮结块。未开封产品有效期为 3 年。若干粉出现明显结块、受潮、变色或其他异常情况，不建议继续使用，以免影响称量准确性、溶解性、pH 和培养效果。

本产品仅供科研、教学、工业检测及相关实验室用途，不得用于临床诊断。实验结束后的带菌培养物、移液吸头、培养瓶、离心管等污染物，应按实验室生物安全要求处理，通常可于 121℃高压灭菌 30 min 后再进行废弃处理。

使用 SOB 进行转化相关实验时，应注意区分 SOB 与 SOC。SOB 不含葡萄糖，SOC 通常是在 SOB 基础上加入葡萄糖后用于转化后复苏。如果实验体系对转化效率要求较高，应按既定方案选择 SOB 或 SOC，并保持宿主菌株、质粒 DNA、复苏时间、温度和涂布条件一致。

小结

SOB肉汤培养基是一种适用于基因工程大肠杆菌培养和转化相关实验的经典液体培养基，由 20.0 g/L 胰蛋白胨、5.0 g/L 酵母浸粉、0.5 g/L 氯化钠、2.4 g/L 硫酸镁和 0.186 g/L 氯化钾组成，最终 pH 为 7.0±0.2。该培养基营养较丰富，并提供适宜的 Mg²⁺、K⁺离子环境，可用于感受态细胞制备、化学转化或电转化后的细胞复苏，以及基因工程大肠杆菌的培养。对于高效率转化实验，SOB 应与合适的感受态制备方法、转化操作和复苏条件配合使用，才能获得稳定可靠的实验结果。