哥伦比亚血琼脂基础：营养要求较高细菌培养与溶血试验常用培养基

产品基本信息

配方组成、用量、作用及用途

培养基原理

哥伦比亚血琼脂基础的主要功能是提供一个营养丰富、稳定的固体培养环境。动物组织酶解物提供细菌生长所需的基础营养，氯化钠维持适宜渗透压，琼脂形成稳定平板结构，淀粉则有助于改善部分敏感菌的生长状态。

加入无菌脱纤维羊血后，培养基可用于溶血试验。不同细菌产生的溶血素或相关酶类可对红细胞产生不同程度的破坏，从而形成不同类型的溶血现象。β 溶血表现为菌落周围红细胞完全溶解，形成透明溶血环；α 溶血表现为红细胞部分破坏，常在菌落周围形成绿色或草绿色变色区；γ 溶血通常指无明显溶血现象。

需要注意的是，溶血特征可作为细菌初步鉴别依据，但不能作为最终鉴定结果。实际检测中仍需结合菌落形态、显微镜检查、生化反应、血清学试验或分子检测等方法综合判断。

使用方法

称取本品 41.0 g，加入蒸馏水或去离子水 1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶后于 121℃高压灭菌 15 min。灭菌后冷却至约 45℃，按每 100 mL 基础培养基加入 5 mL 无菌脱纤维绵羊血，轻轻摇匀后倾注平板备用。

加入血液时温度控制非常关键。温度过高可能导致红细胞破裂或不耐热生长因子受损，使培养基颜色变暗并影响溶血环观察；温度过低则容易导致琼脂凝固，造成血液分布不均。一般应在 45～50℃左右加入羊血，并避免剧烈振摇，以免产生大量气泡或造成红细胞机械性破坏。

典型应用

哥伦比亚血琼脂平板常用于营养要求较高细菌的培养和菌落观察，也常用于细菌溶血特征的初步判读。常见应用包括链球菌、葡萄球菌及其他需血液营养支持细菌的培养；观察 α 溶血、β 溶血或不溶血现象；以及在微生物检验流程中对可疑菌落进行纯化和形态观察。

由于血琼脂为营养丰富的非选择性培养基，大多数非苛养菌也可生长。因此，它适合用于培养和观察，但不适合直接作为高度选择性分离某一种目标菌的培养基。如果样品背景菌复杂，通常需要结合选择性培养基、鉴别培养基或后续确证试验使用。

质量控制

下列质控菌株接种后，于 35～37℃培养 24 h，观察菌落生长和溶血特征。

金黄色葡萄球菌出现 β 溶血环，说明培养基能够支持其生长并清晰显示完全溶血现象。肺炎链球菌出现 α 溶血环，说明培养基能够支持营养要求较高菌株生长，并能表现部分溶血特征。

若质控菌株生长不良，应检查基础培养基称量、溶解、灭菌条件、pH、羊血质量、加血温度及平板储存条件。若溶血环不清晰或背景颜色异常，常见原因包括羊血质量不佳、加入血液时温度过高、平板储存时间过长、表面过湿或培养条件不合适。

使用注意事项

哥伦比亚血琼脂基础需加入合格的无菌脱纤维羊血后使用。血液应新鲜、无污染，并符合微生物检验用途要求。加血后培养基应呈均匀红色至暗红色，若出现明显凝块、溶血背景、污染或颜色异常，不宜用于正式试验。

干粉培养基使用后应立即密封，置于避光、干燥处保存，防止吸潮结块或成分降解。配制平板时应严格执行无菌操作，倾注后的平板应表面平整、无明显气泡、无污染和无异常析水。使用前应检查平板状态，避免使用干裂、污染或颜色异常的平板。

总体而言，哥伦比亚血琼脂基础是一种营养丰富、应用广泛的血琼脂基础培养基。加入无菌脱纤维羊血后，可用于营养要求较高细菌的培养及溶血试验，是细菌培养、菌落观察和初步鉴别中常用的重要培养基之一。