煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）：大肠菌群确证试验中的选择性发酵培养基

产品信息

培养基配方

检验原理

BGLB的核心原理是 选择性抑制+乳糖发酵产气。蛋白胨提供细菌生长所需的基础营养，乳糖作为可发酵碳水化合物，为大肠菌群产酸产气反应提供底物。若目标菌能够在培养基中生长并发酵乳糖，就会使培养液变浑浊，并在小倒管内产生气体。

牛胆盐和煌绿是BGLB的选择性成分。牛胆盐可抑制多数革兰氏阳性菌，并模拟肠道胆盐环境；煌绿是一种抑菌性染料，可进一步抑制部分非目标菌。二者共同作用，使耐胆盐、能够发酵乳糖产气的大肠菌群更容易被检出。

原资料中“牛胆粉和煌绿抑制非肠杆菌科细菌”的表述可适当修正为：牛胆盐和煌绿主要抑制多数革兰氏阳性菌及部分非目标菌，但并不能完全抑制所有非目标肠杆菌。因此，BGLB阳性结果通常还需结合标准规定的确证流程或MPN计算进行判定。

使用方法

称取本品 40.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解。分装至装有玻璃小倒管的试管中，每管 10 mL，于 121℃高压灭菌15 min。

分装前应确保小倒管洁净、完整，倒置放入试管后不得残留明显气泡。灭菌后冷却备用，使用前应检查小倒管内是否有气泡、培养液是否澄清、是否有沉淀或污染。若小倒管内灭菌后已有气泡，应在使用前排除或弃用该管，否则会影响产气判读。

质量控制

下列质控菌株接种后，于 36℃±1℃需氧培养24 h～48 h，结果应符合下表要求。

大肠埃希氏菌和弗氏柠檬酸杆菌均属于常见乳糖发酵阳性肠杆菌，接种后应表现为明显生长浑浊并产气。粪肠球菌为革兰氏阳性菌，应受到牛胆盐和煌绿抑制，表现为不生长或无明显浑浊。

结果判读要点

BGLB判读时应同时观察 培养液浑浊度 和 小倒管产气情况。仅有浑浊但无产气，不能简单判为典型大肠菌群阳性；仅小倒管有可疑气泡但培养液不浑浊，也应结合接种前小倒管状态、培养过程和标准方法要求谨慎判断。

典型阳性表现为培养液明显浑浊，小倒管中出现气体，且气体量达到标准要求。若培养48 h后仍无浑浊、无产气，通常判为阴性。若出现轻微浑浊、气泡很少或结果不明确，应按照实验室SOP和标准方法进行复核。

常见问题与控制建议

若目标菌生长不良或不产气，应检查培养基配制量、pH、灭菌条件、干粉保存状态、乳糖质量、小倒管是否正常以及菌株活力。过度灭菌可能影响营养成分和选择性体系，pH偏差也可能影响乳糖发酵和气体产生。

若粪肠球菌生长明显，提示培养基选择性不足，应重点检查牛胆盐和煌绿的有效性、称量准确性以及培养基是否过度稀释。若试管灭菌后出现沉淀、异常颜色或小倒管中已有气泡，应谨慎使用。

BGLB为液体培养基，分装和灭菌过程容易因小倒管气泡、试管污染或装量不一致影响结果。建议每批次制备后进行外观、无菌性和质控菌株验证，正式检测中保留阴性对照和阳性对照，以提高结果可靠性。

应用边界

BGLB主要用于大肠菌群确证和乳糖发酵产气判断，不是最终菌种鉴定培养基。大肠菌群是一组在规定条件下能够发酵乳糖、产酸产气的需氧或兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌，并不等同于单一菌种“大肠埃希氏菌”。因此，若检测目的为大肠埃希氏菌，还需按照相应标准进行进一步确认。

在食品、水、乳制品或其他样品检测中，BGLB的接种来源、培养温度、培养时间和结果报告方式应严格按对应标准执行。尤其在MPN法中，应根据阳性管数查表或计算，不应仅凭单管结果直接推断样品污染水平。

总结

煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）是一种用于大肠菌群和大肠埃希氏菌检测流程中的选择性液体发酵培养基。其通过蛋白胨提供基础营养，以乳糖作为发酵底物，并利用牛胆盐和煌绿抑制多数非目标菌。目标菌若能生长并发酵乳糖产气，则表现为培养液浑浊并在小倒管中产生气体。

本产品质量控制中，大肠埃希氏菌 ATCC 25922 和弗氏柠檬酸杆菌 ATCC 43864 应表现为浑浊度2并产气，粪肠球菌 ATCC 29212 应不生长。只有在培养基配制、分装、小倒管状态、灭菌、pH和质控结果均符合要求时，BGLB才能为大肠菌群确证试验和相关检测提供可靠结果。